요약 | 본 발명은 대장균에서 유래한 세포 외막 단백질 (FadL)을 세포표면 발현모체로 사용하여 목적단백질이나 펩타이드를 세포표면에 효율적으로 발현시킬 수 있는 발현벡터, 상기 발현벡터로 형질전환된 미생물, 상기 형질전환 미생물을 배양하여 목적 단백질을 세포표면에 안정적으로 다량 발현시키는 방법 및 상기 표면발현된 목적 단백질을 이용하는 것을 특징으로 하는 단백질 어레이의 제조방법, 항체의 제조방법, 생물전환방법 및 목적단백질의 개량방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하면, 세포 외막에 목적단백질을 정상적인 기능을 가진 상태로 발현시킬 수 있으므로, 삽입되는 목적유전자에 따라, 재조합 생백신, 여러 펩타이드나 항체의 선별, 중금속 제거 또는 폐수처리에 응용할 수 있는 전세포 흡착제, 전세포 생물전환 등에 유용하게 사용할 수 있다. 세포외막 단백질, 표면발현, FadL, 개량, 단백질 어레이, 항체, 생물전환 |
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Int. CL | C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01) |
CPC | |
출원번호/일자 | 1020040044881 (2004.06.17) |
출원인 | 한국과학기술원 |
등록번호/일자 | 10-0690948-0000 (2007.02.27) |
공개번호/일자 | 10-2005-0119786 (2005.12.22) 문서열기 |
공고번호/일자 | (20070309) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 소멸 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2004.06.17) |
심사청구항수 | 18 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 이상엽 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
2 | 이승환 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
3 | 박시재 | 대한민국 | 대전광역시 서구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 이처영 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
---|---|---|---|
1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전 유성구 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | 특허출원서 Patent Application |
2004.06.17 | 수리 (Accepted) | 1-1-2004-0261250-37 |
2 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2006.04.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0249180-73 |
3 | 명세서등보정서 Amendment to Description, etc. |
2006.06.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2006-0452745-29 |
4 | 의견서 Written Opinion |
2006.06.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0453810-78 |
5 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2006.11.16 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0675889-50 |
6 | 의견서 Written Opinion |
2006.12.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0982374-25 |
7 | 명세서등보정서 Amendment to Description, etc. |
2006.12.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2006-0982389-10 |
8 | 등록결정서 Decision to grant |
2007.02.26 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0109864-89 |
9 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
10 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
12 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
13 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
15 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
번호 | 청구항 |
---|---|
1 |
1 대장균 세포외막 단백질 (FadL)을 코딩하는 fadL 유전자, 항생제 내성유전자, 프로모터 및 목적단백질을 코딩하는 유전자를 포함하고, 상기 목적단백질을 코딩하는 유전자가 숙주세포 내에서 발현될 경우, FadL에 융합되어 세포 표면에 발현이 가능하도록 이루어진 유전자 재조합체를 함유하는 목적단백질의 표면발현벡터 |
2 |
2 제1항에 있어서, fadL 유전자의 중간부위에 링커가 삽입되어 있고, 상기 삽입된 링커에 목적단백질을 코딩하는 유전자가 삽입되어 있는 것을 특징으로 하는 목적단백질의 표면발현벡터 |
3 |
3 제1항에 있어서, fadL 유전자의 염기서열(GenBank Accession No |
4 |
4 삭제 |
5 |
5 제1항에 있어서, 상기 목적단백질은 표면발현에 유리하도록 목적단백질의 아미노산 서열 중 일부분이 제거되거나 위치 특이적으로 돌연변이된 것임을 특징으로 하는 목적단백질의 표면발현벡터 |
6 |
6 제1항에 있어서, 상기 프로모터는 tac 프로모터 또는 gntT104 프로모터인 것을 특징으로 하는 목적단백질의 표면발현벡터 |
7 |
7 제1항 내지 제3항, 제5항 및 제6항 중 어느 한 항의 표면발현벡터로 형질전환된 미생물 |
8 |
8 제7항에 있어서, 형질전환에 사용된 미생물은 목적단백질의 세포 표면발현에 유리하도록, 발현된 목적단백질을 분해하는데 관련된 세포 내 또는 세포 외의 단백질 분해효소를 생산하지 못하도록 변형된 것임을 특징으로 하는 형질전환된 미생물 |
9 |
9 제7항에 있어서, 미생물은 박테리아인 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물 |
10 |
10 제9항에 있어서, 상기 박테리아는 대장균인 것을 특징으로 하는 형질전환된 미생물 |
11 |
11 제7항의 형질전환된 미생물을 배양하여 목적단백질을 세포표면에 발현하는 단계 및 목적단백질이 표면에 발현된 세포를 회수하는 단계를 포함하는 목적단백질의 세포표면 발현방법 |
12 |
12 제11항에 있어서, 목적단백질은 호르몬, 호르몬 유사체, 효소, 효소저해제, 신호전달 단백질 혹은 그 일부분, 항체 혹은 그 일부분, 단쇄항체, 결합단백질, 결합도메인, 펩타이드, 항원, 부착단백질, 구조단백질, 조절단백질, 독소단백질, 사이토카인, 전사조절 인자, 혈액응고 인자 및 식물 생체방어 유도 단백질로 구성된 그룹으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법 |
13 |
13 제12항에 있어서, 효소는 리파제인 것을 특징으로 하는 방법 |
14 |
14 제12항의 방법에 의해 제조되고, 효소활성을 갖는 목적단백질이 표면에 발현된 세포를 이용하는 것을 특징으로 하는 생물전환 방법 |
15 |
15 제12항의 방법에 의해 제조되고, 목적단백질이 표면에 발현된 세포를 기질 표면에 고정화시키는 것을 특징으로 하는 단백질 어레이의 제조방법 |
16 |
16 제12항의 방법에 의해 제조되고, 항원이 표면에 발현된 세포를 인간을 제외한 척추동물에 투여하여 면역반응을 유도하고, 상기 면역반응에 의해 생성된 항체를 회수하는 것을 특징으로 하는 척추동물에서 항체를 제조하는 방법 |
17 |
17 리파제를 이용하여 라세미 에스터 화합물로부터 키랄성 에스터, 키랄성 유기산 또는 키랄성 알코올로 광학분할하는 키랄 화합물의 제조방법에 있어서, 제13항의 방법에 의해 제조된 세포표면에 발현된 리파제를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법 |
18 |
18 하기의 단계를 포함하는 목적단백질의 개량방법: (a) 목적단백질을 코딩하는 유전자의 변이체 라이브러리를 구축하는 단계; (b) 상기 목적단백질의 변이체가 FadL단백질과 융합된 상태로 발현되도록 목적단백질의 유전자 변이체 라이브러리와 fadL유전자를 함유하는 유전자 재조합체를 제작하는 단계; (c) 상기 유전자 재조합체 또는 상기 유전자 재조합체를 포함하는 벡터로 그람음성균, 그람양성균, 방선균, 효모 및 곰팡이로 구성된 그룹으로부터 선택되는 숙주세포를 형질전환하는 단계; (d) 상기 형질전환된 숙주세포를 배양하여 상기 유전자 변이체 라이브러리를 세포표면에 발현하는 단계; 및 (e) 개량된 형질을 갖는 목적단백질이 발현된 세포를 스크리닝하는 단계 |
19 |
19 제18항에 있어서, 상기 스크리닝 단계는 목적단백질의 활성, 목적단백질에 라벨링된 물질을 인식하는 단백질, 목적단백질에 결합하는 라벨링된 리간드 또는 목적단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하는 것을 특징으로 하는 목적단백질의 개량방법 |
20 |
19 제18항에 있어서, 상기 스크리닝 단계는 목적단백질의 활성, 목적단백질에 라벨링된 물질을 인식하는 단백질, 목적단백질에 결합하는 라벨링된 리간드 또는 목적단백질에 특이적으로 결합하는 항체를 이용하는 것을 특징으로 하는 목적단백질의 개량방법 |
지정국 정보가 없습니다 |
---|
순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
---|---|---|---|---|
1 | US08158387 | US | 미국 | FAMILY |
2 | US20070105150 | US | 미국 | FAMILY |
3 | WO2005123924 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
---|---|---|---|---|
1 | GB0615560 | GB | 영국 | DOCDBFAMILY |
2 | GB2425312 | GB | 영국 | DOCDBFAMILY |
3 | GB2425312 | GB | 영국 | DOCDBFAMILY |
4 | US2007105150 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
5 | US8158387 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
6 | WO2005123924 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | DOCDBFAMILY |
국가 R&D 정보가 없습니다. |
---|
특허 등록번호 | 10-0690948-0000 |
---|
표시번호 | 사항 |
---|---|
1 |
출원 연월일 : 20040617 출원 번호 : 1020040044881 공고 연월일 : 20070309 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20070226 청구범위의 항수 : 18 유별 : C12N 15/70 발명의 명칭 : 대장균의 외막 단백질을 이용한 목적 단백질의 미생물표면발현 방법 존속기간(예정)만료일 : 20160228 |
순위번호 | 사항 |
---|---|
1 |
(권리자) 한국과학기술원 대전 유성구... |
제 1 - 3 년분 | 금 액 | 526,500 원 | 2007년 02월 28일 | 납입 |
제 4 년분 | 금 액 | 436,000 원 | 2010년 02월 01일 | 납입 |
제 5 년분 | 금 액 | 436,000 원 | 2011년 02월 01일 | 납입 |
제 6 년분 | 금 액 | 436,000 원 | 2012년 02월 01일 | 납입 |
제 7 년분 | 금 액 | 784,000 원 | 2013년 01월 30일 | 납입 |
제 8 년분 | 금 액 | 784,000 원 | 2014년 01월 27일 | 납입 |
제 9 년분 | 금 액 | 784,000 원 | 2015년 01월 27일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
---|---|---|---|---|
1 | 특허출원서 | 2004.06.17 | 수리 (Accepted) | 1-1-2004-0261250-37 |
2 | 의견제출통지서 | 2006.04.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0249180-73 |
3 | 명세서등보정서 | 2006.06.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2006-0452745-29 |
4 | 의견서 | 2006.06.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0453810-78 |
5 | 의견제출통지서 | 2006.11.16 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0675889-50 |
6 | 의견서 | 2006.12.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0982374-25 |
7 | 명세서등보정서 | 2006.12.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2006-0982389-10 |
8 | 등록결정서 | 2007.02.26 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0109864-89 |
9 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
10 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
12 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
13 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
15 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
기술정보가 없습니다 |
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과제고유번호 | 1355048365 |
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세부과제번호 | kaist66 |
연구과제명 | 신약후보발굴및시스템생명공학기술개발 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 교육과학기술부 |
연구관리전문기관명 | 과학기술부 |
연구주관기관명 | 한국과학기술원 |
성과제출연도 | 2007 |
연구기간 | 200701~200712 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 기초연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
과제고유번호 | 1355048719 |
---|---|
세부과제번호 | 2005-00364 |
연구과제명 | 대사회로분석을통한가상세포시스템개발및산업,의학적응용기술개발 |
성과구분 | 등록 |
부처명 | 교육과학기술부 |
연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
연구주관기관명 | 한국과학기술원 |
성과제출연도 | 2007 |
연구기간 | 200306~201203 |
기여율 | 0.5 |
연구개발단계명 | 응용연구 |
6T분류명 | BT(생명공학기술) |
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[KST2016020818][한국과학기술원] | 주변세포질에 목적 단백질을 과량으로 분비발현할 수 있는 변이균주(Mutant Strains which can Overproduce Target Proteins in the Periplasm) | 새창보기 |
[KST2015118250][한국과학기술원] | 퓨트레신 고생성능을 가지는 변이 미생물 및 이를 이용한 퓨트레신의 제조방법 | 새창보기 |
[KST2014066804][한국과학기술원] | 미생물 세포공장 개발을 위한 합성 조절 RNA 원천기술 | 새창보기 |
[KST2015118725][한국과학기술원] | 코리네박테리아 발현용 합성프로모터 | 새창보기 |
[KST2015114133][한국과학기술원] | L-발린 생성능이 개선된 변이 대장균 W 균주 및 이를 이용한 L-발린의 제조방법 | 새창보기 |
[KST2015118393][한국과학기술원] | 스트렙토마이시스 그리세우스 유래의 조절유전자 sgtR1및 sgtR2를 이용한 재조합 트립신의 대량 생산방법 | 새창보기 |
[KST2015118691][한국과학기술원] | 고분자량의 재조합 실크 또는 실크 유사 단백질 및 이를 이용하여 제조된 마이크로 또는 나노 크기의 거미줄 또는 거미줄 유사 섬유 | 새창보기 |
[KST2015113922][한국과학기술원] | 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR 패밀리 단백질이 융합된 수용성 융합 폴리펩타이드 및 이의 제조 방법 | 새창보기 |
[KST2015112434][한국과학기술원] | 목적단백질 및 코펙터를 재생시키는 효소를 동시에 세포표면에 표면발현시키는 방법 | 새창보기 |
[KST2015119058][한국과학기술원] | 스타필로키나제 발현 재조합 미생물 및 그를 이용한 스타필로키나제의 제조방법 | 새창보기 |
[KST2015112528][한국과학기술원] | 유전자의 단계적 발현 네트워크 및 이를 이용한 세포표식방법 | 새창보기 |
[KST2015118380][한국과학기술원] | 세포표면에서 발현되는 항균 펩타이드 다중합체 | 새창보기 |
[KST2015119516][한국과학기술원] | 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 분석 방법 및 키트 | 새창보기 |
[KST2015113356][한국과학기술원] | YqhC 단백질 변이체, 이를 코딩하는 뉴클레오타이드 서열 및 이 뉴클레오타이드 서열을 발현가능한 형태로 포함하는 YqhD 단백질 과발현 숙주세포 | 새창보기 |
[KST2015113733][한국과학기술원] | L-루신 생성능이 개선된 변이 미생물 및 이를 이용한 L-루신의 제조방법 | 새창보기 |
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