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rDNA NTS 기반 유전자 다중 삽입 카세트 세트 및 이를 이용한 GRAS 등급의 재조합 효모 균주(Multiple gene integrative cassette sets based on rDNA NTS and GRAS grade recombinant yeasts)

  • 기술번호 : KST2016007187
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 리보좀 DNA 비전사 지역(ribosomal DNA nontranscribed spacer; rDNA NTS) 기반 유전자 다중 삽입 카세트 세트 및 이를 이용한 GRAS 등급의 재조합 효모 균주에 관한 것으로서, 상세하게는 rDNA NTS 단편과 불완전 프로모터를 가진 영양요구성 선택 마커를 포함한 유전자 다중 삽입 카세트를 개발하고, 이를 사카로마이세스 세레비시애 균주의 염색체상으로 최적의 수로 다중 삽입함으로써 항생제 내성 마커를 지니지 않은 안전한 경구용 재조합 균주를 제작하는 것이다. 또한, 본 발명은 상기 균주, 이의 배양물, 균체 파쇄물 또는 이로부터 분리 정제된 노다바이러스 캡시드 단백질(NNV)을 유효성분으로 포함하는 백신 조성물을 제공한다. 또한, 본 발명은 상기 균주, 이의 배양물, 균체 파쇄물 또는 이로부터 분리 정제된 스쿠알렌(squalene) 또는 옥시도스쿠알렌(oxidosqualene)을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가용 조성물을 제공한다. 더 나아가 본 발명은 다양한 재조합 단백질 또는 유용 대사산물을 대량 생산하는 GRAS급의 재조합 효모 균주를 제작할 수 있는 기술을 제공한다.
Int. CL C12N 15/81 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) C12R 1/865 (2006.01) C12N 15/70 (2006.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01)
출원번호/일자 1020150118076 (2015.08.21)
출원인 중앙대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1655696-0000 (2016.09.01)
공개번호/일자 10-2016-0024353 (2016.03.04) 문서열기
공고번호/일자 (20160908) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020140108910   |   2014.08.21
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.08.21)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동작구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 강현아 대한민국 대전 유성구
2 문혜연 대한민국 서울시 동작구
3 김홍진 대한민국 서울특별시 양천구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인태백 대한민국 서울 금천구 가산디지털*로 *** 이노플렉스 *차 ***호

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동작구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.08.21 수리 (Accepted) 1-1-2015-0813615-26
2 [우선심사신청]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Preferential Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2015.09.15 수리 (Accepted) 1-1-2015-0895946-23
3 [우선심사신청]선행기술조사의뢰서
[Request for Preferential Examination] Request for Prior Art Search
2015.09.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 [우선심사신청]선행기술조사보고서
[Request for Preferential Examination] Report of Prior Art Search
2015.09.24 수리 (Accepted) 9-1-2015-0061604-05
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.11.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0776864-11
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.01.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0028031-16
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.01.11 수리 (Accepted) 1-1-2016-0028046-90
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.03.22 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0213937-97
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.05.04 수리 (Accepted) 1-1-2016-0432289-98
10 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.05.04 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0432283-14
11 등록결정서
Decision to grant
2016.07.01 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0481335-85
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.04 수리 (Accepted) 4-1-2018-5125629-51
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.29 수리 (Accepted) 4-1-2019-5151122-15
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.01 수리 (Accepted) 4-1-2019-5153932-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 1로 표시되는 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) 리보좀 DNA 비전사 지역(ribosomal DNA nontranscribed spacer; rDNA NTS)의 N 말단 단편 유전자, 삽입 목적 유전자, 프로모터 영역을 포함하는 영양요구성 선택 표지 마커 유전자 및 서열번호 2로 표시되는 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) rDNA NTS의 C 말단 단편 유전자를 순서대로 포함하는 유전자 다중 삽입 카세트
2 2
삭제
3 3
제1항에 있어서, 상기 영양요구성 선택 표지 마커 유전자는 서열번호 3으로 표시되는 프로모터 영역을 포함하는 URA3 유전자, 서열번호 4로 표시되는 프로모터 영역을 포함하는 LEU2 유전자, 서열번호 5로 표시되는 프로모터 영역을 포함하는 His3 유전자 또는 서열번호 6으로 표시되는 프로모터 영역을 포함하는 TRP1 유전자인 것을 특징으로 하는 유전자 다중 삽입 카세트
4 4
제1항에 있어서, 상기 삽입 목적 유전자는 노다바이러스 캡시드 단백질(NNV) 유전자, HMG-CoA 환원제(HMG1) 유전자 또는 스쿠알렌 에폭시다제(ERG1) 유전자인 것을 특징으로 하는 유전자 다중 삽입 카세트
5 5
제1항, 제3항 또는 제4항의 유전자 다중 삽입 카세트를 포함하는 재조합 벡터
6 6
제5항에 있어서, 상기 재조합 벡터는 도 1(A), 도 2(A), 도 5(A), 도 6(A) 및 도 7(A)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 개열지도를 갖는 것을 특징으로 하는 재조합 벡터
7 7
제5항에 따른 재조합 벡터로 형질전환된 재조합 미생물
8 8
제7항에 있어서, 상기 재조합 미생물은 대장균(E
9 9
제8항에 있어서, 상기 재조합 미생물은 NTS-16U-NNV(기탁번호: KCTC 12608BP), NTS-50L-NNV(기탁번호: KCTC 12610BP), NTS-16U-tHMG1(기탁번호: KCTC 12609BP) 및 NTS-16U-ERG1(기탁번호: KCTC 12607BP)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
10 10
제1항의 유전자 다중 삽입 카세트가 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) rDNA 상에 다중 삽입되어 있는 재조합 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) 균주
11 11
제10항에 있어서, 상기 균주는 노다바이러스 캡시드 단백질(NNV) 유전자가 다중 삽입되어 있는 재조합 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) Y2805/NTS-16U-NNV 균주(기탁번호: KCTC 12611BP)
12 12
제10항에 있어서, 상기 균주는 HMG-CoA 환원제(HMG1) 유전자가 다중 삽입되어 있는 재조합 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) Y2805/NTS-16U-tHMG 균주(기탁번호: KCTC 12612BP)
13 13
제10항에 있어서, 상기 균주는 도 5(A)의 pT-NTS-16U-tHMG1 벡터 및 도 6(A)의 pT-NTS-16U-ERG1 벡터를 SpeI 및 Mlu1 제한효소로 절단하여 얻은 NTS-16U-tHMG1 카세트 및 NTS-16U-ERG1 카세트가 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) rDNA 상에 다중 삽입되어 있는 재조합 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) 균주
14 14
제11항에 따른 균주, 이의 배양물 또는 균체 파쇄물을 유효성분으로 포함하는 백신 조성물
15 15
제14항에 있어서, 상기 백신은 경구용 백신인 것을 특징으로 하는 백신 조성물
16 16
제12항 또는 제13항에 따른 균주, 이의 배양물 또는 균체 파쇄물을 유효성분으로 포함하는 사료 첨가용 조성물
17 17
제10항에 있어서, 상기 균주는 노다바이러스 캡시드 단백질(NNV) 유전자가 다중 삽입되어 있는 재조합 사카로마이세스 세레비시애(Sacchoromyces cerevisiae) Y2806/NTS-50L-NNV 균주(기탁번호: KCTC 12613BP)
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP03184639 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 EP03184639 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 JP06475336 JP 일본 FAMILY
4 JP29527306 JP 일본 FAMILY
5 US10457949 US 미국 FAMILY
6 US20170268011 US 미국 FAMILY
7 WO2016027943 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP3184639 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
2 EP3184639 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
3 EP3184639 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 JP2017527306 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 JP6475336 JP 일본 DOCDBFAMILY
6 US10457949 US 미국 DOCDBFAMILY
7 US2017268011 US 미국 DOCDBFAMILY
8 WO2016027943 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농촌진흥청 중앙대학교 산학협력단 차세대바이오그린21사업 재조합 효모 기반 고면역원성 경구용 어류 백신 소재 개발(2년차)
2 미래창조과학부 중앙대학교 산학협력단 글로벌프론티어연구개발사업 고효율 효모세포 공장 개발을 위한 인공 조절 회로 구축 연구