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하기의 제1 재조합 바이러스 벡터 및 제2 재조합 바이러스 벡터로 정상 인간 간세포주 LX2(Human hepatic stellate cell line LX2)를 형질전환시킨 형질전환 세포주 LX2(pROMO1-firefly/pCMV-renilla stable cell line LX2)로서:상기 제1 재조합 바이러스벡터는 서열번호 1에 기재된 뉴클레오타이드 서열로 이루어진 ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) 프로모터; 및 상기 프로모터에 작동적으로 연결된(operatively linked) 파이어플라이 루시퍼라제(firefly luciferase)-코딩 뉴클레오타이드 서열을 포함하고, 상기 제2 재조합 바이러스 벡터는 CMV(Cytomegalovirus) 프로모터; 및 상기 프로모터에 작동적으로 연결된(operatively linked) 레닐라 루시퍼라제(renilla luciferase)-코딩 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포주
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제 1 항에 있어서, 상기 재조합 바이러스 벡터는 선택 표지로서의 진핵세포에 작용하는 항생제에 대한 내성 유전자를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 세포주
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제 4 항에 있어서, 상기 항생제는 퓨로마이신, 히그로마이신, 네오마이신, 제네티신 및 카나마이신으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포주
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제 1 항에 있어서, 상기 재조합 바이러스는 렌티바이러스(Lentivirus), 베큘로 바이러스(baculovirus), 아데노바이러스(Adeno viruses), 아데노-관련 바이러스(Adeno-associated viruses, AAV), 레트로바이러스(Retrovirus), 헤르페스심플렉스 바이러스(Herpes Simplex virus) 및 배시니아 바이러스(vaccinia virus) 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 세포주
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제 1 항, 제 4 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 세포주를 포함하는 활성 산소 발현량 측정용 조성물
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제 8 항에 있어서, 상기 활성 산소는 미토콘드리아 유래인 것을 특징으로 하는 조성물
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제 1 항, 제 4 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 세포주를 포함하는 독성 물질 스크리닝용 조성물
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다음 단계를 포함하는 미토콘드리아 유래 활성 산소 발현량 측정용 형질전환 세포주 LX2(pROMO1-firefly/pCMV-renilla stable cell line LX2) 제작 방법:(a) (1) 서열번호 1에 기재된 뉴클레오타이드 서열로 이루어진 ROMO1(Reactive oxygen species modulator 1) 프로모터; 및 상기 프로모터에 작동적으로 연결된(operatively linked) 파이어플라이 루시퍼라제(firefly luciferase)-코딩 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 제1 재조합 바이러스벡터; 및 (2) CMV(Cytomegalovirus) 프로모터; 및 상기 프로모터에 작동적으로 연결된(operatively linked) 레닐라 루시퍼라제(renilla luciferase)-코딩 뉴클레오타이드 서열을 포함하는 제2 재조합 바이러스벡터를 제작하는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 제1 재조합 바이러스벡터 및 제2 재조합 바이러스 벡터로 정상 인간 간세포주 LX2(Human hepatic stellate cell line LX2)를 형질감염(transfection)시켜 형질전환된 형질전환 세포주 LX2(pROMO1-firefly/pCMV-renilla stable cell line LX2)를 획득하는 단계
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제 11 항에 있어서, 상기 재조합 바이러스 벡터는 선택 표지로서의 진핵세포에 작용하는 항생제에 대한 내성 유전자를 추가적으로 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제 14 항에 있어서, 상기 항생제는 퓨로마이신, 히그로마이신, 네오마이신, 제네티신 및 카나마이신으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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제11 항에 있어서, 상기 재조합 바이러스는 렌티바이러스(Lentivirus), 베큘로 바이러스(baculovirus), 아데노바이러스(Adeno viruses), 아데노-관련 바이러스(Adeno-associated viruses, AAV), 레트로바이러스(Retrovirus), 헤르페스심플렉스 바이러스(Herpes Simplex virus) 및 배시니아 바이러스(vaccinia virus) 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
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다음을 포함하는 간독성 유발 물질 스크리닝 방법:(a) 제 1 항, 제 4 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항의 세포주를 준비하는 단계로서; 상기 세포주는 pROMO1-Firefly 및 pCMV-Renilla를 발현하는 듀얼루시퍼라제 시스템을 갖고 있으며;(b) 상기 세포주에 시험물질을 처리하는 단계; 및(c) 상기 세포주에서 듀얼루시퍼라제 활성을 측정하여 분석하는 단계
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제 18 항에 있어서, 상기 (c) 단계의 분석 결과 pROMO1-Firefly의 발현 수준이 pCMV-Renilla의 발현 수준에 비해 고수준인 경우, 시험물질을 간독성 유발 물질로 판단하는 것을 특징으로 하는 방법
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