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대장균을 사용한 타이리안 퍼플 세포 염료 생산과 이를 이용한 염색법

  • 기술번호 : KST2022005209
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 주로 6,6'-이브로모인디고 (6BrIG) 로 구성된 타이리안 퍼플은 바다 달팽이에서 추출한 고대 염료로 최근 생체 적합성 반도체 재료로 입증되었다. 그러나, 타이리안 퍼플의 합성은 아직 밝혀지지 않은 생합성 경로와 위치 특이성 브롬화의 어려움으로 인해 제한적이다. 본 발명에서는 트립토판 6-할로게나아제 (SttH), 트립토파나아제 (TnaA) 및 플라빈 함유 모노옥시게나아제 (MaFMO) 를 사용하여 대장균에서 효과적인 6BrIG 생산 전략을 제시한다. 트립토판 할로게나아제는 대장균에서 매우 불용성인 형태로 발현되기 때문에 할로게나아제 반응을 위해 FADH2 를 재생하는 플라빈 환원 효소 Fre 를 SttH 의 N-말단 가용성 태그로 사용하였다. 본 발명의 연속 2-세포 반응 시스템은 브롬화와 브로모 트립토판 분해를 위한 시간과 공간을 분리하여 6BrIG 의 위치 특이적 브롬화 전구체의 대량 생산이 가능하도록 설계된 것이다. 이러한 접근법을 통해, 본 발명에서는 트립토판으로부터 315.0 mg/L 의 6BrIG 를 생산하였고, 위치 특이적 이할로겐화 인디고의 성공적인 합성을 유도하였다. 또한, 본 발명에서는 6BrIG-함유 대장균 세포가 세포 염료로 직접 사용될 수 있음을 제시한다.
Int. CL C12N 15/70 (2006.01.01) C12N 9/02 (2006.01.01) C09B 7/00 (2006.01.01) D06P 1/22 (2006.01.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12N 9/0071(2013.01) C12N 9/0069(2013.01) C09B 7/00(2013.01) D06P 1/228(2013.01)
출원번호/일자 1020200146303 (2020.11.04)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2022-0060370 (2022.05.11) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.11.04)
심사청구항수 18

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이정찬 서울특별시 관악구
2 김병기 서울특별시 서초구
3 김준원 서울특별시 용산구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인코리아나 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 **길 **(역삼동, 케이피빌딩)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.11.04 수리 (Accepted) 1-1-2020-1179001-05
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5265458-48
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2021.01.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2021.04.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2021-0151115-82
5 특허고객번호 정보변경(경정)신고서·정정신고서
2021.07.29 수리 (Accepted) 4-1-2021-5205564-29
6 특허고객번호 정보변경(경정)신고서·정정신고서
2022.04.04 수리 (Accepted) 4-1-2022-5079741-71
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2022.04.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2022-0322596-41
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번호 청구항
1 1
하기 단계를 포함하는, 할로겐화 인디고의 제조 방법:a) 트립토판 할로게나아제를 발현하는 재조합 균주를 트립토판과 반응시키는 단계;b) 트립토파나아제 및 플라빈 함유 모노옥시게나아제 (flavin-containing monooxygenase, FMO) 를 발현하는 재조합 균주를, 단계 a) 의 반응 혼합물에 첨가하여 반응시키는 단계
2 2
제 1 항에 있어서, 단계 a) 와 b) 사이에 트립토판 할로게나아제를 발현하는 재조합 균주를 제거하는 단계 a-2) 를 추가로 포함하는, 할로겐화 인디고의 제조 방법
3 3
제 1 항에 있어서, 트립토판 할로게나아제가 트립토판 5-할로게나아제, 트립토판 6-할로게나아제 또는 트립토판 7-할로게나아제인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
4 4
제 3 항에 있어서, 트립토판 할로게나아제가 트립토판 6-할로게나아제인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
5 5
제 1 항에 있어서, 트립토판 할로게나아제가 플라빈 환원효소 또는 말토오스-결합 단백질과 접합된 것인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
6 6
제 5 항에 있어서,접합이 트립토판 할로게나아제의 N-말단에서 이루어지는 것인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
7 7
제 5 항에 있어서,접합이 링커를 통해 이루어지는 것인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
8 8
제 1 항에 있어서, 트립토판 할로게나아제가 스트렙토마이세스 톡시트리시나이 (Streptomyces toxytricini) 로부터 유래한 것인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
9 9
제 1 항에 있어서, 플라빈 함유 모노옥시게나아제가 메틸로파가 아미니설피디보란스 (Methylophaga aminisulfidivorans) 로부터 유래한 것인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
10 10
제 1 항에 있어서,재조합 균주가 대장균 (Escherichia coli) 인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
11 11
제 1 항에 있어서,재조합 균주가 내인성 (endogenous) 트립토파나아제 유전자가 결실된 균주인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
12 12
제 1 항에 있어서,할로겐화 인디고가 5,5'-이할로겐화 인디고, 6,6'-이할로겐화 인디고 또는 7,7'-이할로겐화 인디고인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
13 13
제 12 항에 있어서,할로겐화 인디고가 6,6'-이브로모인디고인, 할로겐화 인디고의 제조 방법
14 14
제 1 항에 있어서,단계 a) 및 단계 b) 의 반응이 각각 20 내지 40℃ 의 온도에서 1 내지 60 시간 동안 수행되는 것을 특징으로 하는, 할로겐화 인디고의 제조 방법
15 15
제 1 항에 있어서, 단계 b) 의 반응이 종료된 후 수득된 재조합 균주를 유효성분으로 포함하는, 직물 염색용 조성물
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제 15 항에 있어서,재조합 균주는 동결건조된 것인, 직물 염색용 조성물
17 17
제 15 항에 있어서,직물이 실크 또는 양모인, 직물 염색용 조성물
18 18
제 15 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항의 조성물에 직물을 침지하는 단계를 포함하는, 직물 염색 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.