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하기의 단계를 포함하는, PELO (pelota mRNA surveillance and ribosome rescue factor) 유전자가 결손된 뇌 노화성 질환 뇌세포 모델의 제조방법:(a) PELO 유전자를 표적하는 가이드 RNA (sgRNA) 및 Cas9 단백질 발현용 벡터를 제작하는 단계;(b) 인간유도만능줄기세포에 상기 벡터를 도입하고 배양하는 단계; 및(c) 상기 배양된 세포를 뇌신경세포로 분화시키는 단계
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제1항에 있어서, 상기 뇌 노화성 질환은 알츠하이머병 (alzheimer's disease), 치매, 파킨슨병 (Parkinson's disease), 뇌졸중, 아밀로이드증 (Amyloidosis), 픽 질환 (Pick's disease), 루게릭병 (amyotrophic lateral sclerosis), 헌팅턴병 (Huntington's disease), 크로이츠펠트-야콥 (Creutzfeld-Jakob)병, 급만성 노화, 척수손상 또는 두부손상에 의한 치매증, 건망증, 학습 장애 및 기억력 장애로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (b)에서, 배양된 세포 중 벡터가 도입된 세포만을 분리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 가이드 RNA는 서열번호 1의 염기서열로 이루어진 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 인간 유도만능줄기세포는 건강한 인간의 B세포로부터 유래된 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (b)에서, 도입은 전기천공법, 인산칼슘, DEAE 덱스트란, 미세주입, 양이온성 지질 및 리포좀으로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나의 방법을 통해 이루어지는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (b)에서 배양은 마우스 배아 섬유아세포 (mouse embryonic fibroblast; MEF) 상에서 이루어지는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항에 있어서, 상기 단계 (c)는 하기의 단계를 통해 수행되는 것을 특징으로 하는, 제조방법:(i) 상기 배양된 유도만능줄기세포에 TetO 유전자에 의해 Ngn2 발현이 유도되는 벡터를 처리하고 1 내지 3일 동안 배양하는 단계
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제8항에 있어서, 상기 단계 (ⅲ)에서, 세포를 신경세포 배양배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는, 제조방법
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제1항 내지 제9항 중 어느 한 항의 방법에 의해 제조된, PELO (pelota mRNA surveillance and ribosome rescue factor) 유전자가 결손된 뇌 노화성 질환 뇌세포 모델
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하기의 단계를 포함하는, 뇌 노화성 질환 치료물질의 스크리닝 방법:(a) 제10항의 뇌세포 모델에 후보물질을 처리하는 단계; 및(b) 후보물질이 처리된 뇌세포 모델을 무처리 대조군과 비교하여 뇌신경세포에서 뇌 노화성 질환의 병리적 현상의 감소 여부를 확인하는 단계
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제11항에 있어서, 상기 단계 (b)에서 뇌신경세포의 병리적 현상의 감소는 무처리 대조군에 비해 후보물질이 처리된 뇌세포 모델에서 증가된 병인 물질이 감소되는 것을 특징으로 하는, 스크리닝 방법
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