1 |
1
형광 단백질로서 dTomato를 기반으로 하는 형광 단백질 전압 센서(fluorescent protein voltage sensor)에 있어서,N-말단으로부터 차례로 전압-감지 도메인, 링커 펩타이드, 및 형광 단백질이 연결되고,상기 링커 펩타이드는 7개 또는 11개 아미노산으로 구성되고 적어도 하나의 아르니긴(Arg; R)을 포함하는, 형광 단백질 전압 센서
|
2 |
2
제1항에 있어서,상기 형광 단백질은 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 dTomato, 또는 상기 dTomato의 159번째 잔기인 라이신(Lys; K)이 아르기닌(Arg; R)으로 치환된, 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는, 변이체(K159R); 또는 161번째 잔기인 글루탐산(Glu; E)이 아스파르트산(Asp; D)으로 치환된, 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는, 변이체(E161D);인 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
3 |
3
삭제
|
4 |
4
제1항에 있어서,상기 7개 아미노산으로 구성된 링커 펩타이드는 N-말단으로부터 3번 내지 6번째 자리 중 어느 하나 이상에 아르기닌을 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
5 |
5
제1항에 있어서,상기 11개 아미노산으로 구성된 링커 펩타이드는 N-말단으로부터 2번 또는 3번째 자리에 아르기닌을 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
6 |
6
제1항에 있어서,상기 링커 펩타이드는 서열번호 9 내지 25 중 어느 하나의 아미노산 서열을 갖는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
7 |
7
제1항에 있어서,상기 전압-감지 도메인은 서열번호 49의 아미노산 서열로 이루어지는 S1 막관통 분절, 서열번호 50 또는 53의 아미노산 서열로 이루어지는 S2 막관통 분절, 서열번호 51의 아미노산 서열로 이루어지는 S3 막관통 분절, 및 서열번호 52 또는 54의 아미노산 서열로 이루어지는 S4 막관통 분절을 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
8 |
8
제1항에 있어서,상기 전압-감지 도메인은 서열번호 49의 아미노산 서열로 이루어지는 S1 막관통 분절, 서열번호 50의 아미노산 서열로 이루어지는 S2 막관통 분절, 서열번호 51의 아미노산 서열로 이루어지는 S3 막관통 분절, 및 서열번호 52의 아미노산 서열로 이루어지는 S4 막관통 분절; 또는 서열번호 49의 아미노산 서열로 이루어지는 S1 막관통 분절, 서열번호 53의 아미노산 서열로 이루어지는 S2 막관통 분절, 서열번호 51의 아미노산 서열로 이루어지는 S3 막관통 분절, 및 서열번호 54의 아미노산 서열로 이루어지는 S4 막관통 분절;을 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
9 |
9
제1항에 있어서,상기 전압-감지 도메인은 서열번호 55의 시오나 인테스티날리스(Ciona intestinalis)의 전압-민감성 인산화효소 유래 전압-감지 도메인(CC1-VSD); 또는 상기 서열번호 55의 전압-감지 도메인의 N-말단으로부터 C-말단 방향으로, S2 분절에 위치한 154번째 잔기인 알라닌(Ala; A)이 아스파르트산(Asp; D)으로, S4 분절에 위치한 217번째 잔기인 아르기닌(Arg; R)이 글루타민(Gln; Q)으로, 229번째 잔기인 아르기닌(Arg; R)이 이소루신(Ile; I)으로 치환된 서열번호 56의 변이체;인 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
10 |
10
제1항에 있어서,상기 전압-감지 도메인은 S1 분절의 N-말단, S1-S2 분절 사이, S2-S3 분절 사이 및 S3-S4 분절 사이에 위치하는 루프 서열을 추가로 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
11 |
11
제10항에 있어서,상기 루프 영역에 아미노산 치환, 결실, 또는 추가로 도입된 제한효소 인식부위를 포함하는 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
12 |
12
제11항에 있어서,상기 제한효소 인식부위는 BamHI, NheI, ClaI, Hind III, KpnI, 및 Eco RV로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 제한효소 인식부위인 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
13 |
13
제1항에 있어서,상기 형광 단백질 전압 센서는, 서열번호 57 또는 58의 아미노산 서열로 이루어지는 융합 단백질, 또는 서열번호 59 또는 60의 염기서열에 의해 암호화되는 융합 단백질인 것인, 형광 단백질 전압 센서
|
14 |
14
제1항, 제2항, 및 제4항 내지 제13항 중 어느 한 항의 형광 단백질 전압 센서를 포함하는 신경세포의 막전위 측정용 조성물
|