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pH 제어에 의한 화학적으로 표지된 올리고 핵산의 간편하고 효율적인 분리정제법

  • 기술번호 : KST2019002303
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 pH 제어에 의한 화학적으로 표지된 올리고 핵산의 간편하고 효율적인 분리정제법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 반응용액의 pH 조절에 따른 화학적 표지자의 분배상수 변화를 이용하여 표지화된 핵산을 효율적으로 분리 정제하는 방법 및 키트에 관한 것이다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01) C12N 15/10 (2017.01.01)
CPC C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01) C12Q 1/6806(2013.01)
출원번호/일자 1020170114875 (2017.09.08)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2019-0028009 (2019.03.18) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.09.08)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박소영 대한민국 서울특별시 관악구
2 황지희 대한민국 서울특별시 관악구
3 김성근 대한민국 서울특별시 관악구
4 김영규 대한민국 서울특별시 서초구
5 임순규 대한민국 서울특별시 송파구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 공간 대한민국 대전광역시 서구 둔산서로 ***, *층(둔산 *동, 산업은행B/D)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.09.08 수리 (Accepted) 1-1-2017-0872589-12
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.10.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0690624-91
3 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.12.04 수리 (Accepted) 1-1-2018-1213199-54
4 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2019.01.11 수리 (Accepted) 1-1-2019-0036332-90
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2019.02.08 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0132777-12
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2019.02.08 수리 (Accepted) 1-1-2019-0132780-50
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.05.13 수리 (Accepted) 4-1-2019-5093546-10
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.05.23 수리 (Accepted) 4-1-2019-5101798-31
9 거절결정서
Decision to Refuse a Patent
2019.06.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0428800-31
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.02 수리 (Accepted) 4-1-2019-5154561-59
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5265458-48
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
a) 화학적 표지자 및 상기 화학적 표지자와 반응가능한 핵산을 수용액상에서 반응시켜 반응용액을 준비하는 단계;b) 상기 반응용액의 pH를 미리 설정된 범위내로 조절하는 단계;c) 상기 pH가 조절된 반응용액에 수용액층 및 유기용매층으로 분리되는 유기 용매를 첨가하고 교반하여 혼합 용액을 제조하는 단계; 및d) 상기 유기 용매의 적어도 일부를 제거하는 단계;를 포함하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 c) 단계에서 첨가되는 유기 용매는 물(H2O)을 포함하는 것을 특징으로 하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
3 3
제2항에 있어서,상기 유기 용매는 물(H2O)이 포화된 상태의 유기용매를 사용하는 것을 특징으로 하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 b) 단계에서, 미리 설정된 반응용액의 pH는 화학적 표지자의 pKa보다 낮은 범위인 것을 특징으로 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
5 5
제 4 항에 있어서, 상기 b) 단계는 화학적 표지자의 pKa보다 낮은 pH로 맞춰진 수용액과 상기 반응용액을 혼합함으로써, 혼합된 반응 용액의 pH를 미리 설정된 범위내로 조절하는 것을 특징으로 하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
6 6
제 1 항에 있어서, 추가로 e) 상기 b) 내지 d) 단계를 1 회 이상 수행하는 단계;를 포함하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
7 7
제 1 항에 있어서, 상기 화학적 표지자는 소수성 형광염료 또는 친수성 형광염료인 것을 특징으로 하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
8 8
제 1 항에 있어서, 상기 핵산이 올리고 핵산인 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제 방법
9 9
제 1 항에 있어서, 상기 화학적 표지자가 Alexa 488, Cy 5, ATTO 633, Cy 3, Cy 3B, ATTO 550, ATTO 390, ATTO 647N, Rhodamine 6G, Nile red 중에서 선택되는 적어도 하나 이상인 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제 방법
10 10
제 1 항에 있어서, 상기 유기 용매가 log P 값이 0
11 11
제 1 항에 있어서,상기 유기 용매가 탄소수 3 내지 8 의 알코올, 탄소수 3 내지 8의 에테르, 클로로포름, 탄소수 2 내지 6의 알킬 아세테이트, 탄소수 6 내지 12의 방향족 탄화수소, 탄소수 5 내지 14의 선형 또는 분지형 알칸, 탄소수 5 내지 14의 시클로알칸, 탄소수 5 내지 12의 선형 또는 분지형 알킬기 및 탄소수 5 내지 12의 시클로알킬기를 갖는 탄화수소, 1,1,1-트리클로로에탄 중에서 선택되는 1종 또는 이들의 혼합액인 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제 방법
12 12
제 1 항에 있어서,상기 c) 단계와 d) 단계 사이에 상기 혼합 용액을 원심 분리하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 화학적으로 표지된 핵산의 분리 정제 방법
13 13
핵산과 반응 가능한 화학적 표지자를 포함하며, 수용액을 포함하는 핵산이 투입되는 경우에, 상기 핵산과 화학적 표지자가 반응할 수 있는 제1 용기;소정의 pH값을 가지는 산성 수용액을 포함하는 제3 용기; 및물(H2O)을 적어도 일부 포함하고 있는 유기용매를 포함하는 제4 용기;를 포함하며,상기 제3 용기내 산성 수용액의 pH는, 상기 제1용기내의 화학적 표지자가 핵산과 반응 한 후, 상기 제3 용기의 산성 수용액을 혼합함으로써 얻어지는 혼합용액의 pH가 상기 화학적 표지자의 pKa 보다 낮은 범위가 되도록 설정되는 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트
14 14
핵산과 반응 가능한 화학적 표지자를 포함하는 제1 용기; 수용액을 포함하며, 상기 제1용기내 화학적 표지자와 핵산을 반응시키기 위한 제2 용기;소정의 pH값을 가지는 산성 수용액을 포함하는 제 3 용기; 및물(H2O)을 적어도 일부 포함하고 있는 유기용매를 포함하는 제4 용기;를 포함하며,상기 제3 용기내 산성 수용액의 pH는, 상기 제1용기내의 화학적 표지자가 제2 용기 내에서 핵산과 반응 한 후, 상기 제3 용기의 산성 수용액을 혼합함으로써 얻어지는 혼합용액의 pH가 상기 화학적 표지자의 pKa 보다 낮은 범위가 되도록 설정되는 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트
15 15
핵산과 반응 가능한 화학적 표지자를 포함하는 제1 용기; 수용액을 포함하며, 상기 제1용기내 화학적 표지자와 핵산을 반응시키기 위한 제2 용기;소정의 pH값을 가지는 산성 수용액을 포함하는 제 3 용기; 및물(H2O)을 적어도 일부 포함하고 있는 유기용매를 포함하는 제4 용기; 및상기 화학적 표지자와 반응 가능한 핵산을 포함하는 제5 용기;를 포함하며,상기 제3 용기내 산성 수용액의 pH는, 상기 제1용기내의 화학적 표지자가 제2 용기 내에서 핵산과 반응 한 후, 상기 제3 용기의 산성 수용액을 혼합함으로써 얻어지는 혼합용액의 pH가 상기 화학적 표지자의 pKa 보다 낮은 범위가 되도록 설정되는 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트
16 16
제 13 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,상기 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트는 상기 화학적 표지자와 핵산이 반응 후, 상기 제3 용기의 산성 수용액을 혼합함에 있어, pH를 조정하기 위한 염기성 수용액을 포함하는 용기를 추가적으로 구비하는 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트
17 17
제 13 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,상기 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트는 유기용매와 수용액을 분리할 수 있는 분리장치를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 표지화된 핵산의 분리 정제용 키트
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1 WO2019050222 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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