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금나노-펩타이드칩 및 이의 이차이온 질량분석법을 이용한효소 활성 및 효소 활성 저해효과 분석 방법

  • 기술번호 : KST2015042299
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 다양한 지지체 상에 구성된 자기조립 단층막에 금나노입자의 단층막을 형성한 후 상기 금나노입자의 단층막에 펩타이드를 고정시킨 금나노-펩타이드칩에 관한 것이다. 상기 금나노-펩타이드칩에서 금나노입자는 펩타이드의 이차이온 질량 신호를 효과적으로 증폭시킬 수 있으므로, 펩타이드의 질량을 간단하고 정확하게 측정하는 것이 가능하다. 또한, 본 발명의 금나노-펩타이드칩과 이차이온 질량분석을 이용하여 효소의 활성 및 효소활성에 대한 저해제의 저해도를 효과적으로 측정할 수 있다.본 발명에 의하면, 세포 내 다양한 효소 활성을 빠르고 정확하게 분석할 수 있으므로 신호전달 및 상호작용 기전의 규명을 통하여 질병진단 및 신약개발에 중요한 방법을 제공할 수 있다.금나노입자, 이차이온 질량분석, 신호증폭, 펩타이드칩, 효소 활성, 저해제 효과, 자기조립 단층막, 마이크로 패터닝, 이미징
Int. CL C12Q 1/00 (2011.01) B82Y 5/00 (2011.01) C12Q 1/34 (2011.01)
CPC G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01)
출원번호/일자 1020060018603 (2006.02.27)
출원인 한국과학기술원, 한국표준과학연구원
등록번호/일자 10-0740891-0000 (2007.07.12)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20070719) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.02.27)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
2 한국표준과학연구원 대한민국 대전 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김학성 대한민국 대전 유성구
2 김영필 대한민국 대전 서구
3 오은규 대한민국 대전 유성구
4 홍미영 대한민국 대전 유성구
5 이도훈 대한민국 서울 서초구
6 이태걸 대한민국 대전 유성구
7 문대원 대한민국 대전 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 김원준 대한민국 대전광역시 서구 둔산대로***번길 **, 골드벤처타워***호 타임국제특허법률사무소 (만년동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전 유성구
2 한국표준과학연구원 대한민국 대전 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application
2006.02.27 수리 (Accepted) 1-1-2006-0139781-54
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2006.09.11 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2006.10.16 수리 (Accepted) 9-1-2006-0067292-71
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2006.12.08 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2006-0733609-33
5 지정기간연장신청서
Request for Extension of Designated Period
2007.02.07 수리 (Accepted) 1-1-2007-0113222-91
6 의견서
Written Opinion
2007.03.06 수리 (Accepted) 1-1-2007-0184494-34
7 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.
2007.03.06 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0184513-14
8 등록결정서
Decision to grant
2007.07.09 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0375433-31
9 출원인정보변경(경정)신고서
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2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
10 출원인정보변경(경정)신고서
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2014.01.09 수리 (Accepted) 4-1-2014-5004381-25
11 출원인정보변경(경정)신고서
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2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
13 출원인정보변경(경정)신고서
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2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
14 출원인정보변경(경정)신고서
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2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266640-72
15 출원인정보변경(경정)신고서
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2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266627-88
16 출원인정보변경(경정)신고서
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2018.12.27 수리 (Accepted) 4-1-2018-5266645-00
17 출원인정보변경(경정)신고서
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2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
18 출원인정보변경(경정)신고서
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2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
19 출원인정보변경(경정)신고서
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2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
(A) 유리, 실리콘, 금속, 반도체 및 플라스틱으로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 지지체;(B) 상기 지지체의 표면에 구성된 자기조립 단층막;(C) 상기 자기조립 단층막의 말단기와 금나노입자의 표면 작용기의 결합에 의해 자기조립 단층막 위에 형성된 금나노입자의 단층막; 및(D) 상기 금나노입자에 의해 고정된 펩타이드;로 이루어진 것을 특징으로 하는 금나노-펩타이드칩
2 2
제 1 항에 있어서,상기 자기조립 단층막의 말단기는 아민, 티올, 카르복실기, 알데하이드, 에폭시, 말레이마이드로 구성된 군에서 선택된 하나 또는 하나 이상의 작용기인 것을 특징으로 하는 금나노-펩타이드칩
3 3
제 1 항에 있어서,상기 금 나노입자는 시트레이트(citrate)로 표면을 수식화한 것을 특징으로 하는 금나노-펩타이드 칩
4 4
제 1 항 내지 제 3 항의 어느 한 항에 있어서,상기 금나노입자의 단층막에서 금나노입자간의 빈 공간은 에틸렌글리콜 아민, 에틸렌글리콜 티올, N-hydroxysuccinimide(NHS)-(폴리)에틸렌글리콜, maleimide-에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜 아민, 폴리에틸렌글리콜 티올, NHS-폴리에틸렌글리콜 및 maleimide-폴리에틸렌글리콜로 이루어진 군에서 선택된 하나 또는 하나 이상의 화합물에 의해 충진된 것을 특징으로 하는 금나노-펩타이드칩
5 5
제 1 항에 의한 금나노-펩타이드칩을 사용하여 이차이온 질량분석에 의해 펩타이드의 질량을 측정하는 것을 특징으로 하는 펩타이드의 질량 측정 방법
6 6
제 5 항에 있어서,이차이온 발생을 위해 사용되는 일차이온 소스로서 As, Ga, Au, Bi, C60 이온 소스군에서 선택된 하나의 이온 소스를 사용하는 것을 특징으로 하는 펩타이드의 질량측정 방법
7 7
(1) 이차이온 질량 분석에 의해 제 1 항에 의한 금나노-펩타이드칩에서 펩타이드의 질량을 측정하는 단계;(2) 상기 금나노-펩타이드칩과 활성을 측정하고자하는 효소를 반응시키는 단계;(3) 상기 반응이 완료된 금나노-펩타이드 칩에서 펩타이드의 질량을 측정하는 단계; 및(4) 상기 (1)단계에서 측정된 금나노-펩타이드의 질량과, 상기 (3)단계에서 측정된 펩타이드의 질량의 변화를 측정하여 효소의 활성을 확인하는 단계;로 이루어지는 것을 특징으로 하는 효소 활성 검출 방법
8 8
제 7 항에 있어서,상기 효소는 키나아제, 포스파테아제, 프로티아제, 아세틸라아제, 메틸라아제로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 또는 하나 이상의 효소인 것을 특징으로 하는 효소활성 검출 방법
9 9
제 7 항에 있어서,상기 금나노-펩타이드칩의 펩타이드는 아민말단 또는 카르복실기 말단부분의 아미노산이 시스테인, 글라이신, 라이신, 알라닌, 세린으로 구성된 군에서 선택된 하나의 아미노산인 것을 특징으로 하는 효소활성 검출 방법
10 10
제 7 항에 있어서,상기 금나노-펩타이드칩의 펩타이드는 글라이신 링커를 통해 길이를 확장한 것을 특징으로 하는 효소활성 검출 방법
11 11
(1) 제 1 항에 의한 금나노-펩타이드칩과 효소의 혼합물로 이루어진 대조구와 금나노-펩타이드칩과 효소 및 시험물질의 혼합물로 이루어진 시험구를 각각 반응시키는 단계;(2) 상기 반응이 완료된 대조구와 시험구에의 금나노-펩타이드 칩에서 펩타이드의 질량을 각각 측정하는 단계; 및(3) 상기 (2)단계에서 각각 측정된 대조구와 반응구의 펩타이드의 질량을 비교하여 시험물질의 효소활성에 미치는 영향을 확인하는 단계;로 이루어지는 것을 특징으로 하는 효소활성 저해제의 선별 방법
12 12
제 11 항에 있어서,상기 효소는 키나아제, 포스파테아제, 프로티아제, 아세틸라아제, 메틸라아제로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 또는 하나 이상의 효소인 것을 특징으로 하는 효소활성 검출 방법
13 13
(1) 제 1 항에 의한 금나노-펩타이드칩과 효소 및 시험물질의 혼합물로 이루어진 시험구를 시험물질의 농도를 변화시켜 각각 반응시키는 단계;(2) 효소와 반응 전의 금나노-펩타이드칩과 상기 반응이 완료된 시험물질의 농도별 시험구의 금나노-펩타이드 칩에서 펩타이드의 질량을 각각 측정하는 단계; (3) 상기 (2)단계에서 각각 측정된 시험구에서 효소와 반응전의 펩타이드의 질량과 효소에 의해 변형된 펩타이드의 질량에 해당하는 피크의 비율로부터 계산된 저해도와 저해제의 농도간의 상관관계를 구하는 단계; 및(4) 상기 (3) 단계에서 두 피크의 저해효과가 50%인 지점의 저해제의 농도를 구하는 단계; 로 이루어지는 것을 특징으로 하는 상기 (4)단계에서 구해진 저해제의 농도로 효소활성 저해도를 수치화하는 방법
14 14
제 13 항에 있어서,상기 효소는 키나아제, 포스파테아제, 프로티아제, 아세틸라아제, 메틸라아제로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 또는 하나 이상의 효소인 것을 특징으로 하는 효소활성 저해도를 수치화하는 방법
15 15
(A) 유리, 실리콘, 금속, 반도체 및 플라스틱으로 구성된 군으로부터 선택된 하나의 지지체;(B) 상기 지지체의 표면에 구성된 자기조립 단층막;(C) 상기 자기조립 단층막의 말단기와 금나노입자의 표면 작용기의 결합에 의해 자기조립 단층막 위에 형성된 금나노입자의 단층막; 및(D) 상기 금나노입자에 의해 고정된 펩타이드 기질;로 이루어진 것을 특징으로 하는 효소활성의 고속 탐색용 금나노-펩타이드칩
16 16
제 15 항에 있어서,상기 고정된 펩타이드 기질은 마이크로어레이 또는 미세유로 패터닝에 의하여 어레인 된 것임을 특징으로하는 금나노-펩타이드칩
17 17
제 16 항에 의한 금나노-펩타이드칩을 사용하여 이차이온 질량분석 이미징을 통해 펩타이드의 질량을 측정하는 것을 특징으로 하는 펩타이드의 질량 측정 방법
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US07951572 US 미국 FAMILY
2 US20080076676 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US2008076676 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US7951572 US 미국 DOCDBFAMILY
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