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순환 흐름 및 재생 동작이 가능한 미세유체칩 기반의 병원균 검출 장치 및 검출 방법(APPARATUS FOR DETECTION OF PATHOGEN BY USING MICROFLUIDIC-CHIP WITH CIRCULATING FLOW AND REGENERATION MODES, AND METHOD USING THE SAME)

  • 기술번호 : KST2017009331
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 미세유체칩(microfluidic chip)을 기반으로 병원균을 검출하는 장치 및 검출 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 시료액을 순환 공급하여 병원균의 농도가 낮은 시료의 검출 기능을 개선함으로써 시간에 따른 형광세기의 변화로부터 결정되는 검출한계를 개선한 장치 및 상기 장치를 사용하여 검출하는 방법을 제공한다.
Int. CL G01N 33/569 (2016.01.05) G01N 35/08 (2016.01.05) G01N 21/64 (2016.01.05) G01N 1/30 (2016.01.05) B01L 3/00 (2016.01.05) G01N 35/00 (2016.01.05)
CPC G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01) G01N 33/569(2013.01)
출원번호/일자 1020150169477 (2015.11.30)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2017-0063282 (2017.06.08) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.11.30)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 전명석 대한민국 서울특별시 성북구
2 우덕하 대한민국 서울특별시 성북구
3 전영민 대한민국 서울특별시 성북구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인 티앤아이 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, A동 ****호(문정동, 엠스테이트)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.11.30 수리 (Accepted) 1-1-2015-1171528-05
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2016.10.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2016.12.20 수리 (Accepted) 9-1-2016-0052572-55
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2017.07.18 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0498936-36
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2017.09.08 수리 (Accepted) 1-1-2017-0874129-81
6 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)
2017.10.18 수리 (Accepted) 1-1-2017-1027076-49
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2017.11.14 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2017-1131202-79
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2017.11.14 수리 (Accepted) 1-1-2017-1131201-23
9 등록결정서
Decision to grant
2018.03.27 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2018-0212503-97
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번호 청구항
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투명 기판;상기 투명 기판의 측면에 형성된 제1, 제2 및 제3 개구부;상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제1 개구부와 상기 제2 개구부를 연결하는 주채널;상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제1 개구부와 상기 제3 개구부를 연결하는 제1 연결채널;상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제2 개구부와 상기 3개구부를 연결하는 제2 연결채널;상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제1개구부, 상기 제1 연결채널 및 상기 주채널의 교점까지 연장되는 제1 체결구;상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제2 개구부, 상기 제2 연결채널 및 상기 주채널의 교점까지 연장되는 제2 체결구;상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제3 개구부, 상기 제1 연결채널 및 상기 제2 연결채널의 교점까지 연장되는 제3 체결구;상기 제1, 제2 및 제3 체결구 각각에 삽입 장착되는 3방향 나사형 밸브(three-way threaded valve);상기 주채널 상에 배치되며, 형광 물질로 염색시킨 병원균과 반대되는 전하를 갖는 항균 펩타이드(antimicrobial peptide; AMP)가 고정된 지지체;상기 주채널의 하면에 서로 이격되어 양측으로 배치되고, 그 사이에 상기 지지체들을 수용하는 챔버를 형성하는 돌출부(weir);형광 물질로 염색시킨 병원균을 포함하고 상기 제3 개구부로 시료액을 공급하는 시료 용기; 상기 시료 용기로부터 상기 제3 개구부로 시료액을 공급하는 펌프; 및상기 형광물질을 검출하는 형광 현미경을 포함하여, 상기 시료 용기의 시료액은 상기 제3 개구부로 공급되어 상기 주채널을 일측 방향으로 통과하고 상기 제2 개구부로 유출되어 상기 시료 용기로 투입된 후 다시 상기 제3 개구부 투입됨으로써, 상기 지지체에 결합되지 못한 시료액 중의 병원균이 상기 지지체로 다시 공급되는 순환흐름이 형성될 수 있으며, 상기 3방향 나사형 밸브는, 나사선이 형성된 몸체부, 일정한 깊이와 폭을 갖고 3방향으로 통공된 '┻'모양의 관로가 형성된 말단부 및 상기 '┻' 관로 모양에 대응되는 표시를 구비한 머리부를 구비하고, 상기 나사선을 따라 회전됨에 따라 상기 말단부에 형성된 관로는 상기 제1연결채널, 상기 제2연결채널 및 상기 주채널로 이루어진 군에서 선택되는 2개의 채널과 연결되도록 상기 관로의 방향이 설정되는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 항균 펩타이드는 양전하를 갖고 상기 병원균은 음전하를 갖는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 지지체는 항균 펩타이드가 고정된 유리 구슬(glass bead)인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제5항에 있어서,상기 돌출부의 높이는 상기 유리 구슬 직경의 1/4 내지 1/3인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제5항에 있어서,상기 유리 구슬의 직경은 30 내지 38 ㎛이고,상기 돌출부의 길이는 250 내지 350 ㎛이고,상기 챔버의 길이는 600 내지 1,000 ㎛인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 주채널의 상면과 상기 지지체 사이의 거리는 15 ㎛ 이하인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 주채널의 폭은 상기 주채널의 높이의 4배 이상인 것을 특징으로 하는병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 펌프는 연동 펌프(peristatic pump)인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 3방향 나사형 밸브의 조절에 의해 상기 제3 개구부로 유입된 세척 용액이 상기 주채널의 타측 방향으로 통과하고 상기 제1 개구부로 유출되도록 제어되는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 투명 기판은 폴리디메틸실록산(polydimethylsiloxane, PDMS)인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제12항에 있어서,상기 3방향 나사형 밸브의 경도는 상기 투명 기판의 경도보다 큰 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제13항에 있어서,상기 3방향 나사형 밸브는 폴리메틸메타크릴레이트(polymethylmethacrylate, PMMA)로 이루어진 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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제1항에 있어서,상기 투명 기판은 투명 상부 기판 및 투명 하부 기판으로 이루어지고,상기 투명 상부 기판에 상기 제1 내지 제3 개구부와 상기 제1, 제2 및 제3 체결구가 배치되고,상기 투명 하부 기판에 주채널, 제1 연결채널, 제2 연결채널, 항균 펩타이드 지지체, 및 돌출부가 배치되고,상기 제1 내지 제3 체결구는 상기 투명 상부 기판을 관통하여 투명 하부 기판의 내부까지 연장되고,상기 투명 상부 기판과 상기 투명 하부 기판은 실링되어 접합된 것을 특징으로 하는 병원균 검출 장치
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투명 기판; 상기 투명 기판의 측면에 형성된 제1, 제2 및 제3 개구부; 상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제1 개구부와 상기 제2 개구부를 연결하는 주채널; 상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제1 개구부와 상기 제3 개구부를 연결하는 제1 연결채널; 상기 투명 기판 내부에 형성되며, 상기 제2 개구부와 상기 3개구부를 연결하는 제2 연결채널; 상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제1개구부, 상기 제1 연결채널 및 상기 주채널의 교점까지 연장되는 제1 체결구; 상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제2 개구부, 상기 제2 연결채널 및 상기 주채널의 교점까지 연장되는 제2 체결구; 상기 투명 기판의 상면으로부터 상기 제3 개구부, 상기 제1 연결채널 및 상기 제2 연결채널의 교점까지 연장되는 제3 체결구; 상기 제1, 제2 및 제3 체결구 각각에 삽입 장착되고, 나사선이 형성된 몸체부, 일정한 깊이와 폭을 갖고 3방향으로 통공된 '┻'모양의 관로가 형성된 말단부 및 상기 '┻' 관로 모양에 대응되는 표시를 구비한 머리부를 구비하고, 상기 나사선을 따라 회전됨에 따라 상기 말단부에 형성된 관로는 상기 제1연결채널, 상기 제2연결채널 및 상기 주채널로 이루어진 군에서 선택되는 2개의 채널과 연결되도록 상기 관로의 방향이 설정되도록 하는 3방향 나사형 밸브; 상기 주채널 상에 배치되며, 형광 물질로 염색시킨 병원균과 반대되는 전하를 갖는 항균 펩타이드(antimicrobial peptide; AMP)가 고정된 지지체; 상기 주채널의 하면에 서로 이격되어 양측으로 배치되고, 그 사이에 상기 지지체들을 수용하는 챔버를 형성하는 돌출부(weir); 형광 물질로 염색시킨 병원균을 포함하고 상기 제3 개구부로 시료액을 공급하는 시료 용기; 상기 시료 용기로부터 상기 제3 개구부로 시료액을 공급하는 펌프; 및 상기 형광물질을 검출하는 형광 현미경을 포함한 병원균 검출 장치를 제공하는 단계;형광 물질로 염색시킨 병원균을 포함하는 시료액을 상기 병원균과 반대되는 전하를 갖는 항균 펩타이드가 고정된 지지체 상으로 통과시키는 제1 단계; 상기 통과된 시료액을 시료 용기로 회수하는 제2 단계; 및, 상기 회수된 시료액을 다시 상기 지지체 상으로 공급하여 통과시키는 제3 단계를 포함하여, 제1 단계 내지 제3 단계가 연속적으로 반복 수행되면서 동일 시료액이 상기 지지체 상으로 반복 통과되는 순환 흐름을 형성하면서 상기 지지체 상에 병원균이 결합되도록 하는 순환흐름 단계; 및상기 지지체 상에 결합된 병원균을 염색시킨 상기 형광 물질을 형광 현미경으로 검출하는 검출 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 방법
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제16항에 있어서,상기 지지체 상에 결합된 병원균을 제거하여 상기 지지체를 재생할 수 있도록, 세척 용액을 상기 지지체 상으로 통과시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 방법
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제17항에 있어서,상기 세척 용액을 통과시키는 방향은 상기 시료액을 통과시키는 방향과 반대인 것을 특징으로 하는 병원균 검출 방법
19 19
제17항에 있어서,상기 세척 용액을 통과시키는 단계 후에, 형광 물질로 염색시킨 새로운 병원균을 포함하는 새로운 시료액을 상기 재생된 지지체 상으로 통과시키는 단계; 및상기 통과된 새로운 시료액을 순환 공급하여 상기 재생된 지지체 상으로 반복 통과시키는 단계;를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 병원균 검출 방법
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 미래창조과학부 한국과학기술연구원 공공복지안전연구사업 환경위해 및 생화학테러 물질의 광검출 기술의 소형화 원천 기술 개발