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인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR (Leucine rich repeat) 패밀리 단백질이 융합된 수용성 융합 폴리펩타이드로서,상기 인터날린 단백질의 N-말단은 서열번호 14의 아미노산 서열 및 하기의 반복 모듈 패턴으로 구성되는 것인 융합 폴리펩타이드:[LxxLxxLxLxxN]여기서, L은 알라닌, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 또는 트립토판; N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌; x는 친수성 아미노산임
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제1항에 있어서, 상기 인터날린 단백질은 인터날린 A, 인터날린 B, 인터날린 C, 인터날린 H 및 인터날린 J로 이루어진 군에서 선택된 것인 융합 폴리펩타이드
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제1항에 있어서, 상기 LRR 패밀리 단백질은 가변 임파구 수용체 (Variable lymphocyte repeat; VLR), 톨유사수용체 (Toll-like receptor; TLR), TV3, U2A 및 리보뉴클레아제 억제제 (RI)로 이루어진 군에서 선택된 것인 융합 폴리펩타이드
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제1항에 있어서, 상기 인터날린 단백질의 N-말단 및 LRR 패밀리 단백질이 링커 (linker)를 통해 연결된 것인 융합 폴리펩타이드
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제1항에 있어서, 상기 인터날린 단백질의 N-말단은 서열번호 13인 융합 폴리펩타이드
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제1항에 있어서, 상기 융합 폴리펩타이드는 서열번호 7, 서열번호 8, 서열번호 9, 서열번호 10 또는 서열번호 12로 기재되는 아미노산 서열로 구성되는 것인 융합 폴리펩타이드
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(a) 인터날린 단백질의 반복 모듈과 LRR 패밀리 단백질의 반복 모듈간의 유사도가 가장 높은 순으로 정렬하는 단계;(b) 상기 (a) 단계의 정렬된 반복 모듈 중 유사도가 가장 높은 모듈을 선정하는 단계;(c) 상기 (b) 단계에서 선정된 모듈 중 인터날린 단백질의 반복 모듈이 N-말단에 위치하고, LRR 패밀리 단백질의 반복 모듈을 C-말단에 위치하도록 설계하는 단계;(d) 상기 (c) 단계에서 설계된 융합 폴리펩타이드의 결합에너지를 계산하여 인터날린 단백질과 LRR 패밀리 단백질의 결합 부위가 안정된 최적의 융합 폴리펩타이드를 선정하는 단계; 및(e) 상기 (d) 단계에서 선정된 융합 폴리펩타이드에 포함된 인터날린 단백질의 반복 모듈 중 표면 친수성 잔기들을 변형시켜서 에너지 함수 값을 최소화하는 최종 서열 조합을 선정하는 단계를 포함하는, 제1항의 융합 폴리펩타이드를 제조하는 방법으로서,상기 반복 모듈은 하기의 반복 모듈 패턴으로 표시되는 것인 방법:[LxxLxxLxLxxN]여기서, L은 알라닌, 글리신, 페닐알라닌, 티로신, 루이신, 이소루이신, 발린 또는 트립토판; N은 아스파라진, 글루타민, 세린, 시스테인 또는 트레오닌; x는 임의의 아미노산임
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제10항에 있어서, 상기 (c) 단계는 반복 모듈을 추가 또는 제거하는 단계를 추가로 포함하는 것인 방법
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제10항에 있어서, 상기 (c) 단계는 인터날린 단백질과 LRR 패밀리 단백질을 링커로 연결시키는 단계를 추가로 포함하는 것인 방법
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제1항의 융합 폴리펩타이드를 코딩하는 핵산 서열을 포함하는 벡터
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제15항에 있어서, 상기 핵산 서열은 코돈 최적화된 것인 벡터
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제15항에 있어서, 상기 벡터는 단백질 정제용 태그서열을 추가적으로 포함하는 것인 벡터
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제15항 내지 제17항 중 어느 한 항의 벡터로 형질전환된 숙주세포
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(a) 제15항 내지 제17항 중 어느 한 항의 벡터를 제조하는 단계; (b) 제조된 벡터를 숙주세포에 도입하는 단계; 및 (c) 상기 숙주세포로부터 융합 폴리펩타이드를 회수하는 단계를 포함하는, 수용성 및 접힘이 향상된 융합 폴리펩타이드를 생산하는 방법
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제19항에 있어서, (d) 컬럼을 이용하여 융합 폴리펩타이드를 정제하는 단계를 추가적으로 포함하는 방법
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(a) 제15항 내지 제17항 중 어느 한 항의 벡터를 제조하는 단계; (b) 제조된 벡터를 숙주세포에 도입하는 단계; 및 (c) 상기 숙주세포로부터 융합 폴리펩타이드를 발현하는 단계를 포함하는, 융합 폴리펩타이드의 수용성 및 접힘을 향상시키는 방법
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