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포유동물 정소로부터 생식선 줄기세포를 수득하는 방법

  • 기술번호 : KST2014038582
  • 담당센터 : 서울서부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-6124-6930
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 포유동물의 정소로부터 생식선 줄기세포를 수득하는 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 정소를 수득하여 복합효소처리함으로써 단일 세포군을 분리하고, 이를 다시 농도구배가 다른 퍼콜용액을 이용하여 세포를 회수한 뒤, 세포외기질물질 (extracellular matrix)을 처리한 배양접시에서 배양하여 부유세포를 회수함으로써, 고노사이트 (gonocyte)를 효율적으로 회수하고 순수도를 증진하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 의하여 생식선 줄기세포를 효율적으로 회수하여 순수도를 획기적으로 증진시킬 뿐만 아니라, 이를 이용하여 유용 가축의 생식선 줄기세포를 대량으로 확보하고 노화된 우수종모돈 등에서도 순수한 정원줄기세포를 생산할 수 있으며 또한 유용 유전자를 도입하거나 특정 유전자를 적중시킨 형질전환동물을 제작하는 데 널리 사용될 수 있다. 정소 생식선줄기세포, 효소 처리, 퍼콜 (Percoll) 용액, 세포외 기질물질 첨가, 고노사이트 (gonocyte), 순수도
Int. CL C12N 5/02 (2006.01) C12N 5/071 (2010.01) C12N 5/00 (2006.01)
CPC C12N 5/0683(2013.01) C12N 5/0683(2013.01) C12N 5/0683(2013.01) C12N 5/0683(2013.01)
출원번호/일자 1020080037808 (2008.04.23)
출원인 중앙대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1032335-0000 (2011.04.25)
공개번호/일자 10-2009-0112109 (2009.10.28) 문서열기
공고번호/일자 (20110506) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.04.23)
심사청구항수 8

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 대한민국 서울특별시 동작구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 류범용 대한민국 경기 평택시
2 김병각 대한민국 서울 관악구
3 이용안 대한민국 경기 안성시
4 김방진 대한민국 전남 고흥군

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김순웅 대한민국 서울시 구로구 디지털로**길 **, ***호 (구로동,에이스테크노타워*차)(정진국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 중앙대학교 산학협력단 대한민국 서울 동작구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2008.04.23 수리 (Accepted) 1-1-2008-0290793-24
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2008.04.24 수리 (Accepted) 1-1-2008-0293878-21
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2009.08.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2009.09.11 수리 (Accepted) 9-1-2009-0049872-34
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2010.07.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0304139-63
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2010.09.13 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2010-0591836-85
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2010.09.13 수리 (Accepted) 1-1-2010-0591838-76
8 등록결정서
Decision to grant
2011.01.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0047731-11
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.07.20 수리 (Accepted) 4-1-2011-5148879-89
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.07.20 수리 (Accepted) 4-1-2011-5148883-62
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.01.03 수리 (Accepted) 4-1-2014-0000494-54
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.10.20 수리 (Accepted) 4-1-2014-5123944-33
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2018.07.04 수리 (Accepted) 4-1-2018-5125629-51
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.07.29 수리 (Accepted) 4-1-2019-5151122-15
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.01 수리 (Accepted) 4-1-2019-5153932-16
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(a) 포유동물의 정소를 수득하는 단계; (b) 콜라게나제 (collagenase), 하이아루로니다제 (hyaluronidase), 트립신 (trypsin), Dnase I 또는 이의 혼합물을 상기 수득한 정소의 조직에 처리함으로써 정소조직 단일 세포군을 분리하는 단계; 및 (c) 불연속 농도 구배의 퍼콜 (Percoll) 용액에 상기 (b)단계에서 분리된 세포군을 주입하고 원심분리하여 퍼콜 경계면에서 세포를 회수하는 단계; 및 (d) 상기 (c)단계에서 회수된 세포를 라미닌 피복 배양접시에서 배양 후 부유세포를 회수하여 젤라틴 피복 배양접시에서 배양하고 부유세포를 회수하는 단계;를 포함하여 이루어지는 고노사이트 (gonocyte)의 수득방법
2 2
제 1 항에 있어서, 상기 포유동물은 돼지인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제 2 항에 있어서, 상기 돼지는 생후 3 내지 60일령의 신생돼지임을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1 항에 있어서, 상기 (c)단계의 퍼콜용액은 10% 내지 60% 농도의 퍼콜용액 중에서, 농도차이가 10% 이상이고 각각 농도가 다른 2가지 퍼콜용액의 2중층 퍼콜컬럼임을 특징으로 하는 방법
5 5
제 4 항에 있어서, 상기 2중층 퍼콜컬럼은 40% 퍼콜용액(100ml 당 퍼콜 원액 40ml, 10 x DPBS 10ml, 우태아혈청 1ml, 복합항생제 0
6 6
삭제
7 7
삭제
8 8
삭제
9 9
삭제
10 10
제 1항에 있어서, 상기 (d) 단계는 라미닌 피복 배양접시에서 10 내지 30분간 배양하고, 상기 젤라틴 피복 배양접시에서는 10 내지 14시간 배양함을 특징으로 하는 방법
11 11
다음의 단계를 포함하는 형질전환 포유동물의 생산방법 (a) 포유동물의 정소를 수득하고, 상기 정소조직에 효소처리하여 단일세포군으로 분리하고, 상기 단일세포군으로부터 농도구배가 다른 퍼콜용액을 이용하여 세포를 회수한 뒤, 라미닌 피복 배양접시에서 배양 후 부유세포를 회수하여 젤라틴 피복 배양접시에서 배양하고 부유세포를 회수함으로써 생식선줄기세포 중 고노사이트 (gonocyte)를 수득하는 단계; (b) 상기 수득된 고노사이트에 외래 유전자를 도입 또는 적중시키는 단계; (c) 상기 고노사이트를 수용체 동물의 정소에 이식하는 단계; 및 (d) 상기 수용체 동물의 자손을 얻어 형질전환 포유동물을 생산하는 단계
12 12
제 11 항에 있어서, 상기 포유동물은 돼지인 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 농촌진흥청 중앙대학교산학협력단 바이오그린21사업 돼지 정원줄기 세포를 이용한 형질전환 가축의생산효율 증진을 위한 신기술 개발