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인산화 단백질의 질량 분석 및 인산화 위치 분석용 표지물질

  • 기술번호 : KST2015199159
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 1) 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 하나 이상의 세린 잔기 및/또는 트레오닌 잔기를 탈인산화시키는 제 1단계; 2) 상기 제 1단계의 탈인산화된 아미노산 잔기를 R-L-G의 구조(이 구조 중, R은 탈인산화된 아미노산 부위와 선택적으로 결합하는 친핵성 작용기이고, G는 양이온 형성을 유발시키는 친양성자성 작용기이며, L은 상기 친핵성 작용기와 친양성자성 작용기를 연결시켜 주는 링커임)로 이루어진 펩티드 반응성 표지물질로 표지시키는 제 2단계; 및 3) 상기 제 2단계에서 표지된 단백질 또는 펩티드 유도체를 양이온 질량 분석방법으로 검출하는 제 3단계를 포함하는 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 질량 분석방법 또는 인산화 위치 분석방법에 있어서, 상기 제 2단계의 표지물질은 구아니디노기를 친양성자성 작용기(G)로 사용하는 것을 특징으로 하는 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 질량 분석방법 또는 인산화 위치 분석방법 및 상기 분석방법의 표지반응용 표지물질에 관한 것이다. 본 발명의 표지물질을 이용하면 기존의 분석방법에 비해 분석 감도가 뛰어나며, 펩티드 내부의 인산화 위치도 정확하게 분석할 수 있으므로, 단백질의 인산화 상태에 따른 세포 신호전달 과정 등 다양한 단백질의 생체 내에서의 기능에 대한 연구 및 여러 질병의 진단에 유용하게 이용될 수 있다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01.01)
CPC G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01)
출원번호/일자 1020040008046 (2004.02.06)
출원인 한국기초과학지원연구원
등록번호/일자 10-0693111-0000 (2007.03.05)
공개번호/일자 10-2005-0079558 (2005.08.10) 문서열기
공고번호/일자 (20070312) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2004.02.06)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국기초과학지원연구원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 안영희 대한민국 충청북도청주시상당구
2 유종신 대한민국 대전광역시유성구
3 김진영 대한민국 대전광역시유성구
4 조건 대한민국 대전광역시유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국기초과학지원연구원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2004.02.06 수리 (Accepted) 1-1-2004-0051132-33
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2005.07.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2005.08.17 수리 (Accepted) 9-1-2005-0050321-86
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2005.08.23 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2005-0403623-32
5 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2005.10.18 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2005-0587149-14
6 의견서
Written Opinion
2005.10.18 수리 (Accepted) 1-1-2005-0587085-91
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.01.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0031326-41
8 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.02.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0095983-59
9 의견서
Written Opinion
2006.02.09 수리 (Accepted) 1-1-2006-0095979-76
10 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.07.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0442190-57
11 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.08.10 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2006-0572141-44
12 의견서
Written Opinion
2006.08.10 수리 (Accepted) 1-1-2006-0572131-98
13 최후의견제출통지서
Notification of reason for final refusal
2006.11.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0703085-61
14 의견서
Written Opinion
2006.11.29 수리 (Accepted) 1-1-2006-0884434-01
15 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2006.11.29 보정승인 (Acceptance of amendment) 1-1-2006-0884430-18
16 등록결정서
Decision to grant
2006.12.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0767132-08
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.10.21 수리 (Accepted) 4-1-2011-5212108-42
18 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.08.31 수리 (Accepted) 4-1-2012-5184331-50
19 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2012.08.31 수리 (Accepted) 4-1-2012-5184293-13
20 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2013-5058386-17
21 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.04.15 수리 (Accepted) 4-1-2013-5058545-81
22 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.22 수리 (Accepted) 4-1-2020-5135881-88
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번호 청구항
1 1
1) 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 세린 잔기 및 트레오닌 잔기 중의 어느 한쪽의 잔기 또는 양쪽 모두의 잔기를 탈인산화(dephosphorylation)시키는 제 1단계;2) 상기 제 1단계의 탈인산화된 아미노산 잔기를 R-L-G의 구조(이 구조 중, R은 탈인산화된 아미노산 부위와 선택적으로 결합하는 친핵성 작용기이고, G는 양이온 형성을 유발시키는 친양성자성 작용기이며, L은 상기 친핵성 작용기와 친양성자성 작용기를 연결시켜 주는 링커(linker)임)로 이루어진 펩티드 반응성 표지물질(tag)로 표지시키는 제 2단계; 및3) 상기 제 2단계에서 표지된 단백질 또는 펩티드 유도체를 질량 분석방법으로 검출하는 제 3단계를 포함하는 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 질량 분석방법에 있어서,상기 제 2단계의 표지물질은 모노-N-보호된 구아니디노기, 디-N-보호된 구아니디노기, N'-보호된 구아니디노기 및 아민이 보호되지 않은 구아니디노기로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 친양성자성 작용기(G)로 사용하는 것을 특징으로 하는 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 질량 분석방법
2 2
삭제
3 3
삭제
4 4
제 1항에 있어서, 상기 제 2단계의 표지물질의 친핵성 작용기(R)는 설프히드릴(sulfhydryl)인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 4항에 있어서, 설프히드릴기는 탈인산화 아미노산 잔기에 대한 표지반응 직전에 또는 표지반응 중에, 설프히드릴기의 이황체를 트리스(2-시아노에틸)포스핀(tris(2-cyanoethyl)phosphine, TCNEP), 트리스(2-카복시에틸)포스핀(tris(2-carboxyethyl)phosphine, TCEP), 트리스(하이드록시프로필)포스핀(tris(hydroxypropyl)phosphine, THPP) 및 트리뷰틸포스핀(tributylphosphine, TBP)으로 구성된 군으로부터 선택되는 트리알킬포스핀(trialkylphosphine) 제제로 환원시킴으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 4항에 있어서, 설프히드릴기는 탈인산화 아미노산 잔기에 대한 표지반응 직전에 또는 표지반응 중에, 보호된 설프히드릴기를 염기 가수분해 또는 친핵성 치환에 의해 탈보호시킴으로써 제조되는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제 1항에 있어서, 상기 제 2단계의 표지물질의 링커(linker, L)는 하이드로카본(hydrocarbon), 에틸렌 옥시드(ethylene oxide) 또는 펩티드(peptide)로 구성되는 군으로부터 선택되는 것을 기본골격으로 하는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제 1항에 있어서, 상기 제 3단계의 표지된 단백질은 질량 분석을 수행하기 전에 효소적 방법 또는 화학적 방법으로 표지된 펩티드로 가수분해되어 분석되는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제 1항의 분석방법에서, 표지물질을 추가로 2H, 13C, 15N, 17O, 18O 및 34S로 구성된 군으로부터 선택되는 동위원소로 치환시킴으로써, 상기 동위원소로 치환되지 않은 표지물질과 상기 동위원소로 치환한 표지물질 각각을 시료에 각각 표지반응시킨 후, 표지화된 두 시료를 합쳐서 질량분석을 수행하는 방법
10 10
제 1항의 인산화 단백질 또는 인산화 펩티드의 질량 분석방법에서의 표지화에 이용되는 표지물질에 있어서, 상기 표지물질은 구아니디노알칸티올인 것을 특징으로 하는 표지물질
11 11
제 10항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노에탄티올인 것을 특징으로 하는 표지물질
12 12
제 10항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노알칸디설피드 또는 구아니디노알킬 티오에스테르로 구성되는 표지물질의 전구체로부터 환원 반응 또는 탈보호 반응에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 표지물질
13 13
제 1항에 있어서, 상기 표지물질은 구아니디노알칸티올인 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제 13항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노에탄티올인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제 14항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노알칸디설피드 또는 구아니디노알킬 티오에스테르로 구성되는 표지물질의 전구체로부터 환원 반응 또는 탈보호 반응에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 방법
16 16
제 9항에 있어서, 상기 표지물질은 구아니디노알칸티올인 것을 특징으로 하는 방법
17 17
제 16항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노에탄티올인 것을 특징으로 하는 방법
18 18
제 16항에 있어서, 상기 구아니디노알칸티올은 구아니디노알칸디설피드 또는 구아니디노알킬 티오에스테르로 구성되는 표지물질의 전구체로부터 환원 반응 또는 탈보호 반응에 의해 제조되는 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.