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ⅰ) 세포 배양 접시 또는 단백질을 잘 부착시키는 성질을 가진 표면에 콜라겐을 코팅하는 단계;
ⅱ) DDR 단백질의 세포외 도메인을 세포 표면에 발현하는 형질전환 곤충세포를 콜라겐으로 코팅된 배양 접시에 가하여 반응시키는 단계;
ⅲ) 배양접시에 부착된 곤충세포를 고정시킨 후 염색하는 단계; 및
ⅳ) 흡광도를 측정하여 고정된 세포수를 정량하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 DDR(Discoidin Domain Receptor) 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 곤충세포는 sf9, sf21 및 Hi-five로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 세포인 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 곤충세포에서 발현된 DDR 단백질이 동물세포에서와 같이 세포막에 존재하며 세포외 부분은 세포외로 표출되는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 콜라겐은 제 1형, 제 2형 또는 제 3형 콜라겐으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 DDR 단백질 리간드인 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 형질전환 곤충세포는 DDR 단백질의 N-말단 세포외 도메인과 막통과 도메인을 포함하는 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 배큘로 바이러스에 감염된 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 DDR 단백질의 N-말단 세포외 도메인과 막통과 도메인을 포함하는 단백질은 서열번호 2로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 단계 ⅳ)의 흡광도는 고정된 세포에 염색된 염료를 용출하여 측정하는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 DDR 단백질은 DDR2 단백질인 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 DDR 단백질은 포유류에서 유래한 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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제 9항에 있어서, 상기 포유류는 식충목, 피익목, 박쥐목, 영장목, 빈치목, 토끼목, 식육목, 고래목, 관치목, 장비목, 바위너구리목, 바다소목, 말목, 소목, 쥐목으로 구성된 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 상호작용을 정량적으로 분석하는 방법
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ⅰ) 세포 배양 접시에 콜라겐을 코팅하는 단계;
ⅱ) DDR 단백질의 세포외 도메인을 세포 표면에 발현하는 형질전환 곤충세포 및 검색 후보물질을 콜라겐으로 코팅된 배양 접시에 가하여 반응시키는 단계; 및
ⅲ) 후보물질을 투여하지 않은 대조군과 비교하여 DDR 단백질과 콜라겐 결합을 유의하게 저해하는 후보 물질을 선별하는 단계를 포함하는 곤충세포 발현법을 이용하여 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는 방법
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제 11항에 있어서, 상기 형질전환 곤충세포는 DDR 단백질의 N-말단 세포외 도메인과 막통과 도메인을 포함하는 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 배큘로 바이러스에 감염된 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는 방법
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제 12항에 있어서, 상기 DDR 단백질의 N-말단 세포외 도메인과 막통과 도메인을 포함하는 단백질은 서열번호 2로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는 방법
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제 11항에 있어서, DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질이 암, 간경화, 류마티스 질환 또는 동맥경화의 예방 또는 치료제로 사용되는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는 방법
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제 11항에 있어서, 상기 단계 ⅱ)의 후보물질은 펩티드, 단백질, 비펩티드성 화합물, 합성 화합물, 발효 생산물, 세포 추출액, 식물 추출액, 동물 조직 추출액 또는 혈장인 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는 방법
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제 11항에 있어서, 결합 저해는 IC50을 측정하는 것을 특징으로 하는 DDR 단백질과 콜라겐 결합 저해물질을 검색하는방법
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