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핵산의 절단 및 중합연쇄반응 시스템 기반 등온 핵산증폭기술을 이용한 표적 RNA 검출 방법

  • 기술번호 : KST2019013002
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 절단효소 및 DNA 중합효소의 활성을 이용한 핵산의 절단 및 중합 연쇄 반응 시스템 기반 등온 핵산 증폭 기술 (NESBA)을 이용하여 시료에 포함된 표적 RNA를 고감도로 검출하는 검출 방법에 관한 것으로, 본 발명의 NESBA 기술은 기존 NASBA 기술에 비해 높은 증폭 효율을 구현한 신개념 등온 표적 RNA 검출 방법으로, 종래의 표적 RNA 검출 기술들을 대체할 수 있는 신개념 진단 기술로서 활용될 수 있을 것으로 판단된다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/683(2013.01) C12Q 1/683(2013.01) C12Q 1/683(2013.01) C12Q 1/683(2013.01) C12Q 1/683(2013.01)
출원번호/일자 1020170183675 (2017.12.29)
출원인 한국과학기술원, 재단법인 바이오나노헬스가드연구단
등록번호/일자 10-2014470-0000 (2019.08.20)
공개번호/일자 10-2019-0081271 (2019.07.09) 문서열기
공고번호/일자 (20190826) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.12.29)
심사청구항수 5

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
2 재단법인 바이오나노헬스가드연구단 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박현규 대전광역시 유성구
2 김효용 대전광역시 유성구
3 주용 대전광역시 유성구
4 안준기 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
2 재단법인 바이오나노헬스가드연구단 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2017.12.29 수리 (Accepted) 1-1-2017-1309891-70
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2018.04.04 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2018.05.31 수리 (Accepted) 9-1-2018-0024505-85
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2019.01.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0047787-43
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2019.03.18 수리 (Accepted) 1-1-2019-0274858-19
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2019.03.18 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2019-0274859-54
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
8 등록결정서
Decision to grant		 2019.07.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2019-0509307-66
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 핵산의 절단 및 중합 연쇄 반응 시스템을 기반으로 한 표적 RNA 검출 방법:(a) 표적 RNA와 상보적인 서열, T7 프로모터 서열 및 DNA 절단효소 인식부위 염기서열을 포함하는 제1 프라이머와 표적 RNA를 혼성화시킨 후, 역전사 효소를 이용하여 표적 RNA의 상보적 DNA를 생성시키는 단계;(b) 상기 (a)단계에서 생성된 상보적 DNA와 결합되어 있는 표적 RNA를 RNA 분해효소에 의해 분해시키는 단계;(c) 상기 상보적 DNA와 상보적인 서열 및 절단효소 인식 염기서열을 포함하는 제2 프라이머와 상기 상보적 DNA를 혼성화시킨 후, 역전사 효소를 이용하여 T7 프로모터 및 절단효소 인식 염기서열이 포함된 이중가닥 DNA를 생성시키는 단계;(d) 상기 (c)에서 생성된 이중가닥 DNA에 DNA 절단효소를 처리하여 상기 이중가닥 DNA의 DNA 절단효소 인식부위를 절단한 다음, DNA 중합효소를 이용하여 T7 프로모터를 포함하는 이중가닥 DNA를 증폭시키는 단계; 및(e) T7 RNA 중합효소를 이용하여 상기 (d) 단계에서 증폭된 T7 프로모터를 포함하는 이중가닥 DNA로부터 anti-sense RNA를 생성시킨 다음, 상기 생성된 anti-sense RNA를 검출하는 단계;여기서, (d) 단계의 DNA 절단효소 처리에 의하여 생성되는 절단효소 인식 부위를 포함하는 DNA 가닥은 새로운 DNA 합성을 위한 프라이머로 사용되고, 상기 절단효소 인식 부위를 포함하는 DNA 가닥으로 구성된 프라이머에 의해 새로운 DNA가 합성되는 경우, 주형과 결합되어 있던 절단효소 인식 부위의 3' 영역에 있는 기존의 DNA 가닥이 떨어져나와 반응에 참여하지 않은 프라이머가 결합 가능한 주형으로 사용되는 것을 특징으로 하는 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 (a)~(e)는 등온에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제2항에 있어서, 상기 등온은 40~42℃에서 수행되는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 RNA 분해효소는 DNA/RNA 중합체에서 RNA만을 선택적으로 분해하는 효소인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 DNA 중합효소는 주형과 결합된 DNA를 밀어내는 활성을 가지는 효소인 것을 특징으로 하는 방법
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1 WO2019132626 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 WO2019132626 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 서울대학교 산학협력단 원천기술개발사업 (EZBARO)신개념 현장응답형 실시간 유전자 분석기술 개발(2016)
2 미래창조과학부 한국과학기술원 이공분야기초연구사업 (EZBARO)DNA에 대한 금속이온 결합특성 규명과 이를 이용한 생체물질 검출을 위한 원천 핵심기술 개발(2017)