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ＯｍｐＦ를 이용하여 목적 단백질을 대장균 세포외로분비생산하는 방법

  • 기술번호 : KST2015114626
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 대장균에서 OmpF 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 발현벡터, 전기 발현벡터에 의해 형질전환된 대장균 및 그를 이용하여 목적 단백질을 대장균 세포외로 분비생산하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 재조합 발현벡터는 엠피실린 저항유전자, OmpF 프로모터 및 OmpF 유전자를 포함한다. 본 발명에 의하면, OmpF 자체 프로모터를 이용한 항시적 발현을 통하여 세포가 성장하면서 OmpF 융합 단백질의 분비 생산이 시작되고, 세포 농도가 높아짐에 따라 분비생산되는 양이 함께 꾸준히 증가하는 방식으로 종래에 비하여 간단한 방법으로 목적 단백질을 세포외로 분비생산할 수 있으므로, 고농도 세포배양을 통하여 단백질을 대량생산할 수 있다.OmpF, 분비생산
Int. CL C12N 15/70 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020010048881 (2001.08.14)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-0447530-0000 (2004.08.27)
공개번호/일자 10-2003-0014959 (2003.02.20) 문서열기
공고번호/일자 (20040908) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2001.08.14)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상엽 대한민국 대전광역시유성구
2 정기준 대한민국 대전광역시유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이한영 대한민국 서울특별시 서초구 반포대로**길 ** (서초동, 아트스페이스 ***빌딩 *층)(리앤리국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2001.08.14 수리 (Accepted) 1-1-2001-0202721-10
2 전자문서첨부서류제출서
Submission of Attachment to Electronic Document		 2001.08.14 수리 (Accepted) 1-1-2001-5227447-62
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2003.04.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2003.05.19 수리 (Accepted) 9-1-2003-0019987-10
5 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2004.01.14 수리 (Accepted) 4-1-2004-0001933-29
6 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2004.01.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0031461-27
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2004.03.19 수리 (Accepted) 4-1-2004-0012166-74
8 지정기간연장신청서
Request for Extension of Designated Period		 2004.03.30 수리 (Accepted) 1-1-2004-0132770-75
9 명세서 등 보정서
Amendment to Description, etc.		 2004.04.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2004-0178378-46
10 의견서
Written Opinion		 2004.04.28 수리 (Accepted) 1-1-2004-0178352-60
11 등록결정서
Decision to grant		 2004.07.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2004-0298366-26
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1

엠피실린 저항유전자, OmpF 프로모터 및 C-말단에 단백질 분해효소가 인식하여 절단할 수 있는 부위를 발현시키는 올리고펩타이드(oligopeptide)와 목적 단백질 유전자를 도입시킬 수 있는 OmpF 유전자를 포함하고, 도 2의 유전자 지도를 가지는, 발현벡터 pOmpF6

2 2

제 1항의 발현벡터 pOmpF6로 형질전환된 대장균 BL101/pOmpF6(Escherichia coli BL101/pOmpF6)(KCTC 1026BP)

3 3

(ⅰ) 엠피실린 저항유전자, OmpF 프로모터 및 OmpF 유전자를 포함하고, 도 2의 유전자 지도를 가지는 발현벡터 pOmpF6에 존재하는 OmpF 유전자의 C-말단에 단백질 분해효소의 인식 및 절단부위를 발현시키는 올리고펩타이드(oligopeptide) 및 목적 단백질 유전자를 도입시켜서, 목적 단백질을 세포외로 분비생산하는 재조합 발현벡터를 작제하는 공정;

(ⅱ) 전기 재조합 발현벡터를 OmpF 유전자가 결실된 숙주세포에 도입하여 형질전환체를 제조하는 공정;

(ⅲ) 전기 형질전환체를 배양하여, 배양액으로 부터 OmpF-융합단백질을 수득하는 공정; 및,

(ⅳ) 전기 융합단백질에 단백질 분해효소를 처리하여, 목적 단백질을 회수하는 공정을 포함하는, 발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

4 4

제 3항에 있어서,

단백질 분해효소는 팩터 Xa(Factor Xa), 엔테로키나제, 게네나제,

IgA 프로테아제, 인테인, 트롬빈, 트립신, 펩신, 서브틸리신 또는

플라스민인 것을 특징으로 하는

발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

5 5

제 3항에 있어서,

목적 단백질은 OmpF와 융합 가능한 펩타이드, 효소 또는 항체인 것을

특징으로 하는

발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

6 6

제 3항에 있어서,

목적 단백질은 베타-엔돌핀인 것을 특징으로 하는

발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

7 7

제 3항에 있어서,

재조합 발현벡터는 pOmpF6βE인 것을 특징으로 하는

발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

8 8

제 3항에 있어서,

숙주세포는 에스케리키아(Escherichia) 속 미생물 또는

살모넬라(Salmonella) 속 미생물인 것을 특징으로 하는

발현벡터 pOmpF6를 이용한 목적 단백질의 분비생산방법

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 JP16521656 JP 일본 FAMILY
2 US07491528 US 미국 FAMILY
3 US20050019857 US 미국 FAMILY
4 WO2003016538 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN1250729 CN 중국 DOCDBFAMILY
2 CN1466628 CN 중국 DOCDBFAMILY
3 JP2004521656 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 JP2004521656 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 JP2004521656 JP 일본 DOCDBFAMILY
6 US2005019857 US 미국 DOCDBFAMILY
7 US7491528 US 미국 DOCDBFAMILY
8 WO03016538 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
9 WO03016538 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
국가 R&D 정보가 없습니다.