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미분화 만능 줄기세포로부터 유전자 편집된 세포의 선별 방법

  • 기술번호 : KST2020016420
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 미분화 만능 줄기세포(undifferentiated pluripotent stem cells)로부터 유전자 편집된 세포의 선별 방법에 관한 것으로서, 상기 미분화 만능 줄기세포에서 siRNA에 의한 SLC35F2의 일시적인 녹다운에 의해 유도된 YM155 저항성을 이용하여 유전자 편집된 세포를 농축 선별할 수 있으므로, 이를 효과적으로 유전자 편집된 세포의 선별에 이용할 수 있다.
Int. CL C12Q 1/04 (2017.01.01) C12N 15/113 (2010.01.01) C12N 15/65 (2006.01.01)
CPC
출원번호/일자 1020200000780 (2020.01.03)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2020-0131724 (2020.11.24) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020190056334   |   2019.05.14
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.01.03)
심사청구항수 12

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 차혁진 서울특별시 강남구
2 김근태 서울특별시 송파구
3 박주찬 서울특별시 노원구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 공병욱 대한민국 서울특별시 관악구 남부순환로 ****(봉천동), ***호(제니스특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.01.03 수리 (Accepted) 1-1-2020-0006281-25
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5265458-48
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번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 유전자 편집된 세포의 선별 방법:미분화 만능 줄기세포(undifferentiated pluripotent stem cells)에서 SLC35F2 유전자를 표적화하여 유전자 편집을 진행하는 유전자 편집 단계로, 상기 유전자 편집은 SLC35F2 유전자의 발현을 억제하는 것인, 유전자 편집 단계; 및YM155(CAS 781661-94-7)를 처리하여 SLC35F2 유전자의 발현이 억제되지 않은 세포를 선택적으로 사멸시키는 세포 사멸 유도 단계
2 2
제 1 항에 있어서,상기 방법에 의해 선별된 세포는 1종 이상의 관심 유전자(gene of interest; GOI)를 표적화하여 유전자 편집된 세포를 포함하는 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
3 3
제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,상기 유전자 편집은 안티센스 뉴클레오티드(antisense nucleotide), 짧은 간섭 RNA(small interfering RNA; siRNA), 짧은 헤어핀 RNA(short hairpin RNA; shRNA) 및 단일 가닥 올리고데옥시뉴클레오타이드(single stranded oligodeoxynucleotides; ssODN)로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상을 세포에 도입하여 수행되는 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
4 4
제 3 항에 있어서,상기 siRNA는 서열번호 6의 서열을 갖는 핵산인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
5 5
제 3 항에 있어서,상기 ssODN은 서열번호 9 내지 서열번호 11로 이루어진 군으로부터 선택된 서열을 갖는 핵산인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
6 6
제 2 항에 있어서,상기 관심 유전자는 상기 관심 유전자에 서열 변이가 발생하면 발현되는 리포터 유전자가 상기 관심 유전자의 다운스트림에 작동가능하게 연결된 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
7 7
제 6 항에 있어서,상기 서열 변이는 프레임 이동 돌연변이(frame shift mutation)인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
8 8
제 6 항에 있어서,상기 리포터 유전자는 업스트림에 전사 종결 구조를 형성하는 핵산 서열이 삽입된 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
9 9
제 6 항에 있어서,상기 리포터 유전자는 형광 단백질, 베타-갈락토시다제(beta-galactosidase), 베타-락타마아제(β-lactamase), TEV-프로테아제(TEV-protease), 디히드로엽산환원효소(Dihydrofolate reductase), 루시퍼라제(luciferase), 레닐라 루시퍼라아제(Renilla luciferase), 가우시아 루시퍼라아제(Gaussia luciferase), 선택마커(selection marker), 표면 마커 유전자(surface marker gene) 및 항생제 저항성 단백질로 구성된 군으로부터 선택된 단백질을 코딩하는 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
10 10
제 1 항에 있어서,상기 미분화 만능 줄기세포는 배아 줄기세포(Embryonic Stem Cell; 이하 ESC), 유도만능줄기세포(induced pluripotent stem cells; 이하 iPSCs), 배아 생식세포, 배아 종양세포 및 성체 줄기세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
11 11
제 1 항에 있어서,상기 YM155의 농도는 10 내지 2000 nM인 것인, 유전자 편집된 세포의 선별 방법
12 12
미분화 만능 줄기세포(undifferentiated pluripotent stem cells)에서 유래된 분화세포에 YM155(CAS 781661-94-7) 처리 시 SLC35F2의 발현량이 증가하면 YM155에 대한 세포 독성이 발생하는 것으로 예측하는 단계를 포함하는, YM155의 세포 독성 확인 방법
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1 과학기술정보통신부 서울대학교 바이오의료기술개발사업 전분화성 기능강화 세포 선별 기술 개발 및 특성 연구