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인슐린신호경로를 조절하는 miRNA 및 그 표적의 작용을 제어하는 물질의 스크리닝 방법

  • 기술번호 : KST2015135421
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 인슐린신호경로를 조절하는 miRNA와 그 표적 유전자의 작용을 제어하는 물질을 스크리닝 하는 방법에 관한 것으로, 구체적으로, 세포 성장을 촉진하는 miR-8 또는 miR-200 miRNA의 표적 유전자인 USH 또는 FOG2의 작용을 제어하는 물질을 스크리닝 하는 방법에 관한 것이다. 본 발명자들은 초파리 지방체 세포에서 u-shaped(ush)를 표적함으로써 체구를 조절하는 보존된 miRNA인 miR-8을 발굴하였다. 또한, 초파리 miR-8 miRNA의 인간 상동 유전자인 miR-200의 표적 유전자가 FOG2임을 확인하였다. 초파리의 miR-8 및 USH가 포유동물에서도 보존되어 있으며, USH의 인간 상동 유전자인 FOG2가 PI3K의 조절 서브유니트와 직접 결합하여 기능함을 발견하였다. 인간 암세포주에서 miR-200의 발현을 억제하거나 FOG2를 발현시켰을 때 세포 성장을 촉진하는 PI3K 활성이 감소되는 것을 확인하였으므로, miR-200 및 FOG2를 인슐린신호경로 조절물질의 스크리닝에 유용하게 사용할 수 있다.microRNA, miR-200, FOG2, 인슐린신호, 세포 성장, oncogene, 초파리, 항암제
Int. CL G01N 33/68 (2006.01.01) G01N 33/15 (2006.01.01)
CPC G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/68(2013.01)
출원번호/일자 1020090118393 (2009.12.02)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1142889-0000 (2012.04.27)
공개번호/일자 10-2011-0061863 (2011.06.10) 문서열기
공고번호/일자 (20120510) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.12.02)
심사청구항수 27

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김빛내리 대한민국 서울특별시 강남구
2 이정현 대한민국 서울특별시 강남구
3 현서강 대한민국 서울특별시 동작구
4 김화 중국 서울특별시 관악구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 양부현 대한민국 서울특별시 송파구 오금로 **, 태원빌딩 **층, 특허팀(주식회사씨젠)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 서울특별시 관악구
번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.12.02 수리 (Accepted) 1-1-2009-0744364-67
2 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2009.12.03 수리 (Accepted) 1-1-2009-0746633-91
3 [대리인사임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Resignation of Agent] Report on Agent (Representative)
2011.03.25 수리 (Accepted) 1-1-2011-0221138-36
4 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2011.03.29 수리 (Accepted) 1-1-2011-0227496-06
5 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2011.04.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
6 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2011.05.16 수리 (Accepted) 9-1-2011-0040823-12
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2011.05.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0291890-63
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2011.08.01 수리 (Accepted) 1-1-2011-0593859-16
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2011.08.01 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0593832-84
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2011.09.27 수리 (Accepted) 4-1-2011-5195109-43
11 등록결정서
Decision to grant
2012.03.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0172887-57
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.01.14 수리 (Accepted) 4-1-2013-5007213-54
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.03.17 수리 (Accepted) 4-1-2015-5033829-92
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2015.05.13 수리 (Accepted) 4-1-2015-5062924-01
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.05.13 수리 (Accepted) 4-1-2019-5093546-10
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.05.23 수리 (Accepted) 4-1-2019-5101798-31
17 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.08.02 수리 (Accepted) 4-1-2019-5154561-59
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
1) miR-200 패밀리 miRNA 또는 miR-8 miRNA를 발현하는 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계;2) 처리한 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 또는 USH 단백질의 발현량 또는 활성을 측정하는 단계; 및,3) 대조군과 비교하여 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 또는 USH 단백질의 발현 또는 활성이 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
2 2
제 1항에 있어서, 상기 miR-200 패밀리 miRNA를 발현하는 세포주는 심장, 뇌, 고환, 간, 폐 및 골격근 조직으로부터 유래한 인간 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제 1항에 있어서, 상기 miR-8 miRNA를 발현하는 세포주는 지방체 조직으로부터 유래한 초파리 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제 1항에 있어서, 상기 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 FOG2 또는 USH 단백질의 발현량은 웨스턴 블롯, 면역염색법, 형광염색법 및 리포터 분석(reporter assay)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제 1항에 있어서, 상기 단계 2)의 FOG2 또는 USH 단백질의 활성은 ⅰ) p85/p110/IRS-1 복합체의 활성을 측정하는 단계;ⅱ) FOXO mRNA 또는 단백질의 발현량을 측정하는 방법; 및,ⅲ 세포 성장 및 증식을 측정하는 방법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제 6항에 있어서, 상기 p85/p110/IRS-1 복합체의 활성은 AKT 단백질의 인산화를 측정함으로써 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
1) FOG2 또는 USH를 발현하는 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계;2) 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 또는 USH 단백질의 발현량 또는 활성을 측정하는 단계; 및,3) 대조군과 비교하여 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 또는 USH 단백질의 발현 또는 활성이 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
9 9
제 8항에 있어서, 상기 FOG2를 발현하는 세포주는 심장, 뇌, 고환, 간, 폐 및 골격근 조직으로부터 유래한 인간 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제 8항에 있어서, 상기 USH를 발현하는 세포주는 지방체 조직으로부터 유래한 초파리 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제 8항에 있어서, 상기 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제 8항에 있어서, 상기 단계 2)의 FOG2 또는 USH 단백질의 발현량은 웨스턴 블롯, 면역염색법, 형광염색법 및 리포터 분석(reporter assay)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제 8항에 있어서, 상기 단계 2)의 FOG2 또는 USH 단백질의 활성은 ⅰ) p85/p110/IRS-1 복합체의 활성을 측정하는 단계;ⅱ) FOXO mRNA 또는 단백질의 발현량을 측정하는 방법; 및,ⅲ 세포 성장 및 증식을 측정하는 방법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제 13항에 있어서, 상기 p85/p110/IRS-1 복합체의 활성은 AKT 단백질의 인산화를 측정함으로써 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
1) 피검 화합물의 존재 하에 FOG2 단백질과 p85단백질을 접촉시키는 단계;2) 상기 에서 FOG2 단백질 및 p85단백질 사이의 결합 정도를 측정하는 단계; 및,3) 피검 화합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 상기 단계 2)의 시험관에서 FOG2 단백질 및 p85단백질 사이의 결합 정도가 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
16 16
1) 피검 화합물의 존재 하에 USH 단백질과 dp60 단백질을 접촉시키는 단계;2) 상기 에서 USH 단백질 및 dp60 단백질 사이의 결합 정도를 측정하는 단계; 및,3) 피검 화합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 상기 단계 2)의 시험관에서 USH 단백질 및 dp60(Drosophila p60) 단백질 사이의 결합 정도가 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
17 17
제 15항 또는 제 16항에 있어서, 상기 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
18 18
제 15항 또는 제 16항에 있어서, 상기 단계 3)의 단백질 사이의 결합은 SPR, 단백질 chip, 겔 쉬프트 분석(gel shift assay), 면역침전법, 공동-면역분석방법, 형광면역분석법 및 방사선면역분석법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
19 19
1) FOG2 단백질을 발현하는 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계;2) 처리한 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 단백질 및 p85단백질의 결합 정도를 측정하는 단계; 및,3) 피검화합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 상기 단계 1)의 세포에서 FOG2 단백질 및 p85단백질의 결합 정도가 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
20 20
제 19항에 있어서, 상기 FOG2를 발현하는 세포주는 심장, 뇌, 고환, 간, 폐 및 골격근 조직으로부터 유래한 인간 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
21 21
제 19항에 있어서, 상기 단계 2)의 FOG2 단백질 및 p85단백질의 결합여부는 SPR, 단백질 chip, 겔 쉬프트 분석(gel shift assay), 면역침전법, 공동-면역침전 분석(co-immunoprecipitation), 형광면역분석법 및 방사선면역분석법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
22 22
1) USH 단백질을 발현하는 세포주에 피검화합물을 처리하는 단계;2) 처리한 상기 단계 1)의 세포에서 USH 단백질 및 dp60 단백질의 결합 정도를 측정하는 단계; 및,3) 피검화합물을 처리하지 않은 대조군과 비교하여 상기 단계 1)의 세포에서 USH 단백질 및 dp60 단백질의 결합 정도가 변화된 피검화합물을 선별하는 단계를 포함하는 인슐린 신호전달 조절 물질의 스크리닝 방법
23 23
제 22항에 있어서, 상기 USH를 발현하는 세포주는 지방체 조직으로부터 유래한 초파리 세포주인 것을 특징으로 하는 방법
24 24
제 22항에 있어서, 상기 단계 2)의 USH 단백질 및 dp60 단백질의 결합여부는 SPR, 단백질 chip, 겔 쉬프트 분석(gel shift assay), 면역침전법, 공동-면역침전 분석(co-immunoprecipitation), 형광면역분석법 및 방사선면역분석법으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나의 방법으로 측정되는 것을 특징으로 하는 방법
25 25
제 19항 또는 제 22에 있어서, 상기 피검화합물은 천연화합물, 합성화합물, RNA, DNA, 폴리펩티드, 효소, 단백질, 리간드, 항체, 항원, 박테리아 또는 진균의 대사산물 및 생활성 분자로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
26 26
FOG2 단백질의 발현을 억제하는 물질로서 서열번호 42에 상보적인 서열을 가지는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 USH 단백질의 발현을 억제하는 물질로서 서열번호 15에 상보적인 서열을 가지는 안티센스 올리고뉴클레오타이드를 유효성분으로 함유하는 인슐린 신호 전달 조절용 조성물
27 27
제 26항에 있어서, 상기 안티센스 올리고뉴클레오타이드는 서열번호 2, 3, 4, 9, 87, 88 또는 119의 뉴클레오타이드 서열을 가지는 것을 특징으로 하는 인슐린 신호 전달 조절용 조성물
28 28
삭제
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 서울대학교 산학협력단 창의적연구지원사업 MicroRNA 조절 기전 및 기능연구