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세포영상기법을 이용한 HBV capsid 단백질과 표면단백질 간 상호작용 측정방법과 이를 이용한 HBV의 증식 억제물질의 검색방법

  • 기술번호 : KST2014028250
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 HBV(Hepatitis B Virus) 증식에 필요한 캡시드 단백질과 표면 단백질 간 상호작용(결합도)을 세포 영상으로 측정하여 HBV의 증식 억제물질을 검색하는 방법으로, 구체적으로 HBV의 표면 단백질의 PreS 부위와 세포막 표적화 기능의 PH(Pleckstrin homology) 도메인의 서열을 포함하는 융합단백질, 상기 융합단백질과 상호작용하는 캡시드 단백질과 형광단백질(GFP)을 포함하는 융합단백질 간의 상호작용에 의하여 세포 영상의 변화를 측정하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 HBV 증식에 필요한 단백질 간의 상호작용을 세포 수준에서 검색하는 방법을 이용하여 새로운 HBV의 증식 억제물질을 세포 수준에서 검색하는데 유용하게 이용될 수 있다. HBV, 세포 영상, 단백질 상호작용, 검색방법, 증식 억제물질
Int. CL C12N 15/00 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/533 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01)
CPC G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01) G01N 33/5035(2013.01)
출원번호/일자 1020070119060 (2007.11.21)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-0949310-0000 (2010.03.17)
공개번호/일자 10-2009-0052521 (2009.05.26) 문서열기
공고번호/일자 (20100323) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2007.11.21)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 전혜성 대한민국 경기 성남시 분당구
2 오수진 대한민국 서울시 성북구
3 유연규 대한민국 서울시 성북구
4 김윤경 대한민국 경기도 부천시 원미구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이원희 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2007.11.21 수리 (Accepted) 1-1-2007-0836693-84
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2008.08.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2008.09.11 수리 (Accepted) 9-1-2008-0056961-29
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2009.10.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2009-0449536-73
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2009.11.12 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2009-0695199-91
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2009.11.12 수리 (Accepted) 1-1-2009-0695200-50
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
8 등록결정서
Decision to grant		 2010.03.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0111804-46
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) 하기 i) 및 ii)의 융합단백질을 동시에 발현할 수 있는 발현벡터를 제조하는 단계: i) 서열번호 4로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 캡시드 단백질 부위에 형광 단백질이 연결된 융합단백질; 및, ii) 서열번호 2 또는 서열번호 6으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 표면 단백질의 PreS 부위에 세포막 표적화 기능을 수행할 수 있는 단백질 부위가 연결된 융합단백질; 2) 단계 1)의 발현벡터를 동물세포에 형질도입하는 단계; 3) 단계 2)의 형질도입된 동물세포를 배양하면서 후보물질을 처리하는 단계; 4) 형광 현미경을 이용하여 단계 3)에서 발현된 형광 단백질의 형광 영상을 촬영하는 단계; 및, 5) 형광 영상이 세포질에 위치하게 하는 후보물질을 선별하는 단계를 포함하는 HBV의 증식을 억제하는 물질을 검색하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 1)의 형광 단백질은 그린 형광 단백질(GFP), 레드 형광 단백질(RFP), 블루 형광 단백질(BFP), 옐로우 형광 단백질(YFP), 시안 형광 단백질(CFP; cyan fluorescent protein) 및 강화된 녹색 형광 단백질(EGFP)로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
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제 1항에 있어서, 단계 1)의 세포막 표적화 기능을 수행할 수 있는 단백질 부위는 PLC-δ(phospholipase C delta)의 PH(Pleckstrin homology) 도메인(Genebank ID: 241276, 아미노산 2-175), EEA1(early endosome antigene1)의 FYVE(No full name) 도메인(Genebank ID: L40157, 아미노산 1352-1410), ING2(Inhibitor of growth2)의 PHD(Prolyl-hydroxylase) 도메인(Genebank ID: NM_001564, 아미노산 212-261), Protein kinase C의 C2(calcium/lipid-binding) 도메인(Genebank ID: NM002737, 아미노산 172-260) 및 구아닌 뉴클레오티드 교환 인자 DBS(Guanine nucleotide exchange factor DBS)의 SEC14(S
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하기 i)의 융합단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 하기 ii)의 융합단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현벡터: i) 서열번호 4로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 캡시드 단백질 부위에 형광 단백질이 연결된 융합단백질; 및, ii) 서열번호 2 또는 서열번호 6으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 표면 단백질의 PreS 부위에 세포막 표적화 기능을 수행할 수 있는 단백질 부위가 연결된 융합단백질
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제 11항의 발현벡터로 형질도입된 동물세포
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제 15항에 있어서, 동물세포는 HHEK293T, COS7, HeLa 및 CHO 세포로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 동물세포
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하기 i)의 융합단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제 1 발현벡터 및 하기 ii)의 융합단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제 2 발현벡터가 함께 형질도입된 동물세포: i) 서열번호 2 또는 서열번호 6으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 표면 단백질의 PreS 부위에 세포막 표적화 기능을 수행할 수 있는 단백질 부위가 연결된 융합단백질; 및, ii) 상기 i)의 융합단백질과 상호작용하는 서열번호 4로 기재되는 아미노산 서열을 갖는, HBV의 캡시드 단백질 부위에 형광 단백질이 연결된 융합단백질
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21 21
1) 제 15항 또는 제 17항의 동물세포를 배양하면서 후보물질을 처리하는 단계; 2) 형광 현미경을 이용하여 단계 1)에서 발현된 형광 단백질의 형광 영상을 촬영하는 단계; 및, 3) 형광 영상이 세포질에 위치하게 하는 후보물질을 선별하는 단계를 포함하는 HBV의 증식을 억제하는 물질을 검색하는 방법
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제 15항 또는 제 17항의 동물세포를 포함하는 HBV의 증식을 억제하는 물질의 검색키트
지정국 정보가 없습니다
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN101583871 CN 중국 FAMILY
2 JP22510812 JP 일본 FAMILY
3 US20100316989 US 미국 FAMILY
4 WO2009066964 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 CN101583871 CN 중국 DOCDBFAMILY
2 JP2010510812 JP 일본 DOCDBFAMILY
3 JP2010510812 JP 일본 DOCDBFAMILY
4 JP2010510812 JP 일본 DOCDBFAMILY
5 US2010316989 US 미국 DOCDBFAMILY
6 WO2009066964 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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