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대장균에서 목적 외래 단백질을 분비 생산하는 방법

  • 기술번호 : KST2014036565
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 대장균에서 외래단백질의 세포밖 분비 효율 향상을 위한 신호서열 펩티드에 관한 것으로, 구체적으로 서열번호 3으로 기재되는 신호서열 펩티드의 C-말단에 연결된 외래단백질로 구성되는 재조합 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 대장균에서 상기 외래 단백질의 세포밖 분비 효율 향상을 위한 유전자 컨스트럭트에 관한 것이다. 본 발명은 재조합 단백질의 세포질 밖으로의 분비 효율을 향상시킴으로써, 재조합 단백질의 생산에 유용하게 사용할 수 있다. 외래단백질, 대장균, 분비향상, 아가레이즈, 신호서열 펩티드
Int. CL C07K 14/405 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020090006094 (2009.01.23)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-1026526-0000 (2011.03.25)
공개번호/일자 10-2010-0086717 (2010.08.02) 문서열기
공고번호/일자 (20110401) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2009.01.23)
심사청구항수 15

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 판철호 대한민국 강원도 강릉시
2 이주영 대한민국 서울시 강남구
3 엄병헌 대한민국 경기도 성남시 분당구
4 김상무 대한민국 경기 용인시
5 송대근 대한민국 경기 용인시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 한라특허법인(유한) 대한민국 서울시 서초구 강남대로 ***(서초동, 남강빌딩 *층)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국코러스 주식회사 강원도 춘천
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2009.01.23 수리 (Accepted) 1-1-2009-0047740-16
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2010.01.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2010.02.11 수리 (Accepted) 9-1-2010-0009662-40
5 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)
2011.01.10 수리 (Accepted) 1-1-2011-0019402-57
6 등록결정서
Decision to grant
2011.02.11 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0079286-88
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
8 대리인선임신고서
Report on Appointment of Agent
2015.12.23 수리 (Accepted) 1-1-2015-5033520-42
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
서열번호 3으로 기재되는 폴리펩티드로 구성되는 대장균에서 외래 단백질의 세포밖 분비 효율 향상을 위한 신호서열 펩티드
2 2
제 1항에 있어서, 서열번호 3으로 기재되는 폴리펩티드는 베타-아가레이즈 AgaB34(Gene bank 등록번호 EU200967; nts 서열번호 1, aa 서열번호 2)의 N-말단 23개 아미노산 잔기인 것을 특징으로 하는 신호서열 펩티드
3 3
제 1항에 있어서, 상기 외래단백질은 항원, 항체, 세포수용체, 효소, 구조 단백질, 혈청, 세포 단백질로 이루어진 군으로부터 선택되는 단백질인 것을 특징으로 하는 신호서열 펩티드
4 4
제 1항의 신호서열 펩티드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드
5 5
제 4항에 있어서, 서열번호 12로 기재되는 것을 특징으로 하는 폴리뉴클레오티드
6 6
제 1항의 신호서열 펩티드의 C-말단에 연결된 외래단백질로 구성되는 재조합 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는, 대장균에서 상기 외래 단백질의 세포밖 분비 효율 향상을 위한 유전자 컨스트럭트
7 7
제 6항에 있어서, 신호서열 펩티드를 암호화하는 폴리뉴클레오티드에 연결된 외래유전자의 삽입을 위한 제한효소 부위를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 컨스트럭트
8 8
제 6항에 있어서, 신호서열 펩티드와 외래유전자 사이에, 단백질 절단효소 인식부위를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 유전자 컨스트럭트
9 9
제 8항에 있어서, 상기 단백질 절단효소 인식부위는 Xa 인자 인식부위, 엔테로키나제 인식부위, 제네나제(Genenase) I 인식부위 또는 퓨린(Furin) 인식부위가 단독으로 사용되거나 어느 두 개 이상을 순차적으로 연결하여 사용되는 것을 특징으로 하는 유전자 컨스트럭트
10 10
제 6항의 유전자 컨스트럭트를 포함하는 발현벡터
11 11
제 10항의 발현벡터가 형질도입된 형질전환체
12 12
제 11항의 형질전환체를 배양하여 재조합 단백질의 발현을 유도하고 이를 수득하는 단계로 구성되는 대장균에서 외래 단백질의 세포밖 분비 효율이 향상된 재조합 단백질의 제조방법
13 13
제 12항의 제조방법에 의하여 제조된 재조합 단백질
14 14
1) 제 1항의 신호서열 펩티드; 단백질 절단효소 인식부위; 및 외래단백질을 순차적으로 포함하는 재조합 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드로 구성되는 유전자 컨스트럭트가 작동 가능하게 연결된 재조합 발현벡터를 제조하는 단계; 2) 단계 1)의 재조합 발현벡터로 숙주세포를 형질전환하여 형질전환체를 제조하는 단계; 3) 단계 2)의 형질전환체를 배양하여 재조합 단백질의 발현을 유도하는 단계; 4) 단계 3)의 배양액으로부터 상기 재조합 단백질을 분리하는 단계; 및, 5) 단계 4)의 분리된 재조합 단백질을 상기 단백질 절단효소 인식 부위를 절단할 수 있는 단백질 절단효소로 절단한 후 원래 형태의 외래단백질을 분리하는 단계를 포함하는 원래 형태의 외래단백질의 제조방법
15 15
제 14항에 있어서, 상기 단백질 절단효소 인식부위는 Xa 인자 인식부위, 엔테로키나제 인식부위, 제네나제(Genenase) I 인식부위 또는 퓨린(Furin) 인식부위가 단독으로 사용되거나 어느 두 개 이상을 순차적으로 연결하여 사용되는 것을 특징으로 하는 원래 형태의 외래단백질의 제조방법
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2 US20110033890 US 미국 FAMILY
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1 US2011033890 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US8304210 US 미국 DOCDBFAMILY
3 WO2010085012 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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1 지식경제부 강릉대학교산학협력단 지역산업기술개발사업 강원지역 해양천연물로부터 HTSEB (High throughput structure elucidation/bioassay)시스템 구축을 통한 질환관련 기능성 소재 탐색