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다음을 포함하는 단일분자 형광 상보 융합 단백질:형광단백질의 C 말단 단편-링커-형광단백질의 N 말단 단편
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제1항에 있어서, 상기 형광단백질은 녹색 형광단백질(Green Fluorescence Protein, GFP), 수퍼폴더 녹색 형광단백질(superfolder GFP, sfGFP), Venus 형광단백질, mCherry 형광단백질 또는 이들의 조합인, 융합 단백질
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제1항에 있어서, 상기 링커는 2 내지 5개의 아미노산 잔기로 이루어진 펩타이드 링커인, 융합단백질
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제1항에 있어서, 상기 펩타이드 링커는 SK, GGS, 또는 SKGGS의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 융합 단백질
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제1항에 있어서, 상기 형광단백질의 C 말단 단편은 형광단백질의 8-11 스트랜드이고, 상기 형광단백질의 N-말단 단편은 형광단백질의 1-7 스트랜드인, 융합 단백질
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제1항에 있어서, 상기 형광단백질의 C 말단 단편은 i) 형광단백질이 mCherry인 경우 mCherry 전장 아미노산 서열의 159-236 번째 아미노산 서열을 포함하고, ii) 형광단백질이 Venus인 경우 Venus 전장 아미노산 서열의 155-231 번째 아미노산 서열을 포함하고, iii) 형광단백질이 sfGFP인 경우 sfGFP 전장 아미노산 서열의 154-230 번째 아미노산 서열을 포함하는 것인, 융합 단백질
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제1항에 있어서, 상기 형광단백질의 N 말단 단편은 i) 형광단백질이 mCherry인 경우 mCherry 전장 아미노산 서열의 1-158 번째 아미노산 서열을 포함하고, ii) 형광단백질이 Venus인 경우 Venus 전장 아미노산 서열의 4-154 번째 아미노산 서열을 포함하고, iii) 형광단백질이 sfGFP인 경우 sfGFP 전장 아미노산 서열의 3-153 번째 아미노산 서열을 포함하는 것인, 융합 단백질
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8
제1항에 있어서, 상기 형광단백질은 야생형(wild type)의 형광단백질의 아미노산 서열 중 1개 이상의 표면 아미노산 잔기가 음전하성 아미노산 잔기로 치환된 것인, 융합 단백질
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제1항에 있어서, 상기 음전하성 아미노산은 글루탐산(glutamate) 또는 아스파르트산(aspartate)인, 융합 단백질
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10
다음을 포함하는 융합 단백질:수용체-링커-제1항의 단일분자 형광 상보 융합 단백질
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11
제10항에 있어서, 상기 단일분자 형광 상보 융합 단백질의 형광단백질과 상이한 종류의 형광단백질을 추가적으로 포함하는, 융합 단백질
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12
제10항에 있어서, 상기 단일분자 형광상보 융합 단백질은 수퍼폴더 녹색 형광단백질인, 융합 단백질
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13
제11항에 있어서, 상기 추가적으로 포함되는 형광단백질은 mCherry 형광단백질인, 융합 단백질
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제10항에 있어서, 상기 수용체는 막관통 수용체, 티로신 인산화 효소 수용체, 또는 세포질 내 수용체인, 융합 단백질
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제14항에 있어서, 상기 막관통 수용체는 GPCR(G protein coupled receptor)군에 속하는 수용체, 또는 PDGFR(Platelet-derived growth factor receptor)인, 융합 단백질
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16
제14항에 있어서, 상기 티로신 인산화 효소 수용체는 EGFR(Epidermal growth factor receptor), VEGFR(vascular endothelial growth factor receptor), Eph 수용체(erythropoietin-producing human hepatocellular receptor) 및 RET 수용체(rearranged during transfection receptor)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인, 융합 단백질
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17
제14항에 있어서, 상기 세포질 내 수용체는 단일올리고머화(homo-oligomerization)하는 세포질 내 수용체인, 융합 단백질
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18
제1항 내지 제17항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 인코딩하는 핵산 분자
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제18항의 핵산 분자를 포함하는 재조합 벡터
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제19항의 재조합 벡터로 형질전환된 숙주 세포
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제1항 내지 제17항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 포함하는 수용체 올리고머화 스크리닝용 조성물
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다음 단계를 포함하는 수용체의 올리고머화를 확인하는 방법:(a) 제10항 내지 제17항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 발현하는 숙주 세포를 배양하는 단계; 및 (b) 상기 숙주 세포에서 형광 신호를 정량적으로 검출함으로써 수용체의 올리고머화를 확인하는 단계
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다음 단계를 포함하는 수용체의 아고니스트, 또는 안타고니스트 물질을 스크리닝하는 방법:(a) 제10항 내지 제17항 중 어느 한 항의 융합 단백질을 발현하는 숙주 세포를 배양하는 단계; (b) 상기 숙주 세포에 후보 물질을 접촉시키는 단계; 및 (c) 상기 숙주 세포에서 형광 신호를 정량적으로 검출함으로써 수용체의 올리고머화를 확인하는 단계:상기 형광 신호가 증가된 경우 상기 후보 물질을 수용체 아고니스트로 판정하고, 상기 형광 신호가 감소된 경우 수용체 안타고니스트로 판정한다
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제22항 또는 제23항에 있어서, 상기 (a) 단계의 융합 단백질이 2종 이상의 형광단백질을 발현하는 경우, 상기 (c) 단계는 2종 이상의 형광 신호의 비(ratio)를 정량적으로 검출하는 것인, 방법
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