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유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법

  • 기술번호 : KST2019024272
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 정확하고 신속하게 유전자를 판별하기 위한 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법에 관한 것이다. 상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 구성은 a) 분석 대상의 유전자를 추출하는 단계; b) 상기 유전자가 포함된 시료를 유전자 판별칩에 주입하는 단계; c) 상기 시료에 포함된 상기 유전자를 서열번호 1 내지 서열번호 26의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 프라이머 쌍을 이용하는 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)에 의해 증폭하는 단계; d) 상기 증폭된 유전자와 신호물질을 혼합하여 혼합물질을 형성하는 단계; e) 상기 혼합물질의 전류량을 측정하는 단계; 및 f) 측정된 상기 전류량을 분석하여 상기 유전자를 판별하는 단계를 포함하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법을 제공한다.
Int. CL C12Q 1/68 (2018.01.01)
CPC C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01) C12Q 1/689(2013.01)
출원번호/일자 1020170094712 (2017.07.26)
출원인 한국과학기술원, 포항공과대학교 산학협력단
등록번호/일자 10-1911020-0000 (2018.10.17)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20181231) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2017.07.26)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
2 포항공과대학교 산학협력단 대한민국 경상북도 포항시 남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이태재 대한민국 충청북도 청주시 서원구
2 신수정 대한민국 세종특별자치
3 임선영 대한민국 대전광역시 유성구
4 이문근 대한민국 대전광역시 서구
5 이경균 대한민국 대전광역시 유성구
6 배남호 대한민국 대전광역시 유성구
7 이석재 대한민국 대전광역시 유성구
8 정규열 대한민국 경북 포항시 남구
9 나정경 대한민국 전남 목포시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 한상수 대한민국 서울시 서초구 효령로**길 ** *층 (브릿지웰빌딩)(에이치앤피국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
2 포항공과대학교 산학협력단 경상북도 포항시 남구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2017.07.26 수리 (Accepted) 1-1-2017-0719993-55
2 직권정정안내서
Notification of Ex officio Correction
2017.08.07 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2017-0109267-23
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2017.12.12 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2018.02.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2018-0024206-00
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2018.02.12 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0106412-21
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2018.04.12 수리 (Accepted) 1-1-2018-0364197-36
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2018.05.14 수리 (Accepted) 1-1-2018-0473894-75
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2018.05.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-0473893-29
9 등록결정서
Decision to grant
2018.09.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0659312-89
10 [명세서등 보정]보정서(심사관 직권보정)
2018.12.19 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2018-5024074-83
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.20 수리 (Accepted) 4-1-2019-5243581-27
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.22 수리 (Accepted) 4-1-2019-5245997-53
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2019-5247115-68
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
a) 분석 대상의 유전자를 추출하는 단계;b) 상기 유전자가 포함된 시료를 유전자 판별칩에 주입하는 단계;c) 상기 시료에 포함된 상기 유전자가 증폭유로를 통과하되, 상기 증폭유로 양측에 형성된 열확산차단홈에 의하여 상기 증폭유로에 공급되는 열이 예정되지 않은 부위로 전달되는 것을 방지하여 과도한 열전달로 인한 시료 변질을 방지함과 동시에, 공급된 열이 주위로 분산되지 않도록 하여 중합효소 연쇄반응(polymerase chain reaction, PCR)의 속도와 효율을 향상시키면서 증폭되는 단계;d) 상기 증폭된 유전자와 신호물질은 제1 내지 제4 믹서채널필름을 통과하되, 상기 제3 및 제4 믹서채널필름 사이에 부착되며 서로 다른 모양의 홀 형태로 형성되어 와류를 유도하는 복수의 믹싱홀이 형성된 믹싱홀필름을 통과하면서 혼합되어 혼합 효율을 향상시키도록 혼합물질이 형성되는 단계;d-1) 상기 혼합물질은 필터부착필름 및 소수성 소재의 에어필터를 통과하도록 마련되어, 상기 필터부착필름에 의하여 상기 혼합물질에 포함된 기포를 제거하여 유전자 판별 효율을 높이고, 상기 에어필터에 의하여 상기 혼합물질을 이송하는 공기를 외부로 배출시킴으로써 공기압을 정밀하게 제어하지 않더라도 미리 예정된 양의 상기 혼합물질을 자동적으로 판별부로 이동시키는 단계;e) 상기 혼합물질의 전류량을 측정하는 단계; 및f) 측정된 상기 전류량을 분석하여 상기 증폭된 유전자를 판별하는 단계를 포함하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법으로서,상기 중합효소 연쇄반응은 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 5의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 6의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이버 쌍, 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 8의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 9의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 10의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 11의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 12의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 13의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 14의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 15의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 16의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 17의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 18의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 19의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 20의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 21의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 24의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 및 서열번호 25의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 26의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 프라이머 쌍을 이용하여, 대장균(Escherichia coli O157:H7), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella enteritidis), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes), 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 중 어느 하나의 식중독균을 검출하도록 이루어지는 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
2 2
제 1 항에 있어서,상기 d) 단계에서,상기 혼합물질에 포함된 상기 증폭된 유전자와 상기 신호물질은 상호 결합되는 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
3 3
제 1 항에 있어서,상기 e) 단계는,e1) 작업전극에 인가전압을 인가하는 단계;e2) 상대전극이 상기 혼합물질에 포함된 신호물질의 산화환원반응을 통해 도출되는 전자를 상기 작업전극과 교환하는 단계; 및e3) 상기 작업전극이 상기 상대전극과 교환하는 전자량을 통해 상기 전류량을 연속적으로 측정하는 단계를 포함하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
4 4
제 3 항에 있어서,상기 e1) 단계에서,상기 인가전압은, 상기 혼합물질에 포함된 각각의 신호물질에 따라 산화환원반응을 일으키기 위한 고유한 전압 값인 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
5 5
제 4 항에 있어서,상기 e3) 단계 이후에,e4) 상기 인가전압과 기준전극의 기준전압을 합한 값인 표시전압을 보여주는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
6 6
제 1 항에 있어서,상기 f) 단계에서,상기 전류량이 기설정된 기준치보다 높을 경우, 상기 증폭된 유전자가 기준량보다 적은 것으로 판단하고, 상기 전류량이 기설정된 기준치보다 낮을 경우, 상기 증폭된 유전자가 기준량보다 많은 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩 및 프라이머를 이용한 식중독균 검출 방법
7 7
식중독균을 검출하기 위하여 사용되는 유전자 판별칩에 있어서,외형을 형성하며, 시료주입구 및 배출구를 갖는 프레임부;상기 프레임부의 내부에 마련되어 몸체를 형성하며, 주입된 시료가 이동 가능하도록 마련되고, 복수의 유로가 형성된 바디채널필름의 상부에 부착되는 바디상부커버필름을 포함하는 바디부;상기 바디부의 상부 일측에 결합되며, 상기 시료에 대한 중합효소 연쇄반응(PCR)이 수행되는 증폭부;상기 바디부의 타측에 마련되며, 상기 증폭부에 의해 증폭된 상기 시료와 신호물질을 혼합하여 혼합물질을 형성하며, 상기 혼합물질에 포함된 기포를 제거하여 유전자 판별 효율을 높이도록 마련된 필터부착필름 및 혼합물질을 이송하는 공기를 외부로 배출시킴으로써 공기압을 정밀하게 제어하지 않더라도 미리 예정된 양의 상기 혼합물질을 자동적으로 이동시키도록 마련된 에어필터를 갖는 믹서부; 및상기 바디부의 하부 타측에 결합되며, 상기 믹서부를 통과한 상기 혼합물질의 전류량을 측정하여 상기 혼합물질에 포함된 유전자를 판별하는 판별부를 포함하며,상기 바디상부커버필름에는, 상기 증폭부와 결합되는 위치에 마련되며 시료가 통과할 수 있도록 유로를 형성하는 증폭유로 및 상기 증폭유로의 양측에 형성되는 열확산차단홈이 마련되고, 상기 열확산차단홈은 상기 증폭부에 공급되는 열이 예정되지 않은 부위로 전달되는 것을 방지하여 과도한 열전달로 인한 시료 변질을 방지함과 동시에, 공급된 열이 주위로 분산되지 않도록 함으로써, 중합효소 연쇄반응의 속도와 효율을 향상시키도록 마련되며,상기 믹서부는, 제1 내지 제4 믹서채널필름을 통과하되, 상기 제3 및 제4 믹서채널필름 사이에 부착되며 서로 다른 모양의 홀 형태로 형성되어 와류를 유도하는 복수의 믹싱홀이 형성된 믹싱홀필름을 갖는 것을 특징으로 하며,상기 중합효소 연쇄반응은 서열번호 1의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 2의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 3의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 4의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 5의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 6의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이버 쌍, 서열번호 7의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 8의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 9의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 10의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 11의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 12의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 13의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 14의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 15의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 16의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 17의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 18의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 19의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 20의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 21의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 22의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 서열번호 23의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 24의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍, 및 서열번호 25의 염기서열을 포함하는 프라이머 및 서열번호 26의 염기서열을 포함하는 프라이머로 이루어진 프라이머 쌍으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 프라이머 쌍을 이용하여, 대장균(Escherichia coli O157:H7), 황색포도상구균(Staphylococcus aureus), 살모넬라 엔테리티디스(Salmonella enteritidis), 리스테리아 모노사이토게네스(Listeria monocytogenes), 예르시니아 엔테로콜리티카(Yersinia enterocolitica) 및 바실러스 세레우스(Bacillus cereus) 중 어느 하나의 식중독균을 검출하도록 이루어지는 것을 특징으로 하는 유전자 판별칩
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순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 서울대학교 공공복지안전기술개발사업 대량생산이 가능한 식중독유해균 현장진단용 통합형 디바이스 및 통합모듈 시스템 개발
2 미래창조과학부 계명대학교 선도연구센터사업(기초의과학분야(MRC)) 나노바이오칩 요소기술 개발 및 제작
3 미래창조과학부 포항공과대학교 생체 시스템의 모듈화 설계를 통한 바이오 화합물 고생산능 균주 및 미생물 생체 시스템의 모듈화 설계를 통한 바이오 화합물 고생산능 균주 및 미생물