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다음 단계를 포함하는 게놈정보 및 인실리코(in silico) 분석을 이용한 배양배지의 제조방법:(a) 대상 진핵세포 또는 원핵세포의 게놈 정보를 이용하여 대사회로를 구축하는 단계;(b) 상기 구축된 대사회로로부터 대사산물 중 하나를 제거하고, 인실리코(in silco) 시뮬레이션을 이용하여 대사 흐름 분석을 수행하는 단계;(c) 상기 인실리코 시뮬레이션 결과 목적 함수값이 0인 경우(여기서, 상기 목적함수는 상기 진핵세포 또는 원핵세포가 요구하는 구성성분을 어느 하나라도 생성하지 못하면 그 값을 0으로 함), 상기 제거된 대사산물을 최소 합성 배양배지 성분으로 결정하고, 목적 함수값이 0이 아니면 (b)단계로 회귀하는 단계;(d) 상기 대사산물을 스스로 합성하는 다른 생물종과의 비교를 통해 결실된 효소 및 해당 대사 반응식을 조사하여 해당 반응식이 존재하는 경우, 해당 대사산물을 외부에서 공급하지 않고도 내부적으로 생성 및 사용 가능한지 확인하는 단계; (e) 상기 (b) 내지 (d) 단계를 반복하여 결정된 최소 합성 배양배지 성분들을 인실리코 최소 합성 배양배지로 결정하는 단계; 및(f) 상기 결정된 인실리코 최소 합성 배양배지에 상기 진핵세포 또는 원핵세포를 실제 배양한 다음, 최종 배양배지를 결정하는 단계
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제1항에 있어서, 상기 (f)단계는 상기 인실리코 최소 합성 배양배지에 특정 영양성분을 하나씩 추가하여 실제 배양함으로써 상기 진핵세포 또는 원핵세포의 최소 영양요구성을 확인한 다음, 최종 배양배지를 결정하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 (f)단계 다음에 상기 진핵세포 또는 원핵세포의 성장에 필수적이지는 않으나 성장을 촉진하는 성분을 상기 배지에 추가하여 최종 배양배지를 결정하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 (b)단계의 인실리코 시뮬레이션은 포도당 또는 그 외의 탄소원을 포함하는 조건에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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다음 단계를 포함하는 게놈정보 및 인실리코 분석을 이용한 숙신산 생산용 배양배지의 제조방법:(a) 숙신산 생성능을 가지는 진핵세포 또는 원핵세포의 게놈정보를 이용하여 대사회로를 구축하는 단계;(b) 상기 구축된 대사회로로부터 대사산물 중 하나를 제거하고, 인실리코(in silico) 시뮬레이션을 이용하여 대사 흐름 분석을 수행하는 단계;(c) 상기 인실리코 시뮬레이션 결과 목적 함수값이 0인 경우(여기서, 상기 목적함수는 상기 진핵세포 또는 원핵세포가 요구하는 구성성분을 어느 하나라도 생성하지 못하면 그 값을 0으로 함), 상기 제거된 대사산물을 최소 합성 배양배지 성분으로 결정하고, 목적 함수값이 0이 아니면 (b)단계로 회귀하는 단계;(d) 상기 대사산물을 스스로 합성하는 다른 생물종과의 비교를 통해 결실된 효소 및 해당 대사 반응식을 조사하여 해당 반응식이 존재하는 경우, 해당 대사산물을 외부에서 공급하지 않고도 내부적으로 생성 및 사용 가능한지 확인하는 단계; (e) 상기 (b) 내지 (d) 단계를 반복하여 결정된 최소 합성 배양배지 성분들을 인실리코 최소 합성 배양배지로 결정하는 단계; 및(f) 상기 결정된 인실리코 최소 합성 배양배지에 상기 숙신산 생성능을 가지는 진핵세포 또는 원핵세포를 실제 배양한 다음, 최종 배양배지를 결정하는 단계
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제5항에 있어서, 상기 (f)단계는 상기 인실리코(in silico) 최소 합성 배양배지에 특정 영양성분을 하나씩 추가하여 실제 배양함으로써 상기 진핵세포 또는 원핵세포의 최소 영양요구성을 확인한 다음, 최종 배양배지를 결정하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, 상기 (f)단계 다음에 상기 진핵세포 또는 원핵세포의 성장에 필수적이지는 않으나 성장을 촉진하는 성분을 상기 배지에 추가하여 최종 배양배지를 결정하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, (b)단계의 인실리코 시뮬레이션은 포도당 또는 그 외의 탄소원을 포함하는 조건에서 수행하는 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, (a)단계의 숙신산 생성능을 가지는 원핵세포는 맨하이미아(Mannheimia) 속인 것을 특징으로 하는 방법
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제9항에 있어서, 상기 맨하이미아(Mannheimia) 속은 맨하이미아 숙시니시프로듀슨스(Mannheimia succiniciproduces MBEL55E: KCTC 0769BP)인 것을 특징으로 하는 방법
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제5항에 있어서, (b) 단계의 대사산물은 아미노산 또는 비타민인 것을 특징으로 하는 방법
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제11항에 있어서, 상기 아미노산은 메티오닌(methionine) 또는 시스테인(cysteine)인 것을 특징으로 하는 방법
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제11항에 있어서, 상기 비타민은 니코틴산(nicotinic acid), 판토테네이트(pantothenate), 피리독신(pyridoxine) 및 티아민(thiaimine)으로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제7항에 있어서, 상기 성장을 촉진하는 성분은 아미노산, 비타민 및 핵산으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제14항에 있어서, 상기 아미노산은 알라닌(alanine), 아스파라긴(asparagine), 글루타민산(glutamic acid), 히스티딘(histidine), 이소루신(isoleucine), 루신(leucine), 페닐알라닌(phenylalanine), 프롤린(proline), 트레오닌(threonine) 및 트립토판(tryptophane)으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제14항에 있어서, 상기 비타민은 아스코빈산(ascorbic acid), 바이오틴(biotin) 및 폴산(folic acid)으로 구성된 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제16항에 있어서, 상기 핵산은 우라실(uracil) 및 크산틴(xanthine)으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상인 것을 특징으로 하는 방법
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제5항 내지 제17항 중 어느 한 항의 방법으로 제조되고, 포도당 또는 포도당 이외의 탄소원, 메티오닌(methionine) 또는 시스테인(cysteine), 니코틴산(nicotinic acid), 판토테네이트(pantothenate), 피리독신(pyridoxine) 및 티아민(thiaimine)으로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 비타민 및 핵산을 함유하는 숙신산 생산용 배양배지
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제18항의 숙신산 생산용 배양배지를 이용하여 숙신산 생성능을 가지는 균주를 배양하고, 그 배양액으로부터 숙신산을 회수하는 것을 특징으로 하는 숙신산의 제조방법
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