요약 | 본 발명은 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 분석용 키트 및 분석방법에 관한 것으로서, 더 상세하게는 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 분석용 키트 및 분석방법을 제공한다. |
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Int. CL | C07K 19/00 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) |
CPC | G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) |
출원번호/일자 | 1020110100334 (2011.09.30) |
출원인 | 한국과학기술원 |
등록번호/일자 | 10-1354601-0000 (2014.01.16) |
공개번호/일자 | 10-2013-0035792 (2013.04.09) 문서열기 |
공고번호/일자 | (20140124) 문서열기 |
국제출원번호/일자 | |
국제공개번호/일자 | |
우선권정보 | |
법적상태 | 소멸 |
심사진행상태 | 수리 |
심판사항 | |
구분 | 신규 |
원출원번호/일자 | |
관련 출원번호 | |
심사청구여부/일자 | Y (2011.09.30) |
심사청구항수 | 38 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 허원도 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
2 | 이상규 | 대한민국 | 서울특별시 중랑구 |
3 | 박혜림 | 대한민국 | 경상남도 김해시 |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 김남식 | 대한민국 | 서울특별시 서초구 남부순환로***길 *-*, *층 (양재동, 가람빌딩)(율민국제특허법률사무소) |
2 | 한윤호 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **(삼성동) 명지빌딩, *층(선정국제특허법률사무소) |
3 | 양기혁 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로**길 **(삼성동) 명지빌딩, *층(선정국제특허법률사무소) |
4 | 이인행 | 대한민국 | 서울특별시 서초구 남부순환로***길 *-*, *층 (양재동, 가람빌딩)(율민국제특허법률사무소) |
번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
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1 | 한국과학기술원 | 대전광역시 유성구 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
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1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2011.09.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0769134-51 |
2 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2012.05.17 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
4 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2013.02.28 | 수리 (Accepted) | 9-1-2013-0011476-61 |
5 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2013.05.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2013-0357927-69 |
6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2013.07.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-0667104-02 |
7 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2013.08.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2013-0772650-49 |
8 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2013.08.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-0772652-30 |
9 | 등록결정서 Decision to grant |
2013.11.20 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2013-0800803-87 |
10 | [대리인해임]대리인(대표자)에 관한 신고서 [Dismissal of Sub-agent] Report on Agent (Representative) |
2014.01.15 | 수리 (Accepted) | 1-1-2014-0040673-10 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
12 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
13 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
15 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
16 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
번호 | 청구항 |
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1 |
1 ⅰ) 제1자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질, ⅱ) 제2형광 단백질 및 제2자기조립단백질을 포함하는 제2융합단백질, ⅲ) 제3형광 단백질을 포함하는 제3융합단백질, ⅳ) 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질, ⅴ) 미끼 단백질, 및 ⅵ) 상기 미끼 단백질과의 상호작용 여부의 분석대상인 표적 단백질을 세포 내에서 동시에 발현시키되, 상기 짝 단백질은 상기 제2융합단백질 또는 상기 제3융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되고, 상기 미끼 단백질은 상기 제2융합단백질, 상기 제3융합단백질 또는 상기 제1자기조립단백질 및 상기 제1형광단백질을 포함하는 제4융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되며, 상기 표적 단백질은 상기 미끼 단백질이 포함된 융합단백질을 제외한 다른 융합단백질 또는 제4형광단백질을 포함하는 제5융합단백질에 포함되어 발현되는 것을 특징으로 하는 융합단백질 발현단계;상기 융합단백질들이 동시에 발현된 세포에 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 및 상기 짝 단백질의 이형 이합체 형성을 유도하는 파장의 빛을 조사하여 나노 클러스터 형성을 유도하는 광유도 나노클러스터 형성단계; 및상기 형광단백질들의 형광의 패턴과 강도를 관찰하는 형광 관찰단계를 포함하며, 상기 제1형광단백질 내지 제4형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하며, 상기 제1형광단백질 또는 제2형광단백질 중 어느 하나가 DsRed인 경우, DsRed가 포함된 융합단백질에서 상기 제1자기조립단백질 또는 상기 제2자기조립단백질은 생략이 가능한, 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
2 |
2 제1항에 있어서,상기 제1형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
3 |
3 제1항에 있어서,상기 제1자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
4 |
4 제1항에 있어서, 상기 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질은 CIB, CIBN, PhyB, PIF, FKF1, GIGANTEA, CRY 또는 PHR인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
5 |
5 제1항에 있어서,상기 제2형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), ECFP, TagCFP, Ds-Red 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
6 |
6 제1항에 있어서,상기 제2자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
7 |
7 제1항에 있어서,상기 제3형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
8 |
8 제1항에 있어서,상기 제4형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
9 |
9 ⅰ) 제1자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질, ⅱ) 제2형광 단백질 및 제2자기조립단백질을 포함하는 제2융합단백질, ⅲ) 제3형광 단백질을 포함하는 제3융합단백질, ⅳ) 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질, ⅴ) 미끼 단백질, 및 ⅵ) 상기 미끼 단백질과의 상호작용 여부의 분석대상인 표적 단백질을 세포 내에서 동시에 발현시키되, 상기 짝 단백질은 상기 제2융합단백질 또는 상기 제3융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되고, 상기 미끼 단백질은 상기 제2융합단백질, 상기 제3융합단백질 또는 상기 제1자기조립단백질 및 상기 제1형광단백질을 포함하는 제4융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되며, 상기 표적 단백질은 상기 미끼 단백질이 포함된 융합단백질을 제외한 다른 융합단백질 또는 제4형광단백질을 포함하는 제5융합단백질에 포함되어 발현되는 것을 특징으로 하는 융합단백질 발현단계;상기 융합단백질들이 동시에 발현된 세포에 상기 미끼 단백질과 상기 표적 단백질 사이의 단백질 상호작용 조절 후보물질을 처리하는 단계; 상기 조절 후보물질 처리 전, 후 또는 동시에 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 및 상기 짝 단백질의 이형 이합체 형성을 유도하는 파장의 빛을 조사하여 나노 클러스터를 형성을 유도하는 광유도 나노클러스터 형성단계; 및상기 형광단백질들의 형광의 패턴과 강도를 관찰하는 형광 관찰단계를 포함하며, 상기 제1형광단백질 내지 제4형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하며, 상기 제1형광단백질 또는 제2형광단백질 중 어느 하나가 DsRed인 경우, DsRed가 포함된 융합단백질에서 상기 제1자기조립단백질 또는 상기 제2자기조립단백질은 생략이 가능한, 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
10 |
10 제9항에 있어서,상기 제1형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
11 |
11 제9항에 있어서,상기 제1자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
12 |
12 제9항에 있어서,상기 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질은 CIB, CIBN, PhyB, PIF, FKF1, GIGANTEA, CRY 또는 PHR인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
13 |
13 제9항에 있어서,상기 제2형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), ECFP, TagCFP, Ds-Red 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
14 |
14 제9항에 있어서,상기 제2자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
15 |
15 제9항에 있어서,상기 제3형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
16 |
16 제9항에 있어서,상기 제4형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
17 |
17 제1자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터;제2형광 단백질 및 제2자기조립단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 제3형광 단백질을 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터, 상기 제1자기조립단백질, 상기 제1형광단백질 및 미끼 단백질을 포함하는 제4융합단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제4유전자 컨스트럭트를 포함하는 제4발현벡터를 포함하며,상기 제2융합단백질 또는 상기 제3융합단백질 중 어느 하나에 상기 미끼 단백질과의 단백질 상호작용 확인대상인 표적 단백질이 포함되거나 또는 제4형광단백질 및 상기 표적 단백질을 포함하는 제5융합단백질을 암호화하는 제5폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동가능하게 연결된 제5유전자 컨스트럭트를 포함하는 제5발현벡터가 추가적으로 포함되고, 상기 제1형광단백질 내지 제4형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하며, 상기 제1형광단백질 또는 제2형광단백질 중 어느 하나가 DsRed인 경우, DsRed가 포함된 융합단백질에서 상기 제1자기조립단백질 또는 상기 제2자기조립단백질은 생략이 가능한, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
18 |
18 제17항에 있어서,상기 제1형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
19 |
19 제17항에 있어서,상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질은 CIB, CIBN, PhyB, PIF6, FKF1, GIGANTEA, CRY 또는 PHR인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
20 |
20 제17항에 있어서,상기 제2형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, Ds-Red 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
21 |
21 제17항에 있어서,상기 제3형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
22 |
22 제17항에 있어서,상기 제1자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
23 |
23 제17항에 있어서,상기 제2자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
24 |
24 제17항에 있어서, 상기 제4형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
25 |
25 제1자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 제1폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터;제2형광 단백질 및 제2자기조립단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 제2폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 제3형광 단백질을 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 제3폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터, 상기 제1자기조립단백질, 상기 제1형광단백질을 포함하는 제4융합단백질을 암호화하는 제4폴리뉴클레오티드 및 미끼 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 상기 제4폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결될 수 있는 다중 클로닝 부위를 포함하는 제4유전자 컨스트럭트를 포함하는 제4발현벡터를 포함하며,상기 제2발현벡터 또는 상기 제3발현벡터 중 미끼 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드의 삽입을 위한 다중 클로닝 부위가 포함되지 않은 발현벡터 또는 추가적으로 포함되는 제4형광단백질을 포함하는 제5융합단백질을 암호화하는 제5폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제5발현벡터에 상기 미끼 단백질과의 단백질간 상호작용 여부 확인대상인 표적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 작동 가능하게 연결될 수 있는 다중 클로닝 부위가 포함되고, 상기 제1형광단백질 내지 제4형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하며, 상기 제1형광단백질 또는 제2형광단백질 중 어느 하나가 DsRed인 경우, DsRed가 포함된 융합단백질에서 상기 제1자기조립단백질 또는 상기 제2자기조립단백질은 생략이 가능한, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
26 |
26 제25항에 있어서,상기 제1형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
27 |
27 제25항에 있어서,상기 제1자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
28 |
28 제25항에 있어서,상기 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질은 CIB, CIBN, PhyB, PIF, FKF1, GIGANTEA, CRY 또는 PHR인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
29 |
29 제25항에 있어서,상기 제2형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), ECFP, TagCFP, Ds-Red 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
30 |
30 제25항에 있어서,상기 제2자기조립단백질은 페리틴(ferritin), 바이러스 캡시드 단백질, 페리틴 유사단백질, 마크네토좀, 칼모듈린 키나아제 IIα(CaMKIIα) 또는 DsRed인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
31 |
31 제25항에 있어서,상기 제3형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
32 |
32 제25항에 있어서,상기 제4형광단백질은 녹색형광단백질(green fluorescent protein, GFP), 황색형광단백질(yellow fluorescent protein, YFP), 적색형광단백질(red fluorescent protein, RFP), 시안형광단백질(cyan fluorescent protein, CFP), 청색형광단백질(blue fluorescent protein, BFP), 개량시안형광단백질(enhanced cyan fluorescent protein, ECFP), TagCFP, DsRed 또는 테트라시스테인 형광 모티프(tetracystein fluorescent motif)인,단백질간 상호작용 분석용 키트 |
33 |
33 ⅰ) 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질, ⅱ) 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질 및 제2형광단백질을 포함하는 제2융합단백질, ⅲ) 미끼 단백질, 및 ⅳ) 상기 미끼 단백질과의 상호작용 여부의 분석대상인 표적 단백질을 세포 내에서 동시에 발현시키되, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하고, 상기 미끼 단백질은 상기 제2융합단백질 또는 상기 자기조립단백질 및 상기 제1형광단백질을 포함하는 제3융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되며, 상기 표적 단백질은 상기 미끼 단백질이 포함된 융합단백질을 제외한 다른 융합단백질 또는 제3형광단백질을 포함하는 제4융합단백질에 포함되어 발현되는 것을 특징으로 하는 융합단백질 발현단계;상기 융합단백질들이 동시에 발현된 세포에 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 및 상기 짝 단백질의 이형 이합체 형성을 유도하는 파장의 빛을 조사하여 나노 클러스터 형성을 유도하는 광유도 나노클러스터 형성단계; 및상기 형광단백질들의 형광의 패턴과 강도를 관찰하는 형광 관찰단계를 포함하며, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는,광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질 간 상호작용 분석방법 |
34 |
34 ⅰ) 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질, ⅱ) 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질 및 제2형광단백질을 포함하는 제2융합단백질, ⅲ) 미끼 단백질, 및 ⅳ) 상기 미끼 단백질과의 상호작용 여부의 분석대상인 표적 단백질을 세포 내에서 동시에 발현시키되, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하고, 상기 미끼 단백질은 상기 제2융합단백질 또는 상기 자기조립단백질 및 상기 제1형광단백질을 포함하는 제3융합단백질 중 어느 하나에 포함되어 발현되며, 상기 표적 단백질은 상기 미끼 단백질이 포함된 융합단백질을 제외한 다른 융합단백질 또는 제3형광단백질을 포함하는 제4융합단백질에 포함되어 발현되는 것을 특징으로 하는 융합단백질 발현단계;상기 융합단백질들이 동시에 발현된 세포에 상기 미끼 단백질과 상기 표적 단백질 사이의 단백질 상호작용 조절 후보물질을 처리하는 단계; 상기 조절 후보물질 처리 전, 후 또는 동시에 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 및 상기 짝 단백질의 이형 이합체 형성을 유도하는 파장의 빛을 조사하여 나노 클러스터를 형성을 유도하는 광유도 나노클러스터 형성단계; 및상기 형광단백질들의 형광의 패턴과 강도를 관찰하는 형광 관찰단계를 포함하며, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는, 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 조절물질의 스크리닝 방법 |
35 |
35 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 제1폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터,제2형광단백질, 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질, 및 미끼 단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 제2폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동가능하게 연결된 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 및제3형광단백질 및 상기 미끼 단백질과 상호작용하는 표적 단백질을 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 제3폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동가능하게 연결된 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터를 포함하고, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하는 동형 이합체 형성 단백질이고, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
36 |
36 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 제1폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터,제2형광단백질, 및 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 제2폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 상기 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 미끼 단백질을 포함하거나 상기 DsRed 및 미끼 단백질을 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 제3폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터, 및제3형광단백질 및 상기 미끼 단백질과 상호작용하는 표적 단백질을 포함하는 제4융합단백질을 암호화하는 제4폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동가능하게 연결된 제4발현벡터를 포함하고, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하는 동형 이합체 형성 단백질이고, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
37 |
37 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 제1폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터,제2형광단백질 및 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 제2폴리뉴클레오티드 및 미끼 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 상기 제2폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결될 수 있도록 하는 다중 클로닝 부위를 포함하는 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 및제3형광단백질을 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 제3폴리뉴클레오티드 및 상기 미끼 단백질과 상호작용 하는 표적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결되고 상기 제3폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결될 수 있도록 하는 다중 클로닝 부위를 포함하는 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터를 포함하고, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하는 동형 이합체 형성 단백질이고, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
38 |
38 자기조립단백질, 제1형광단백질 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하거나 DsRed 및 광유도 이형 이합체 형성 단백질을 포함하는 제1융합단백질을 암호화하는 제1폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제1유전자 컨스트럭트를 포함하는 제1발현벡터,제2형광단백질 및 광조사시 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질과 이형 이합체를 형성하는 짝 단백질을 포함하는 제2융합단백질을 암호화하는 제2폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결된 제2유전자 컨스트럭트를 포함하는 제2발현벡터, 상기 자기조립단백질 및 제1형광단백질을 포함하거나 DsRed를 포함하는 제3융합단백질을 암호화하는 제3폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결되고 미끼 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 상기 제3폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결될 수 있도록 하는 다중 클로닝 부위를 포함하는 제3유전자 컨스트럭트를 포함하는 제3발현벡터, 및제3형광단백질을 포함하는 제4융합단백질을 암호화하는 제4폴리뉴클레오티드가 프로모터에 작동 가능하게 연결되고 상기 미끼 단백질과 상호작용하는 표적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 상기 제4폴리뉴클레오티드에 작동 가능하게 연결될 수 있도록 하는 다중 클로닝 부위를 포함하는 제4유전자 컨스트럭트를 포함하는 제4발현벡터를 포함하고, 상기 광유도 이형 이합체 형성 단백질 또는 상기 짝 단백질 중 어느 하나는 광조사와 무관하게 동형 이합체를 형성하는 동형 이합체 형성 단백질이고, 상기 제1형광단백질 내지 제3형광단백질은 서로 다른 파장의 빛을 방출하는, 단백질간 상호작용 분석용 키트 |
지정국 정보가 없습니다 |
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순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
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1 | KR101355970 | KR | 대한민국 | FAMILY |
2 | US09708381 | US | 미국 | FAMILY |
3 | US10604553 | US | 미국 | FAMILY |
4 | US20150284439 | US | 미국 | FAMILY |
5 | US20170275346 | US | 미국 | FAMILY |
6 | WO2013048185 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
7 | WO2013048185 | WO | 세계지적재산권기구(WIPO) | FAMILY |
순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
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DOCDB 패밀리 정보가 없습니다 |
국가 R&D 정보가 없습니다. |
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특허 등록번호 | 10-1354601-0000 |
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표시번호 | 사항 |
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1 |
출원 연월일 : 20110930 출원 번호 : 1020110100334 공고 연월일 : 20140124 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20131120 청구범위의 항수 : 38 유별 : G01N 33/68 발명의 명칭 : 광유도 나노클러스터 형성을 이용한 단백질간 상호작용 분석 방법 및 키트 존속기간(예정)만료일 : 20180117 |
순위번호 | 사항 |
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1 |
(권리자) 한국과학기술원 대전광역시 유성구... |
제 1 - 3 년분 | 금 액 | 763,500 원 | 2014년 01월 17일 | 납입 |
제 4 년분 | 금 액 | 613,200 원 | 2016년 12월 27일 | 납입 |
번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
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1 | [특허출원]특허출원서 | 2011.09.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2011-0769134-51 |
2 | 선행기술조사의뢰서 | 2012.05.17 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
3 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
4 | 선행기술조사보고서 | 2013.02.28 | 수리 (Accepted) | 9-1-2013-0011476-61 |
5 | 의견제출통지서 | 2013.05.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2013-0357927-69 |
6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2013.07.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-0667104-02 |
7 | [명세서등 보정]보정서 | 2013.08.26 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2013-0772650-49 |
8 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2013.08.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2013-0772652-30 |
9 | 등록결정서 | 2013.11.20 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2013-0800803-87 |
10 | [대리인해임]대리인(대표자)에 관한 신고서 | 2014.01.15 | 수리 (Accepted) | 1-1-2014-0040673-10 |
11 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
12 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
13 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
14 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
15 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
16 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
기술정보가 없습니다 |
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과제정보가 없습니다 |
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