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ＨＩＦ-１α Ｃ-말단 펩타이드와 ＣＢＰ 또는 ｐ３００단백질과의 결합을 정량분석하는 방법 및 상기 방법을이용한 단백질 복합체 형성을 저해하는 억제제의 스크리닝방법

  • 기술번호 : KST2014051238
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 형광편광을 이용한 HIF-1α(alpha) C-말단 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질간의 결합을 정량적으로 분석하는 방법 및 상기 분석방법을 이용하여 HIF-1α 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질 결합 억제제를 스크리닝하는 방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로 형광물질을 부착한 형광 프로브인 HIF-1α C-말단 펩타이드를 제조한 후, 형광표지된 상기 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질과의 결합양상을 형광편광 값으로 측정함으로써 결합체의 형성을 정량적으로 분석하는 방법에 관한 것이다.　 본 발명에 의한 분석방법은 복합체를 따로 분리하지 않는 단일화 과정 및 웰 플레이트를 이용한 자동화가 가능하여 분석비용을 절감할 수 있기 때문에, HIF-1α 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질의 복합체 형성을 저해하는 억제제를 대량으로 스크리닝하거나 또는 HIF-1α의 단백질합성 후 변형(post-translational modification)의 효능을 분석하는데 유용하게 사용될 수 있다. 형광편광, HIF-1α C-말단 펩타이드, CBP 또는 p300, 단백질합성 후 변형(post-translational modification)
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
CPC G01N 33/533(2013.01) G01N 33/533(2013.01) G01N 33/533(2013.01) G01N 33/533(2013.01) G01N 33/533(2013.01)
출원번호/일자 1020060099389 (2006.10.12)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자 10-0860060-0000 (2008.09.18)
공개번호/일자 10-2008-0033643 (2008.04.17) 문서열기
공고번호/일자 (20080924) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.10.12)
심사청구항수 7

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 양은경 대한민국 서울특별시 서초구
2 안대로 대한민국 전북 전주시 덕진구
3 조현주 대한민국 경남 사천시

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 유미특허법인 대한민국 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 서림빌딩 **층 (역삼동)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2006.10.12 수리 (Accepted) 1-1-2006-0737705-65
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2007.06.07 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2007.07.12 수리 (Accepted) 9-1-2007-0040737-55
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2007.09.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0512582-51
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2007.11.21 수리 (Accepted) 1-1-2007-0837136-43
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2007.11.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0837137-99
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2008.03.03 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0120663-57
8 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2008.04.30 수리 (Accepted) 1-1-2008-0310859-19
9 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2008.04.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2008-0310860-55
10 등록결정서
Decision to grant		 2008.09.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2008-0479076-85
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2009.12.15 수리 (Accepted) 4-1-2009-5247056-16
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
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번호 청구항
1 1
삭제
2 2
1) HIF-1 (hypoxia inducible factor-1) α C-말단 펩타이드에 형광물질을 부착하여 형광 프로브를 제조하는 단계;2) 형광표지된 상기 HIF-1α C-말단 펩타이드를 CBP (cAMP-response element-binding protein) 또는 p300 단백질과 접촉시켜 상기 HIF-1α C-말단 펩타이드에 부착된 형광물질과 CBP 또는 p300 단백질을 반응시키는 단계 및3) 상기 반응물의 형광편광을 측정한 후, 형광 프로브 자체의 형광편광 값과 비교하여 형광편광 값의 변화를 분석하는 단계를 포함하는 HIF-1α C-말단 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질의 결합을 정량분석하는 방법으로서,상기 단계 1)의 형광 프로브는 서열번호 3 또는 서열번호 4인 아미노산 서열을 가지고; 상기 아미노산 서열의 N-말단에는 아미노카프로산 링커(aminocaproic acid linker)가 연결되며; 그 끝에는 FITC (fluorescein isothiocyanate)가 표지된 것인, 정량분석 방법
3 3
삭제
4 4
제2항에 있어서, 단계 2)의 CBP 단백질은 서열번호 1인 아미노산 서열을 갖는 것인, 방법
5 5
제2항에 있어서, 단계 2)의 p300 단백질은 서열번호 2인 아미노산 서열을 갖는 것인, 방법
6 6
제2항에 있어서, 단계 2)의 반응은 형광표지된 HIF-1α C-말단 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질의 함량을 1:2 내지 1:10의 비율로 혼합하여 유도하는 것인, 방법
7 7
삭제
8 8
1) 형광물질이 부착된 형광 프로브인 HIF-1 (hypoxia inducible factor-1) α C-말단 펩타이드와 CBP (cAMP-response element-binding protein) 또는 p300 단백질을 혼합하여 반응시킨 후, 형광편광 값을 측정하는 단계;2) 상기 혼합물에 저해제 후보물질을 첨가시킨 후, 형광편광 값을 측정하는 단계 및3) 상기 단계 1) 및 2)에서 측정된 형광편광 값을 비교하여 단계 2)의 값이 작을 경우, 상기 후보물질을 HIF-1α-CBP 또는 HIF-1α-p300 복합체 형성 저해제로 판정하는 단계를 포함하는 HIF-1α C-말단 펩타이드와 CBP 또는 p300 단백질 결합 억제제의 스크리닝 방법으로서,상기 단계 1)의 형광 프로브는 서열번호 3 또는 서열번호 4인 아미노산 서열을 가지고; 상기 아미노산 서열의 N-말단에는 아미노카프로산 링커(aminocaproic acid linker)가 연결되며; 그 끝에는 FITC (fluorescein isothiocyanate)가 표지된 것인, 결합 억제제의 스크리닝 방법
9 9
삭제
10 10
제8항에 있어서, 단계 1)의 CBP 단백질은 서열번호 1인 아미노산 서열을 갖는 것인, 결합 억제제의 스크리닝 방법
11 11
제8항에 있어서, 단계 1)의 p300 단백질은 서열번호 2인 아미노산 서열을 갖는 것인, 결합 억제제의 스크리닝 방법
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1 JP20096423 JP 일본 FAMILY
2 US07816094 US 미국 FAMILY
3 US20090029390 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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1 JP2008096423 JP 일본 DOCDBFAMILY
2 US2009029390 US 미국 DOCDBFAMILY
3 US7816094 US 미국 DOCDBFAMILY
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