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형광공명에너지전이에 의한 막 단백질 수용체와 리간드 단백질 간의 상호작용을 검색하는 세포영상화 방법

  • 기술번호 : KST2015121485
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 형광공명에너지전이(fluorescence resonance energy transfer, FRET) 시스템을 이용하여 막 단백질 수용체와 리간드 단백질 간의 상호작용(결합도)을 세포 영상으로 측정하는 방법으로, 보다 구체적으로는, 공여체(donor)로서 청색 형광 단백질(cyan fluorescence protein, CFP)이 부착된 리간드(ligand) 단백질과 수용체(acceptor)로서 황색 형광 단백질(yellow fluorescence protein, YFP)이 부착된 막 단백질 수용체인 저밀도 지질단백질 수용체 관련 단백질 1(low density lipoprotein receptor-related protein 1, LRP1)으로 구성된 FRET 시스템을 이용하여 저밀도 지질단백질 수용체 관련 단백질 1에 결합하는 리간드 단백질을 스크리닝하는 방법에 관한 것이다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01) G01N 21/64 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01)
출원번호/일자 1020100017350 (2010.02.25)
출원인 한국과학기술연구원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2011-0097489 (2011.08.31) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 거절
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.02.25)
심사청구항수 10

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술연구원 대한민국 서울특별시 성북구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 전혜성 대한민국 서울특별시 성북구
2 권오연 대한민국 서울특별시 노원구
3 권익찬 대한민국 서울특별시 노원구
4 김광명 대한민국 서울특별시 구로구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 리앤목특허법인 대한민국 서울 강남구 언주로 **길 **, *층, **층, **층, **층(도곡동, 대림아크로텔)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호, 서류명, 접수/발송일자, 처리상태, 접수/발송일자의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 행정처리 표입니다.
번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.02.25 수리 (Accepted) 1-1-2010-0125433-36
2 [대리인선임]대리인(대표자)에 관한 신고서
[Appointment of Agent] Report on Agent (Representative)		 2011.04.19 수리 (Accepted) 1-1-2011-0290237-54
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2011.05.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2011.06.10 수리 (Accepted) 9-1-2011-0047761-87
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2011.09.19 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2011-0530584-92
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2011.11.21 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2011-0921227-21
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2011.11.21 수리 (Accepted) 1-1-2011-0921225-30
8 거절결정서
Decision to Refuse a Patent		 2012.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0254361-55
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.02.19 수리 (Accepted) 4-1-2014-5022002-69
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
형광공명에너지전이(fluorescence resonance energy transfer, FRET)를 이용하기 위한, 에너지 수용체로서 제 1 형광 단백질이 부착된 서열번호 1번으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 저밀도 지질단백질 수용체 관련 단백질 1(low density lipoprotein receptor-related protein 1, LRP1)을 포함하는 에너지 공여체로서 제 2 형광 단백질이 부착된 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
2 2
제 1항에 있어서, 상기 제 1 및 제 2 형광 단백질은 서로 동일하지 아니하며 각각 녹색 형광 단백질(GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein, EGFP), 적색 형광 단백질(RFP), 증강된 적색 형광 단백질(ERFP), 남색 형광 단백질(BFP), 증강된 남색 형광 단백질(EBFP), 황색 형광 단백질(YFP), 증강된 황색 형광 단백질(EYFP), 청색 형광 단백질(CFP) 및 증강된 청색 형광 단백질(ECFP)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
3 3
제 1항에 있어서, FRET을 이용하기 위한, 에너지 수용체로서 YFP가 부착된 LRP1을 포함하는 에너지 공여체로서 CFP가 부착된 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
4 4
FRET을 이용하기 위한, 에너지 공여체로서 제 1 형광 단백질이 부착된 서열번호 1번으로 기재되는 아미노산 서열을 갖는 LRP1을 포함하는 에너지 수용체로서 제 2 형광 단백질이 부착된 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
5 5
제 4항에 있어서, 상기 제 1 및 제 2 형광 단백질은 서로 동일하지 아니하며 각각 녹색 형광 단백질(GFP), 변형된 녹색 형광 단백질(modified green fluorescent protein), 증강된 녹색 형광 단백질(enhanced green fluorescent protein, EGFP), 적색 형광 단백질(RFP), 증강된 적색 형광 단백질(ERFP), 남색 형광 단백질(BFP), 증강된 남색 형광 단백질(EBFP), 황색 형광 단백질(YFP), 증강된 황색 형광 단백질(EYFP), 청색 형광 단백질(CFP) 및 증강된 청색 형광 단백질(ECFP)로 이루어지는 군으로부터 선택되는 것을 특징으로하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
6 6
제 4항에 있어서, FRET을 이용하기 위한, 에너지 공여체로서 CFP가 부착된 LRP1을 포함하는 에너지 수용체로서 YFP가 부착된 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물
7 7
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항의 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 조성물을 이용하여 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝 방법
8 8
1) 피검 단백질과 제 1 형광 단백질의 융합단백질을 발현하는 발현 벡터, 및 LRP1과 제 2 형광 단백질의 융합단백질을 발현하는 발현 벡터를 제작하는 단계; 2) 상기 단계 1)의 발현 벡터들을 숙주세포에 함께 형질전환시켜 형질전환체를 제조하는 단계; 및,3) 상기 단계 2)의 형질전환체에서 형광분석법으로 FRET 현상의 유발여부를 관찰하여 LRP1과 FRET 현상을 일으키는 피검 단백질을 LRP1의 리간드 단백질로 판정하는 단계를 포함하는, LRP1의 리간드 단백질을 스크리닝하는 방법
9 9
제 8항에 있어서, 단계 2)의 숙주세포는 HEK293T, COS7, HeLa, CHO, MEF1 및 PEA13 세포로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝 방법
10 10
LRP1과 형광 단백질의 융합단백질을 발현하는 발현 벡터가 형질도입된 동물세포
11 11
제 10항에 있어서, 동물세포는 HEK293T, COS7, HeLa, CHO, MEF1 및 PEA13 세포로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 동물세포
12 12
제 1항의 조성물을 포함하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 키트
13 13
제 4항의 조성물을 포함하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 키트
14 14
제 10항의 동물세포를 포함하는 LRP1의 리간드 단백질 스크리닝용 키트
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
순번, 연구부처, 주관기관, 연구사업, 연구과제의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 국가R&D 연구정보 정보 표입니다.
순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 한국과학재단 한국과학기술연구원 실시간분자영상기술연구사업 특이적 활성 표지자를 이용한 실시간 분자영상화