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과산화효소 활성을 가지는 핵산효소를 이용한 핵산의 검출방법
- 기술번호 : KST2014046833
- 담당센터 : 대전기술혁신센터
- 전화번호 : 042-610-2279
| 요약 | 본 발명은 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소를 이용한 핵산의 검출방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 핵산효소의 과산화효소 활성에 의한 효소적 침전 반응을 이용하여 목적핵산을 전기화학적 임피던스 분광법으로 측정하는 핵산의 검출 방법 및 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출용 조성물에 관한 것이다.본 발명에 따른 핵산의 검출방법은 효소적 촉매 반응의 ''진행''이 아니라 ''생성된 결과물''을 측정함으로써, 효소적 촉매 반응이 진행 중이거나 종료된 후에도 목적핵산의 측정이 가능하며, 전기화학적 임피던스 분광법을 이용함으로써, 수치적 결과값을 확인할 수 있고, 장치의 소형화가 용이하며, 목적핵산의 유무를 별도의 세척과정 없이 단일 단계만으로 매우 간단하게 전기적인 방법으로 측정할 수 있다. |
|---|---|
| Int. CL | C12Q 1/28 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 27/02 (2006.01) |
| CPC | C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) C12Q 1/6816(2013.01) |
| 출원번호/일자 | 1020100074717 (2010.08.02) |
| 출원인 | 한국과학기술원 |
| 등록번호/일자 | 10-1188433-0000 (2012.09.27) |
| 공개번호/일자 | 10-2012-0021470 (2012.03.09) 문서열기 |
| 공고번호/일자 | (20121008) 문서열기 |
| 국제출원번호/일자 | |
| 국제공개번호/일자 | |
| 우선권정보 | |
| 법적상태 | 소멸 |
| 심사진행상태 | 수리 |
| 심판사항 | |
| 구분 | 신규 |
| 원출원번호/일자 | |
| 관련 출원번호 | |
| 심사청구여부/일자 | Y (2010.08.02) |
| 심사청구항수 | 33 |
출원인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
발명자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 박현규 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 2 | 원병연 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 3 | 정철희 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 4 | 신수정 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
대리인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이처영 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소) |
최종권리자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대전광역시 유성구 |
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2010.08.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0499182-97 |
| 2 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2012.02.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0120279-55 |
| 3 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2012.04.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0335768-10 |
| 4 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2012.04.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0335767-64 |
| 5 | 등록결정서 Decision to grant |
2012.09.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0563365-07 |
| 6 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
| 7 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
| 8 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
| 9 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
| 10 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 11 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 |
1 다음 단계를 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출방법:(a) 헤민과 3차구조를 형성하여 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소의 염기서열에 상보적인 염기서열과 목적핵산에 상보적인 염기서열을 포함하는 전방향 프라이머 및 목적핵산의 염기서열을 포함하는 역방향 프라이머를 이용하여 상기 핵산효소가 연결된 목적핵산을 증폭시키는 단계;(b) 상기 증폭 산물과 5'' 엑소뉴클레이즈 활성을 갖는 효소, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 혼합하여 진단전극에 적용하는 단계; 및(c) 전극 위에 형성된 4-CN의 불용성 침전물에 의한 임피던스의 변화를 측정하여, 목적핵산을 검출하는 단계 |
| 2 |
2 제1항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 3 |
3 제1항에 있어서, 증폭은 PCR에 의하여 수행되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 4 |
4 제1항에 있어서, 5'' 엑소뉴클레이즈 활성을 갖는 효소는 5'' 람다절단효소(5'' λ-exonuclase)인 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 5 |
5 제1항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 6 |
6 제1항에 있어서, 4-CN 불용성 침전물에 의하여 임피던스가 증가하는 경우, 목적핵산이 존재하는 것으로 판독하는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 7 |
7 제1항에 있어서, 진단전극은 금, 유리탄소, 흑연, 백금 및 인듐틴옥사이드로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 8 |
8 다음 단계를 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출방법:(a) 양 말단에 목적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하고 헤민과 3차구조를 형성하여 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소의 염기서열을 중간에 포함하는 프로브, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 목적핵산 검출용 시료와 혼합하여 진단전극에 적용하는 단계; 및(b) 전극 위에 형성된 4-CN의 불용성 침전물에 의한 임피던스의 변화를 측정하여, 목적핵산을 검출하는 단계 |
| 9 |
9 제8항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 10 |
10 제8항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 11 |
11 제8항에 있어서, 4-CN 불용성 침전물에 의하여 임피던스가 증가하는 경우, 목적핵산이 존재하지 않는 것으로 판독하는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 12 |
12 제8항에 있어서, 진단전극은 금, 유리탄소, 흑연, 백금 및 인듐틴옥사이드로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 13 |
13 다음 단계를 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출방법:(a) 한쪽 말단에 헤민과 3차구조를 형성하여 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소의 염기서열을 포함하고 다른 말단에 상기 핵산효소 염기서열과 상보적인 염기서열을 포함하며 중간에 목적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하는 프로브, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 목적핵산 검출용 시료와 혼합하여 진단전극에 적용하는 단계; 및(b) 전극 위에 형성된 4-CN의 불용성 침전물에 의한 임피던스의 변화를 측정하여, 목적핵산을 검출하는 단계 |
| 14 |
14 제13항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 15 |
15 제13항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 16 |
16 제13항에 있어서, 4-CN 불용성 침전물에 의하여 임피던스가 증가하는 경우, 목적핵산이 존재하는 것으로 판독하는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 17 |
17 제13항에 있어서, 진단전극은 금, 유리탄소, 흑연, 백금 및 인듐틴옥사이드로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 18 |
18 다음 단계를 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출방법:(a) 5'' 말단에 목적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하고 3'' 말단에 헤민과 3차구조를 형성하여 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소의 염기서열을 포함하는 프로브, 3'' 말단에 목적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하고 5'' 말단에 핵산효소 염기서열을 포함하는 프로브, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 목적핵산 검출용 시료와 혼합하여 진단전극에 적용하는 단계; 및(b) 전극 위에 형성된 4-CN의 불용성 침전물에 의한 임피던스의 변화를 측정하여, 목적핵산을 검출하는 단계 |
| 19 |
19 제18항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 20 |
20 제18항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 21 |
21 제18항에 있어서, 4-CN 불용성 침전물에 의하여 임피던스가 증가하는 경우, 목적핵산이 존재하는 것으로 판독하는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 22 |
22 제18항에 있어서, 진단전극은 금, 유리탄소, 흑연, 백금 및 인듐틴옥사이드로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 목적핵산의 전기화학적 검출방법 |
| 23 |
23 5'' 엑소뉴클레이즈 활성을 갖는 효소, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출용 조성물 |
| 24 |
24 제23항에 있어서, 5'' 엑소뉴클레이즈 활성을 갖는 효소는 5'' 람다절단효소(5'' λ-exonuclase)인 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 25 |
25 제23항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올, 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 26 |
26 헤민과 3차구조를 형성하여 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소의 염기서열을 포함하는 프로브, 4-클로로나프톨, 과산화수소, 헤민 및 전자전달물질을 포함하는 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출용 조성물 |
| 27 |
27 제26항에 있어서, 전자전달물질은 페로센메탄올을 비롯한 페로센 유도체, 페리시아나이드, 메틸렌블루, 오스뮴 유도체 및 루테늄 유도체로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 28 |
28 제26항에 있어서, 핵산효소의 염기서열을 포함하는 프로브는 양 말단에 목적핵산에 상보적인 염기서열을 포함하고 핵산효소 염기서열을 중간에 포함하는 프로브인 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 29 |
29 제26항 또는 제28항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 30 |
30 제26항에 있어서, 핵산효소의 염기서열을 포함하는 프로브는 한쪽 말단에 핵산효소 염기서열을 포함하고 다른 말단에 상기 핵산효소 염기서열과 상보적인 염기서열을 포함하며 중간에 목적핵산과 상보적인 염기서열을 포함하는 프로브인 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 31 |
31 제26항 또는 제30항에 있어서, 상기 핵산효소의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 32 |
32 제26항에 있어서, 핵산효소의 염기서열을 포함하는 프로브는 5'' 말단에 목적핵산에 상보적인 염기서열을 포함하고 3'' 말단에 핵산효소 염기서열을 포함하는 프로브 및 3'' 말단에 목적핵산에 상보적인 염기서열을 포함하고 5'' 말단에 핵산효소 염기서열을 포함하는 프로브인 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 33 |
33 제26항 또는 제32항에 있어서, 상기 핵산효소 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 2, 서열번호 3, 서열번호 4 및 서열번호 5로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 조성물 |
| 지정국 정보가 없습니다 |
|---|
| 패밀리정보가 없습니다 |
|---|
| 국가 R&D 정보가 없습니다. |
|---|
- 본 등록정보는 참고용으로 법적증빙자료로 사용할 수 없습니다.
- 데이터 이관에 따른 소요기간(1일)으로 인하여 등록원부와 일부 차이가 발생할 수 있으며, 일부 정보(부기, 상세 주소 등)를 제공하지 않고 있습니다.
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| 특허 등록번호 | 10-1188433-0000 |
|---|
권리란
| 표시번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
출원 연월일 : 20100802 출원 번호 : 1020100074717 공고 연월일 : 20121008 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20120924 청구범위의 항수 : 33 유별 : C12Q 1/68 발명의 명칭 : 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소를 이용한 핵산의 검출방법 존속기간(예정)만료일 : 20180928 |
특허권자란
| 순위번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
(권리자) 한국과학기술원 대전광역시 유성구... |
등록료란
| 제 1 - 3 년분 | 금 액 | 666,000 원 | 2012년 09월 28일 | 납입 |
| 제 4 년분 | 금 액 | 536,200 원 | 2015년 08월 26일 | 납입 |
| 제 5 년분 | 금 액 | 600,540 원 | 2017년 01월 16일 | 납입 |
| 제 6 년분 | 금 액 | 536,200 원 | 2017년 08월 25일 | 납입 |
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| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 | 2010.08.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0499182-97 |
| 2 | 의견제출통지서 | 2012.02.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0120279-55 |
| 3 | [명세서등 보정]보정서 | 2012.04.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2012-0335768-10 |
| 4 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2012.04.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2012-0335767-64 |
| 5 | 등록결정서 | 2012.09.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2012-0563365-07 |
| 6 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
| 7 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
| 8 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
| 9 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
| 10 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 11 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 기술번호 | KST2014046833 |
|---|---|
| 자료제공기관 | NTB |
| 기술공급기관 | 한국과학기술원 |
| 기술명 | 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소를 이용한 핵산의 검출방법 |
| 기술개요 |
본 발명은 과산화효소 활성을 가지는 핵산효소를 이용한 핵산의 검출방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로, 핵산효소의 과산화효소 활성에 의한 효소적 침전 반응을 이용하여 목적핵산을 전기화학적 임피던스 분광법으로 측정하는 핵산의 검출 방법 및 핵산효소를 이용한 목적핵산의 전기화학적 검출용 조성물에 관한 것이다.본 발명에 따른 핵산의 검출방법은 효소적 촉매 반응의 ''진행''이 아니라 ''생성된 결과물''을 측정함으로써, 효소적 촉매 반응이 진행 중이거나 종료된 후에도 목적핵산의 측정이 가능하며, 전기화학적 임피던스 분광법을 이용함으로써, 수치적 결과값을 확인할 수 있고, 장치의 소형화가 용이하며, 목적핵산의 유무를 별도의 세척과정 없이 단일 단계만으로 매우 간단하게 전기적인 방법으로 측정할 수 있다. |
| 개발상태 | 기술개발완료 |
| 기술의 우수성 | |
| 응용분야 | 촉매 기술 |
| 시장규모 및 동향 | |
| 희망거래유형 | 기술매매,라이센스, |
| 사업화적용실적 | |
| 도입시고려사항 |
| 과제고유번호 | 1345123080 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2009-0080602 |
| 연구과제명 | 초고감도 생체물질 진단을 위한 등온/정량 핵산증폭 원천 핵심기술의 개발 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국연구재단 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술원 |
| 성과제출연도 | 2010 |
| 연구기간 | 200905~201402 |
| 기여율 | 1 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
특허성과
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