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하기의 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 유전자의 핵산 서열 또는 그 상보 가닥 분자가 집적된 프로피온알데히드(Propionaldehyde) 특이적 노출 여부 확인용 DNA 마이크로어레이칩: 유전자 등록번호(Genebank) NM_000029(AGT, angiotensinogen), 유전자 등록번호(Genebank) NM_057159(LPAR1, lysophosphatidic acid receptor 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003004(SECTM1, secreted and transmembrane 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003810(TNFSF10, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, member 10) 및 유전자 등록번호(Genebank) NM_002133(HMOX1, heme oxygenase 1)
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1) 프로피온알데히드 노출이 의심되는 실험군 및 정상 대조군으로부터 각각 분리된, 인간 폐세포 또는 인간 폐암조직 유래 세포에서 각각의 RNA를 분리하는 단계;2) 단계 1)의 실험군 및 대조군의 RNA를 cDNA로 합성하면서 실험군과 대조군을 각기 다른 형광물질로 표지하는 단계;3) 단계 2)의 각기 다른 형광물질로 표지된 cDNA를 제 1항의 DNA 마이크로어레이칩과 혼성화시키는 단계;4) 반응한 DNA 마이크로어레이칩을 분석하는 단계; 및5) 분석한 데이터에서 제 1항의 DNA 마이크로어레이칩에 집적된 유전자들의 발현 정도를 대조군과 비교하여 확인하는 단계를 포함하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법
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삭제
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제 2항에 있어서, 인간 폐암조직 유래 세포는 A549인 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법
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제 2항에 있어서, 단계 3)의 형광물질은 Cy3, Cy5, 폴리-L-라이신-플로오르세인 이소티오시아네이트(poly L-lysine-fluorescein isothiocyanate; FITC), RITC(rhodamine-B-isothiocyanate) 및 로다민(rhodamine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법
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1) 프로피온알데히드 노출이 의심되는 실험군 및 정상 대조군으로부터 각각 분리된, 인간 폐세포 또는 인간 폐암조직 유래 세포에서 각각의 RNA를 분리하는 단계;2) 상기 RNA를 하기 유전자에 상보적이고 하기 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머쌍을 사용하여 실시간 RT-PCR(Real-time reverse transcript polymerase chain reaction)을 수행하는 단계: 유전자 등록번호(Genebank) NM_000029(AGT, angiotensinogen), 유전자 등록번호(Genebank) NM_057159(LPAR1, lysophosphatidic acid receptor 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003004(SECTM1, secreted and transmembrane 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003810(TNFSF10, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, member 10) 및 유전자 등록번호(Genebank) NM_002133(HMOX1, heme oxygenase 1); 및 3) 단계 2)의 유전자 산물을 대조군과 비교하여 발현 정도를 확인하는 단계를 포함하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법
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제 6항에 있어서, 단계 2)의 프라이머 쌍은 단계 2)의 유전자를 증폭할 수 있는, 18 내지 30머 길이의 정방향 및 역방향 프라이머 쌍인 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법
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제 6항에 있어서, 단계 2)의 프라이머 쌍은 하기 프라이머 쌍 1 내지 5로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인방법:프라이머 쌍 1: 서열번호 1로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 2로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 2: 서열번호 3으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 4로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 3: 서열번호 5로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 6으로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 4: 서열번호 7로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 8로 기재되는 역방향 프라이머; 및프라이머 쌍 5: 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머
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제 1항의 DNA 마이크로어레이 칩을 포함하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인용 키트
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제 9항에 있어서, 인간 폐세포 또는 인간 폐암조직 유래 세포를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인용 키트
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하기 각각의 유전자에 상보적이고 하기 각각의 유전자를 증폭할 수 있는 프라이머 쌍을 포함하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인용 키트: 유전자 등록번호(Genebank) NM_000029(AGT, angiotensinogen), 유전자 등록번호(Genebank) NM_057159(LPAR1, lysophosphatidic acid receptor 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003004(SECTM1, secreted and transmembrane 1), 유전자 등록번호(Genebank) NM_003810(TNFSF10, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, member 10) 및 유전자 등록번호(Genebank) NM_002133(HMOX1, heme oxygenase 1)
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제 12항에 있어서, 프라이머 쌍은 증폭 산물이 100 내지 300 bp가 되도록 설계된 18 내지 30머 길이의 정방향 및 역방향 프라이머 쌍인 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인용 키트
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제 12항에 있어서, 프라이머 쌍은 하기 프라이머 쌍 1 내지 5로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 프로피온알데히드에 대한 노출 여부 확인용 키트: 프라이머 쌍 1: 서열번호 1로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 2로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 2: 서열번호 3으로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 4로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 3: 서열번호 5로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 6으로 기재되는 역방향 프라이머;프라이머 쌍 4: 서열번호 7로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 8로 기재되는 역방향 프라이머; 및프라이머 쌍 5: 서열번호 9로 기재되는 정방향 프라이머 및 서열번호 10으로 기재되는 역방향 프라이머
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