| 1 |
1
(i) 표적 항원에 결합하는 항체 및 첫 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드(barcode)가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합된 표적 항원 검출용인 제1 금속 나노입자; (ii) 표적 항체에 결합하는 항원 및 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합된 표적 항체 검출용인 제2 금속 나노입자; (iii) 상기 첫 번째 또는 두번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드에 각각 혼성화할 수 있는 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브; 및 (iv) 기판을 포함하는 시료 내 항원 및 항체의 동시 검출용 키트로서, 상기 기판은 상기 표적 항원에 결합할 수 있는 제1 검출용 항체 및 상기 표적 항체에 결합할 수 있는 제2 검출용 항체가 코팅된 것이고,상기 키트는,(a) 목적 시료(sample of interest)를 제1 금속 나노입자 및 제2 금속 나노입자와 접촉시키는 단계로, 상기 제1 금속 나노입자는 표적 항원에 결합하는 항체 및 첫 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드(barcode)가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합되어 있는 것이고 상기 제2 금속 나노입자는 표적 항체에 결합하는 항원 및 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합되어 있는 것인 단계; (a-1) 접촉 결과 얻어진 접촉물로부터 제1 및 제2 금속 나노입자를 분리하는 단계;(b) 상기 분리된 제1 및 제2 금속 나노입자를 상기 표적 항원에 결합할 수 있는 제1 검출용 항체 및 상기 표적 항체와 각각 결합할 수 있는 제2 검출용 항체가 코팅된 기판과 반응시키는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 기판에 포획된 복합체와 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브를 혼성화시키는 단계로, 상기 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브는 상기 첫 번째 또는 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드에 각각 혼성화하며; 및(d) 상기 단계 (c)의 복합체 내 제1 및 제2 금속 나노입자 위에서 혼성화되어 형성되는 2종의 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드 분자를 가수분해시켜 상기 프로브-유래된 형광 시그널을 검출하는 단계를 포함하는 시료 내 항원 및 항체의 동시 검출방법에 사용하기 위한 것인 키트
|
| 2 |
2
제1항에 있어서, 상기 제1 및 제2 금속 나노입자에 결합된 항체 및 항원은 각각 바이러스에 대한 항체 및 항원인 것인 키트
|
| 3 |
3
삭제
|
| 4 |
4
제1항에 있어서, 상기 제1 및 제2 금속 나노입자는 금, 백금, 은, 구리 또는 팔라듐 나노입자인 것인 키트
|
| 5 |
5
제1항에 있어서, 상기 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브는 양 말단에 각각 형광물질(fluorophore) 및 퀀처(quencher) 분자로 표지되어 있는 것인 키트
|
| 6 |
6
제1항에 있어서, 상기 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브는 서로 다른 형광을 나타내는 것인 키트
|
| 7 |
7
제1항에 있어서, 상기 시료는 혈액, 혈장, 혈청, 조직, 세포, 타액, 객담, 소변, 림프, 골수액, 타액, 우유, 소변, 분변, 안구액, 정액, 뇌 추출물, 척수액, 관절액, 흉선액, 복수, 양막액 또는 세포 조직액을 포함하는 것인 키트
|
| 8 |
8
제1항에 있어서, 상기 키트는 리보핵산 분해 효소 H(RNase H)를 추가적으로 포함하는 것인 키트
|
| 9 |
9
제1항에 있어서, 상기 키트는 상기 제1 및 제2 금속 나노입자에 결합된 항체 및 항원과 다른 항체 또는 항원 및 세 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합된 금속 나노입자 및 상기 세 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드에 상보적인 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브를 추가적으로 포함하는 경우 3개의 서로 다른 항원 및 항체들을 동시에 동정할 수 있는 것인 키트
|
| 10 |
10
다음의 단계를 포함하는 시료 내 항원 및 항체의 동시 검출방법:(a) 목적 시료(sample of interest)를 제1 금속 나노입자 및 제2 금속 나노입자와 접촉시키는 단계로, 상기 제1 금속 나노입자는 표적 항원에 결합하는 항체 및 첫 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드(barcode)가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합되어 있는 것이고 상기 제2 금속 나노입자는 표적 항체에 결합하는 항원 및 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합되어 있는 것인 단계; (a-1) 접촉 결과 얻어진 접촉물로부터 제1 및 제2 금속 나노입자를 분리하는 단계;(b) 상기 분리된 제1 및 제2 금속 나노입자를 상기 표적 항원에 결합할 수 있는 제1 검출용 항체 및 상기 표적 항체와 각각 결합할 수 있는 제2 검출용 항체가 코팅된 기판과 반응시키는 단계;(c) 상기 단계 (b)의 기판에 포획된 복합체와 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브를 혼성화시키는 단계로, 상기 2종의 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브는 상기 첫 번째 또는 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드에 각각 혼성화하며; 및(d) 상기 단계 (c)의 복합체 내 제1 및 제2 금속 나노입자 위에서 혼성화되어 형성되는 2종의 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드 분자를 가수분해시켜 상기 프로브-유래된 형광 시그널을 검출하는 단계
|
| 11 |
11
삭제
|
| 12 |
12
제10항에 있어서, 상기 기판은 마이크로웰 플레이트인 것인 동시 검출방법
|
| 13 |
13
제10항에 있어서, 상기 (d)단계는 상기 첫 번째 또는 두 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드와 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브 간에 형성된 2종의 이중 가닥 올리고뉴클레오타이드 분자를 상기 금속 나노입자로부터 해리시키는 단계를 추가적으로 포함하는 것인 동시 검출방법
|
| 14 |
14
제13항에 있어서, 상기 해리는 환원제의 처리를 통해 이루어지는 것인 동시 검출방법
|
| 15 |
15
제10항에 있어서, 상기 동시 검출방법은 상기 금속 나노입자에 결합된 항체 및 항원과 다른 항체 또는 항원 및 세 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드가 서로 독립적으로 표면 영역에 결합된 금속 나노입자 및 상기 세 번째 검출성 단일 가닥 올리고뉴클레오타이드 바코드에 상보적인 형광성 올리고뉴클레오타이드 프로브를 추가적으로 포함하는 경우 3개의 서로 다른 항원 및 항체들을 동시에 동정할 수 있는 것인 동시 검출방법
|
| 16 |
16
제10항에 있어서, 상기 표적은 바이러스를 포함하는 것인 동시 검출방법
|
| 17 |
17
제16항에 있어서, 상기 바이러스는 간염 바이러스인 것인 동시 검출방법
|
