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분할-BioID 쌍 및 이를 이용한 막접촉점 단백질의 분석방법

  • 기술번호 : KST2022005503
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 바이오틴화 효소인 BioID의 제1절편(N-G78 또는 N-K283); 및 제2절편(G79-C 또는 E284-C)을 포함하는 분할-BioID 쌍 및 이를 이용한 막접촉점 단백질의 분석방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 상기 제1절편과 제2절편 중 하나는 제1막에서 발현되고, 나머지 하나는 제2막에서 발현되는 분할-BioID 쌍, 상기 제1절편 또는 제2절편을 암호화하는 핵산을 함유하는 벡터를 포함하는 막접촉점 단백질 분석용 조성물 및 상기 제1절편 및 제2절편을 제1막 및 제2막에서 각각 발현시켜, 막접촉점에서만 합체(complementation)하여 막접촉점 단백질을 바이오틴화(biotinylation)하는 단계를 포함하는 막접촉점 단백질의 분석방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 효소를 이용하면 살아있는 세포 내에서 미토콘드리아와 소포체 사이의 막접촉점에 존재하는 115개의 MAM(Mitochondrial-Associated Membrane) 단백질, 다양한 세포소기관 또는 세포막 간의 막접촉점에 존재하는 단백질을 규명함으로써, 단백질의 새로운 기능 및 단백질-단백질 상호작용을 분석할 수 있다. 또한, 당뇨병, 비만 및 신경퇴행성 질환과 같은 막접촉점과 관련된 질병을 가진 환자에서 칼슘이온통로와 지질분자의 수송에 관여하는 MAM 단백질의 구성성분을 모니터링함으로써, 질병마커단백질을 탐색하고 질병 발병 기전을 연구하는 데 매우 유용하게 사용될 수 있다.
Int. CL C12N 9/00 (2006.01.01) C12Q 1/25 (2006.01.01) C12N 15/85 (2006.01.01) G01N 33/68 (2006.01.01)
CPC C12N 9/93(2013.01) C12Q 1/25(2013.01) C12N 15/85(2013.01) C12Y 603/04015(2013.01) G01N 33/68(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 2440/32(2013.01)
출원번호/일자 1020200150064 (2020.11.11)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2022-0064018 (2022.05.18) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.11.11)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이현우 서울특별시 관악구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.11.11 수리 (Accepted) 1-1-2020-1206069-11
2 [출원서 등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment
2020.11.16 수리 (Accepted) 1-1-2020-1223605-38
3 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5265458-48
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2021.04.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2021.07.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2022-0083894-25
6 특허고객번호 정보변경(경정)신고서·정정신고서
2021.07.29 수리 (Accepted) 4-1-2021-5205564-29
7 특허고객번호 정보변경(경정)신고서·정정신고서
2022.04.04 수리 (Accepted) 4-1-2022-5079741-71
8 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2022.05.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2022-0365418-85
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번호 청구항
1 1
바이오틴화 효소인 BioID의 제1절편(N-G78 또는 N-K283); 및 제2절편(G79-C 또는 E284-C)을 포함하는 분할(split)-BioID 쌍
2 2
제1항에 있어서, 상기 제1절편과 제2절편 중 하나는 제1막에서 발현되고, 나머지 하나는 제2막에서 발현되는 것을 특징으로 하는 분할(split)-BioID 쌍
3 3
제2항에 있어서, 상기 제1막 및 제2막은 각각 미토콘드리아(mitochondria)의 외막, 소포체(endoplasmic reticulum, ER)의 막, 리소좀(lysosome)의 막, 소낭(vesicle)의 막 및 원형질막(plasma membrane)으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 분할(split)-BioID 쌍
4 4
제1절편(N-G78 또는 N-K283)을 암호화하는 핵산을 함유하는 제1벡터; 및 제2절편(G79-C 또는 E284-C)을 암호화하는 핵산을 함유하는 제2벡터를 포함하는 막접촉점 단백질 분석용 조성물
5 5
제4항에 있어서, 상기 제1절편을 암호화하는 핵산은 제1단백질을 암호화하는 핵산과 결합하고, 제2절편을 암호화하는 핵산은 제2단백질을 암호화하는 핵산과 결합하는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질 분석용 조성물
6 6
제5항에 있어서, 상기 제1단백질 및 제2단백질은 각각 미토콘드리아(mitochondria)의 TOM20, 소포체(endoplasmic reticulum, ER)의 SEC61B, 리소좀(lysosome)의 LAMP1, 소낭(vesicle)의 랩시리즈 단백질(rab series proteins) 및 원형질막(plasma membrane)의 G-단백질 결합 수용체(GPCR)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질 분석용 조성물
7 7
제1절편(N-G78 또는 N-K283)을 암호화하는 핵산 또는 그 핵산을 함유하는 제1벡터; 및 제2절편(G79-C 또는 E284-C)을 암호화하는 핵산 또는 그 핵산을 함유하는 제2벡터를 포함하는 형질감염(transfection) 세포
8 8
제6항에 있어서, 상기 형질감염(transfection)은 리포펙션(lipofection)에 의한 것임을 특징으로 하는 세포
9 9
(a) 제7항의 형질감염 세포를 배양하여 바이오틴화 효소인 BioID의 제1절편(N-G78 또는 N-K283) 및 제2절편(G79-C 또는 E284-C)을 제1막 및 제2막에서 각각 발현시키는 단계; 및 (b) 상기 BioID의 각 절편이 제1막 및 제2막의 막접촉점에서만 합체(complementation)하여 막접촉점 단백질을 바이오틴화(biotinylation)하는 단계를 포함하는 막접촉점 단백질의 분석방법
10 10
제9항에 있어서, 상기 제1막 및 제2막은 각각 미토콘드리아(mitochondria)의 외막, 소포체(endoplasmic reticulum, ER)의 막, 리소좀(lysosome)의 막, 소낭(vesicle)의 막 및 원형질막(plasma membrane)으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질의 분석방법
11 11
제9항에 있어서, 상기 (b) 단계의 BioID는 막접촉점 단백질의 리신(lysine)기를 바이오틴화(biotinylation)하는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질의 분석방법
12 12
제9항에 있어서, 상기 (b) 단계의 막접촉점은 BioID의 반경 20nm 내지 50nm에 존재하는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질의 분석방법
13 13
제9항에 있어서, 상기 (b) 단계의 막접촉점 단백질은 MAM(Mitochondrial-Associated Membrane) 단백질인 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질의 분석방법
14 14
제9항에 있어서, 상기 바이오틴화된 단백질을 트립신 효소로 펩타이드화한 후, 바이오틴화된 펩타이드만 질량분석하는 단계를 추가로 포함하는 막접촉점 단백질의 분석방법
15 15
제14항에 있어서, 상기 질량분석은 스트렙타비딘(Streptavidin) 비드를 이용하는 것을 특징으로 하는 막접촉점 단백질의 분석방법
16 16
서열번호 1로 표시되는 FKBP8 단백질을 포함하는 미토콘드리아 및 소포체 사이의 칼슘 이온 조절용 조성물
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 과학기술정보통신부 서울대학교 산학협력단 중견연구자지원사업 미토콘드리아 외막 RNA 결합 분자복합체에 의한 미토콘드리아 기능제어 경로연구