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1) 피검시료로부터 음이온교환 크로마토그래피, 소수성 결합 크로마토그래피, 크로마토포커싱 방법 및 등전점에 따른 단백질 분리 방법(IEF)으로 구성된 군으로부터 선택되는 둘 이상의 방법으로 각각 단백질을 분리하는 단계;2) 각 분리된 단백질에서 항원이 알려져 있지 않은 항체를 처리하여 항원-항체 반응시키는 단계;3) 상기 단계 2)의 결과로부터, 항원-항체 반응이 나타나는 분획을 질량 분석에 의해 동정하는 단계; 및,4) 상기 단계 3)에 따른 결과로부터, 둘 이상의 분리 방법에서 공통적으로 동정되는 단백질을 항원 후보 단백질로 판정하는 단계를 포함하는 항체에 대한 항원을 탐색하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 1)의 음이온교환 크로마토그래피는 세포에서 분리된 단백질을 Mono Q HR5/5 컬럼을 이용하여 25 mM Tris/HCl(pH 8
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제 1항에 있어서, 상기 피검시료는 세포, 혈청, 혈장 및 혈액, 또는 이로부터 유래한 단백질, 공지의 단백질의 일부 또는 전체 아미노산 서열을 이용하여 합성된 단백질 및 유전자 재조합 기술을 통해 제조된 재조합 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 항체는 표지체가 접합된 이차항체 및 발색기질을 이용하여 탐지하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 4항에 있어서, 상기 표지체는 HRP(Horseradish peroxidase), 알칼리성 인산분해효소(Alkaline phosphatase), 콜로이드 골드(Coloid gold), FITC(Poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate) 또는 RITC(Rhodamine-B-isothiocyanate)의 형광물질(Fluorescein) 및, 색소(Dye)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제 4항에 있어서, 상기 발색기질은 TMB(3,3'',5,5''-tetramethyl bezidine), ABTS[2,2''-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)] 및 OPD(o-phenylenediamine)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 항원-항체 반응은 ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay), RIA(Radioimmnoassay), 샌드위치 측정법(Sandwich assay), 폴리아크릴아미드 겔 상의 웨스턴 블롯(Western Blot), 면역블롯 분석(Immunoblot assay) 또는 면역조직화학염색 방법 (Immnohistochemical staining)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 항체는 자가항체인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 이후에,1) 단계 4)에서 판정된 항원 후보 단백질을 폴리펩티드로 절단하는 단계;2) 상기 단계 1)의 절단된 폴리펩티드를 질량분석기를 통해 분석하는 단계;3) 상기 단계 2)의 결과를 이용하여 단백질을 동정하는 단계를 추가로 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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1) 피검시료로부터 음이온교환 크로마토그래피, 소수성 결합 크로마토그래피, 크로마토포커싱 방법, 및 등전점에 따른 단백질 분리 방법(IEF)으로 각각 단백질을 분리하는 단계;2) 각 분리된 단백질에서 항원이 알려져 있지 않은 항체를 처리하여 항원-항체 반응시키는 단계;3) 상기 단계 2)의 결과로부터, 항원-항체 반응이 나타나는 분획을 질량 분석에 의해 동정하는 단계; 및,4) 상기 단계 3)에 따른 결과로부터, 둘 이상의 분리 방법에서 공통적으로 동정되는 단백질을 항원 후보 단백질로 판정하는 단계를 포함하는 항체에 대한 항원을 탐색하는 방법
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제 10항에 있어서, 상기 단계 1)의 음이온교환 크로마토그래피는 세포에서 분리된 단백질을 Mono Q HR5/5 컬럼을 이용하여 25 mM Tris/HCl(pH 8
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