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오이 모자이크 바이러스의 감염성 클론을 이용한 식물체내에서의 외래 유전자 과발현 방법

  • 기술번호 : KST2015160022
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus; CMV)의 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법에 관한 것으로서, 1) 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus; CMV)의 RNA1a 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 2) CMV의 RNA2a 유전자와 2b 유전자를 포함하고 상기 2b 유전자의 3' 말단에 외래 유전자를 삽입할 수 있는 제한 효소 부위를 포함하는 발현벡터에 외래유전자를 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; 3) CMV의 RNA3a 유전자와 코트 단백질(coat protein; CP)을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 4) 상기 1), 2) 및 3) 단계에서 제조된 각각의 재조합 벡터로 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens)를 각각 형질전환하여 각각의 형질전환체를 얻는 단계; 및 5) 상기 각각의 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 형질전환체를 혼합하고 혼합액을 식물체에 도입하는 단계를 포함하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법을 제공한다. 오이 모자이크 바이러스(CMV), 외래 유전자 과발현, 아그로-인필트레이션
Int. CL C12N 15/83 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
CPC C12N 15/67(2013.01) C12N 15/67(2013.01) C12N 15/67(2013.01)
출원번호/일자 1020080052546 (2008.06.04)
출원인 재단법인서울대학교산학협력재단
등록번호/일자 10-0982593-0000 (2010.09.09)
공개번호/일자 10-2009-0126458 (2009.12.09) 문서열기
공고번호/일자 (20100915) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.06.04)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 재단법인서울대학교산학협력재단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김국형 대한민국 서울특별시 관악구
2 서장균 대한민국 서울특별시 관악구
3 권선정 대한민국 서울특별시 관악구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 오대웅 대한민국 서울특별시 관악구 관악로 ***, 디오슈페리움 *단지 ***호 (봉천동)(여강특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 재단법인서울대학교산학협력재단 대한민국 서울특별시 관악구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2008.06.04 수리 (Accepted) 1-1-2008-0401189-38
2 보정요구서
Request for Amendment		 2008.06.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2008-0075719-16
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2008.06.20 수리 (Accepted) 1-1-2008-0442661-83
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2009.03.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2009.04.10 수리 (Accepted) 9-1-2009-0020807-64
6 등록결정서
Decision to grant		 2010.08.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0350171-37
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.08.22 수리 (Accepted) 4-1-2014-5100909-62
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.03.20 수리 (Accepted) 4-1-2015-5036045-28
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus; CMV)의 RNA1a 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 2) CMV의 RNA2a 유전자와 2b 유전자를 포함하고 상기 2b 유전자의 3' 말단에 외래 유전자를 삽입할 수 있는 제한 효소 부위를 포함하는 발현벡터에 외래유전자를 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; 3) CMV의 RNA3a 유전자와 코트 단백질(coat protein; CP)을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 4) 상기 1), 2) 및 3) 단계에서 제조된 각각의 재조합 벡터로 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens)를 각각 형질전환하여 각각의 형질전환체를 얻는 단계; 및 5) 상기 각각의 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 형질전환체를 혼합하고 혼합액을 식물체에 도입하는 단계를 포함하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
2 2
1) 오이 모자이크 바이러스(Cucumber mosaic virus; CMV)의 RNA1a 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 2) CMV의 RNA2a 유전자와 2b 유전자를 포함하고 상기 2b 유전자의 3' 말단에 외래 유전자를 삽입할 수 있는 제한 효소 부위를 포함하는 발현벡터에 외래유전자를 삽입하여 재조합 벡터를 제조하는 단계; 3) CMV의 RNA3a 유전자와 코트 단백질(coat protein; CP)을 코딩하는 유전자를 포함하는 재조합 벡터를 제조하는 단계; 4) 상기 1), 2) 및 3) 단계에서 제조된 각각의 재조합 벡터로 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens)를 각각 형질전환하여 각각의 형질전환체를 얻는 단계; 5) 상기 각각의 아그로박테리움 투메파시엔스(Agrobacterium tumefaciens) 형질전환체를 배양하고 원심분리하여 현탁하는 단계; 6) 상기 각각의 현탁액을 같은 부피비율로 혼합하는 단계; 7) 상기 혼합액을 식물체에 인필트레이션(infiltration)하는 단계; 및 8) 상기 인필트레이션(infiltration)된 식물체에서 상기 외래유전자의 발현을 확인하는 단계를 포함하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
3 3
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 1) 단계에서 제조되는 상기 재조합 벡터는 서열번호 1 또는 서열번호 4인 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
4 4
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 2) 단계의 상기 발현벡터는 서열번호 5인 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
5 5
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 3) 단계에서 제조되는 상기 재조합 벡터는 서열번호 3 또는 서열번호 6인 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
6 6
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 식물체는 니코티아나 벤타미아나(Nicotiana benthamiana)인 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
7 7
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 외래유전자는 제초제 저항성 유전자, 질병 저항성 유전자, 살충제 저항성 유전자, 곡식 또는 과실의 품질에 영향을 주는 유전자, 스크리닝 가능한 표식 유전자 및 환경 또는 스트레스 저항성 유전자로 구성된 그룹에서 선택되는 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
8 8
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서, 상기 외래유전자는 제초제 글리포세이트(Glyphosate)의 저항성 유전자인 5-에놀피루빌시키메이트 3-포스페이트 신타아제(5-Enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase; EPSP synthase), 제초제 비알라포스(바스타)(bialaphos(Basta))의 저항성 유전자인 포스피노트리신 아세틸트랜스퍼라제(phosphinothricin acetyltransferase), 바이러스 저항성 단백질인 코트 단백질(coat protein)을 코딩하는 유전자, 해충 저항성 유전자인 바실러스 투린지엔시스(Bacillus thuringiensis)로부터 분리한 Bt 독소(Bt toxin) 생성 유전자 및 과실 완숙 방지를 위한 1-아미노사이클로프로판-1-카르복실릭산 디아미나아제(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid(ACC) deaminase) 유전자, 바이러스 저항성 식물을 용이하게 선발할 수 있는 식물체 세포의 괴사유발 유전자인 INF1(Phytophthora infestans elicitin gene) 유전자로 구성된 그룹에서 선택되는 것을 특징으로 하는 CMV 감염성 클론을 이용한 식물체 내에서의 외래 유전자 과발현 방법
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