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(a) 인간을 제외한 동물의 반응성 성상세포(reactive astrocyte)에 Ngn2(neurogenin-2) 단백질 또는 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 도입하거나, 또는 성상세포에서 Ngn2 단백질을 발현을 증가시키는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 성상세포를 배양하는 단계를 포함하는, 성상세포를 신경세포로 리프로그래밍(reprogramming)하는 방법으로,상기 (a) 단계는, (i) GFAP 프로모터 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된, Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제1 재조합 벡터;(ii) Lcn2 또는 iNOS 프로모터, 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된 Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제2 제조합 벡터; 및(iii) EF1α 프로모터 및 상기 프로모터 하단에 2개의 loxP 부위를 포함하고, 상기 2개의 loxP 부위 사이에 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는 제3 재조합 벡터를 도입하여 Split-cre system을 이용하는 것으로,상기 제1 및 제2 재조합 벡터에 포함되는 Cre 재조합효소를 코딩하는 핵산서열은 Cre 재조합효소를 절단하여 N-말단 및 C-말단 부위로 나눈 것으로 서로 중복되지 않으며,상기 제3 재조합 벡터의 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 프로모터와 역방향으로 연결된 것인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 서열번호 2의 염기서열로 구성된 것인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 리프로그래밍은 전환분화(transdifferentiation) 또는 직접분화(direct-reprogramming)인 것인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 (a) 단계에서 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자의 도입은 도 1의 a 또는 도 2의 a에 개시된 개열지도를 갖는 재조합 벡터, 또는 상기 재조합 벡터를 포함하는 바이러스를 성상세포에 전달하는 것인, 방법
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제4항에 있어서, 상기 성상세포는 마우스(mouse) 성상세포이고, Cre 재조합 효소의 일부를 코딩하는 서열을 포함하는 재조합 벡터 2종의 프로모터는 각각 Lcn2 및 GFAP 프로모터인 것인, 방법
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제4항에 있어서, 상기 성상세포는 원숭이(monkey) 성상세포이고, Cre 재조합 효소의 일부를 코딩하는 서열을 포함하는 재조합 벡터 2종의 프로모터는 각각 iNOS 및 GFAP 프로모터인 것인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 성상세포는 개체의 뇌 또는 척수로부터 유래된 것인, 방법
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제1항에 있어서, 상기 반응성 성상세포는 척수 손상 개체로부터 유래된 것인, 방법
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Ngn2 단백질 또는 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는, 반응성 성상세포의 신경세포로의 리프로그래밍 유도용 조성물로,상기 조성물은 Split-cre system을 이용하기 위한 하기 (i) 내지 (iii)의 구성을 포함하는 것인, 반응성 성상세포의 신경세포로의 리프로그래밍 유도용 조성물:(i) GFAP 프로모터 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된, Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제1 재조합 벡터;(ii) Lcn2 또는 iNOS 프로모터, 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된 Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제2 제조합 벡터; 및(iii) EF1α 프로모터 및 상기 프로모터 하단에 2개의 loxP 부위를 포함하고, 상기 2개의 loxP 부위 사이에 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는 제3 재조합 벡터로,상기 제1 및 제2 재조합 벡터에 포함되는 Cre 재조합효소를 코딩하는 핵산서열은 Cre 재조합효소를 절단하여 N-말단 및 C-말단 부위로 나눈 것으로 서로 중복되지 않으며,상기 제3 재조합 벡터의 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 프로모터와 역방향으로 연결된 것임
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Ngn2 단백질 또는 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는,퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물로,상기 조성물은 Split-cre system을 이용하기 위한 하기 (i) 내지 (iii)의 구성을 포함하는 것인, 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물:(i) GFAP 프로모터 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된, Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제1 재조합 벡터;(ii) Lcn2 또는 iNOS 프로모터, 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된 Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제2 제조합 벡터; 및(iii) EF1α 프로모터 및 상기 프로모터 하단에 2개의 loxP 부위를 포함하고, 상기 2개의 loxP 부위 사이에 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는 제3 재조합 벡터로,상기 제1 및 제2 재조합 벡터에 포함되는 Cre 재조합효소를 코딩하는 핵산서열은 Cre 재조합효소를 절단하여 N-말단 및 C-말단 부위로 나눈 것으로 서로 중복되지 않으며,상기 제3 재조합 벡터의 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 프로모터와 역방향으로 연결된 것임
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제10항에 있어서, 상기 퇴행성 신경질환은 파킨슨씨병(Parkinson's disease), 알츠하이머(Alzheimer's disease), 피크병(Pick's disease), 헌팅톤병(Huntington's disease), 근위축성 측색 경화증(amyotriophic lateral sclerosis), 허혈성 뇌질환(stroke), 탈수초질환(demyelinating disease), 다발성 경화증, 간질, 퇴행성 신경질환 및 척수손상(Spinal Cord Injury, SCI)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것인, 약학적 조성물
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제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 신경세포
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제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된 신경세포를 유효성분으로 포함하는, 세포치료제
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인간을 제외한 동물에서,(a) 반응성 성상세포(reactive astrocyte)에 Ngn2(neurogenin-2) 단백질 또는 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 도입하거나, 또는 성상세포에서 Ngn2 단백질을 발현을 증가시키는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 성상세포를 배양하여, 성상세포를 신경세포로 리프로그래밍(reprogramming)하는 단계를 포함하는, 퇴행성 신경질환의 예방 또는 치료 방법으로,상기 (a) 단계는, (i) GFAP 프로모터 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된, Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제1 재조합 벡터;(ii) Lcn2 또는 iNOS 프로모터, 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된 Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제2 제조합 벡터; 및(iii) EF1α 프로모터 및 상기 프로모터 하단에 2개의 loxP 부위를 포함하고, 상기 2개의 loxP 부위 사이에 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는 제3 재조합 벡터를 도입하여 Split-cre system을 이용하는 것으로,상기 제1 및 제2 재조합 벡터에 포함되는 Cre 재조합효소를 코딩하는 핵산서열은 Cre 재조합효소를 절단하여 N-말단 및 C-말단 부위로 나눈 것으로 서로 중복되지 않으며,상기 제3 재조합 벡터의 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 프로모터와 역방향으로 연결된 것인, 방법
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(a) 분리된 반응성 성상세포(reactive astrocyte)에 Ngn2(neurogenin-2) 단백질 또는 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 도입하거나, 또는 성상세포에서 Ngn2 단백질을 발현을 증가시키는 단계; 및(b) 상기 (a) 단계의 성상세포를 배양하는 단계를 포함하는, 성상세포를 신경세포로 리프로그래밍(reprogramming)하는 방법으로,상기 (a) 단계는, (i) GFAP 프로모터 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된, Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제1 재조합 벡터;(ii) Lcn2 또는 iNOS 프로모터, 및 상기 프로모터의 하단에 작동가능하게 연결된 Cre 재조합효소의 N-말단 또는 C-말단을 코딩하는 핵산서열을 포함하는 제2 제조합 벡터; 및(iii) EF1α 프로모터 및 상기 프로모터 하단에 2개의 loxP 부위를 포함하고, 상기 2개의 loxP 부위 사이에 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자를 포함하는 제3 재조합 벡터를 도입하여 Split-cre system을 이용하는 것으로,상기 제1 및 제2 재조합 벡터에 포함되는 Cre 재조합효소를 코딩하는 핵산서열은 Cre 재조합효소를 절단하여 N-말단 및 C-말단 부위로 나눈 것으로 서로 중복되지 않으며,상기 제3 재조합 벡터의 Ngn2 단백질을 코딩하는 핵산분자는 프로모터와 역방향으로 연결된 것인, 방법
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제15항의 방법으로 제조된 신경세포를 유효성분으로 포함하는, 세포치료제
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