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소수성 플레이트(plate); 및복수의 다공성 하이드로젤(hydrogel) 미세입자를 포함하고,상기 복수의 하이드로젤 미세입자는 상기 소수성 플레이트에 서로 분리되어 배열되며,상기 하이드로젤 미세입자는 친수성 폴리머인, PCR(Polymerase Chain Reaction, 중합효소 연쇄 반응)용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 하이드로젤 미세입자는 공극 내부에 PCR 프라이머로서 전방향 프라이머(forward primer) 및 역방향 프라이머(reverse primer) 중 하나 이상이 고정된 것인, PCR용 반응 칩
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제2항에 있어서,상기 하이드로젤 미세입자의 공극 내부에 고정된 프라이머는,아크릴기(acryl group), 아민기(amine group) 및 카복실기(carboxyl group) 이루어진 화학적 반응기; 및이중결합(double bond) 중 하나 이상을 포함하고, 상기 화학적 반응기를 포함하는 프라이머는 화학적 반응기가 하이드로젤 미세입자에 화학적으로 고정된 것인, PCR용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 하이드로젤 미세입자는 공극 내부에 PCR 프라이머가 고정되지 않은 것인, PCR용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 복수의 다공성 하이드로젤 미세입자는 상기 소수성 플레이트 상에 다각형 형태로 배열된 것인, PCR용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 복수의 다공성 하이드로젤 미세입자들의 각 입자 평균 직경은 10 내지 500 μm인, PCR용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 복수의 하이드로젤 미세입자는 입자 표면에 수불용성 물질을 포함하여 각각의 미세입자가 서로 분리되어 배열되는 것인, PCR용 반응 칩
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제7항에 있어서, 상기 수불용성 물질은 오일을 포함하는, PCR용 반응 칩
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제1항에 있어서,상기 PCR용 반응 칩은 디지털 PCR용 반응 칩인, PCR용 반응 칩
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제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 PCR용 반응 칩 제조방법으로,(1) 소수성 플레이트(plate)를 준비하는 단계;(2) 친수성 프레폴리머(pre-polymer)를 포함하는 미세입자 형성 용액을 제조하는 단계;(3) 상기 소수성 플레이트 위에 상기 미세입자 형성 용액을 3차원 형태로 사출(jetting)하여 복수의 다공성 하이드로젤 미세입자를 상기 소수성 플레이트 상에 배열하는 단계;(4) 상기 소수성 플레이트 상에 배열된 하이드로젤 미세입자를 경화시키는 단계; 및(5) 상기 소수성 플레이트에 배열된 하이드로젤 미세입자 표면에 수불용성 용액을 흘려주어 입자들을 분리(isolation)시키는 단계;를 포함하는 PCR용 반응 칩 제조방법
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제10항에 있어서,상기 (3) 단계는 상기 배열된 하이드로젤 미세입자 표면상에 오일을 흘려주는 단계를 더 포함하는, PCR용 반응 칩 제조방법
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제10항에 있어서,상기 (4) 단계 및 상기 (5) 단계 사이에, 상기 경화된 미세입자가 배열된 소수성 플레이트를 건조시키는 단계; 및상기 건조된 소수성 플레이트 위에 폴리머 몰드(mold)를 올려놓고 상기 소수성 플레이트의 표면에 상기 몰드를 접착시키는 단계;를 추가로 포함하는, PCR용 반응 칩 제조방법
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표적(target) 핵산이 포함된 검출 시료를 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 PCR용 반응 칩에 주입하는 단계; 및상기 표적 핵산을 중합효소 연쇄반응(PCR)시켜 표적 핵산을 증폭시키는 단계;를 포함하는 PCR 방법
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제13항에 있어서,상기 검출 시료를 PCR용 반응 칩에 주입하는 단계는 상기 검출 시료와 함께 PCR 프라이머로서 표적(target) 핵산의 전방향 프라이머(forward primer), 역방향 프라이머(reverse primer), dNTP 및 DNA 중합효소가 포함된 PCR 반응 용액을 PCR용 반응 칩에 주입하는 것인, PCR 방법
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제14항에 있어서,상기 PCR 반응 용액은 역전사 효소를 추가로 포함하는, PCR 방법
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제13항에 있어서,상기 PCR은 상기 PCR용 반응 칩에 배열된 복수의 하이드로젤 미세입자별로 독립적으로 표적 핵산이 증폭되는 것인, PCR 방법
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제13항에 있어서,상기 PCR 방법은 상기 증폭 단계 이후에 상기 증폭된 핵산을 검출하는 단계를 추가로 포함하는 것인, PCR 방법
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제17항에 있어서,상기 증폭 핵산 검출 단계는 상기 증폭된 핵산으로부터 형광(Fluorescence) 신호를 측정하는 것인, PCR 방법
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제18항에 있어서,상기 형광 신호는 표적 핵산 또는 표적 핵산의 증폭물(amplicon)과, 프로브 또는 형광염료(dye)의 반응에 의한 형광 신호이고,상기 프로브는 택맨 프로브(Taqman probe)를 포함하고,상기 형광염료는 사이버 그린(SYBR green), 피코그린(Picogreen), 에바그린(Evagreen), 훼히스트 33258(Hoechst 33258), 훼히스트 33342(Hoechst 33342), 에티디움 브로마이드(ethidium bromide), 아크리딘 오렌지(acridine orange), 프로피디움 아이오다이드(propidium iodide), 미트람이신(mithramycin), TO-PRO-3, TOTO, YOYO 및 YOPRO-1으로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상을 포함하는, PCR 방법
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제17항에 있어서,상기 PCR 방법은 상기 핵산 검출 단계 이후에 표적 핵산의 정량 분석 단계를 추가로 포함하는 것인, PCR 방법
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제13항에 있어서,상기 PCR은 디지털 PCR인, PCR 방법
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제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 따른 PCR용 반응 칩; 및반응 챔버(chamber);를 포함하는 PCR 장치
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