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신남알데히드 대량 생산을 위한 재조합 대장균

  • 기술번호 : KST2022008711
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 PTS (phosphoenolpyruvate:sugar phosphotransferase system) 및 GalP (D-galactose transporter) 생합성능을 가지는 대장균에서, (i) 카르복시산 환원효소 (carboxylic acid reductase)를 인코딩하는 유전자; 및 (ii) 포스포판테테이닐 전이효소 (phosphopantetheinyl transferase)를 인코딩하는 유전자가 도입되어 있는 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균에 관한 것으로, 본 발명에 따른 재조합 대장균을 이용하는 경우, 환경친화적이면서도 우수한 효율로 신남알데히드 및 페닐알라닌을 생산할 수 있는 효과가 있다.
Int. CL C12N 15/70 (2006.01.01) C12P 7/24 (2006.01.01) C12P 13/06 (2006.01.01) C12N 9/02 (2006.01.01) C12N 9/12 (2006.01.01) C12N 9/88 (2006.01.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12P 7/24(2013.01) C12P 13/06(2013.01) C12N 9/0008(2013.01) C12N 9/1288(2013.01) C12N 9/88(2013.01) C12Y 102/99006(2013.01) C12Y 207/08007(2013.01) C12Y 403/01024(2013.01)
출원번호/일자 1020200176147 (2020.12.16)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2022-0086044 (2022.06.23) 문서열기
공고번호/일자
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 공개
심사진행상태 수리
심판사항
구분 국내출원/신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2020.12.16)
심사청구항수 22

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 정기준 대전광역시 유성구
2 김선창 대전광역시 유성구
3 방현배 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2020.12.16 수리 (Accepted) 1-1-2020-1365887-82
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2021.02.18 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2021.04.15 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-6-2021-0151118-18
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2022.06.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2022-0451220-93
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번호 청구항
1 1
PTS (phosphoenolpyruvate:sugar phosphotransferase system) 및 GalP (D-galactose transporter) 생합성능을 가지는 대장균에, (i) 카르복시산 환원효소 (carboxylic acid reductase)를 인코딩하는 유전자; 및/또는 (ii) 포스포판테테이닐 전이효소 (phosphopantetheinyl transferase)를 인코딩하는 유전자가 도입되어 있는 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
2 2
제1항에 있어서, 상기 카르복시산 환원효소를 인코딩하는 유전자는 마이코박테리움 마리눔(Mycobacterium marinum) 또는 노카디아 이오웬시스(Nocardia iowensis) 유래의 car 유전자인 것을 특징으로 하는 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
3 3
제1항에 있어서, 상기 포스포판테테이닐 전이효소를 인코딩하는 유전자는 바실러스 서틸리스(Bacillus subtilis) 유래의 sfp 유전자 또는 노카디아 이오웬시스(Nocardia iowensis) 유래의 npt 유전자인 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
4 4
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은 (i) crr (glucose-specific enzyme IIA components of PTS), tyrR (DNA-binding transcriptional dual regulator) 및 pykA (pyruvate kinase)로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 유전자가 결실; 및/또는(ii) aroG (3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase) 및/또는 pheA (fused chorismate mutase P and prephenate dehydratase)의 피드백 저항성이 향상되도록 변이; 되어 있는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
5 5
제4항에 있어서, 상기 aroG (3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase)는 aroG8/15로 교체 및/또는 pheA (fused chorismate mutase P and prephenate dehydratase)는 pheAfbr/dm로 교체되어 있고, 상기 교체된 aroG8/15 및/또는 pheAfbr/dm의 프로모터는 강력한 상시 발현 프로모터인 것을 특징으로 하는 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
6 6
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 galP (D-galactose transporter) 및/또는 glk (glucokinase) 유전자의 프로모터가 강력한 상시 발현 프로모터로 교체되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
7 7
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 dkgB(2,5-diketo-D-gluconate reductase B), yahK(oxidoreductase), yeaE(oxidoreductase), yjgB(alcohol dehydrogenase), yqhC(DNA-binding transcriptional regulator), yqhD(alcohol dehydrogenase), dkgA(2,5-diketo-D-gluconate reductase A), gldA(glycerol dehydrogenase), ybbO(oxidoreductase) 및 yqhA(inner membrane protein) 로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 유전자가 추가로 결실되어 있는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
8 8
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 페닐알라닌 암모니아 분해효소 (phenylalanine ammonia lyase)를 인코딩하는 유전자가 추가로 도입되어 있는 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
9 9
제1항에 있어서, 상기 페닐알라닌 암모니아 분해효소를 인코딩하는 유전자는 강력한 상시 발현 프로모터 하에 도입되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
10 10
제1항에 있어서, 상기 페닐알라닌 암모니아 분해효소를 인코딩하는 유전자는 스트렙토미세스 마리티무스(Streptomyces maritimus) 유래의 pal 유전자인 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
11 11
제1항에 있어서, 상기 페닐알라닌 암모니아 분해효소를 인코딩하는 유전자는 대장균에 내재적으로 존재하는 gidB (methyltransferase)와 atpI (ATP synthase) 유전자 사이에 삽입되는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
12 12
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은 마이코박테리움 마리눔 유래의 카르복시산 환원효소를 인코딩하는 유전자 및 노카디아 이오웬시스 유래의 포스포판테테이닐 전이효소를 인코딩하는 유전자가 도입되어 있고, 상기 카르복시산 환원효소를 인코딩하는 유전자 및 포스포판테테이닐 전이효소를 인코딩하는 유전자는 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 aslA (putative anaerobic sulfatase maturation enzyme AslB)와 aslB (putative anaerobic sulfatase maturation enzyme AslB) 유전자 사이에 삽입되는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
13 13
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 pntAB (pyridine nucleotide transhydrogenase α 0026# β및/또는 yfjB (NAD kinase) 유전자의 프로모터가 강력한 상시 발현 프로모터로 교체되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
14 14
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 pta-ackA (phosphate acetyltransferase 0026# acetate kinase A) 및/또는 poxB (pyruvate dehydrogenase) 유전자가 결실되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
15 15
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 coaA (pantothenate kinase) 유전자의 프로모터가 강력한 상시 발현 프로모터로 교체되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
16 16
제1항에 있어서, 상기 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균은, 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 metK (methionine adenosyltransferase) 및/또는 proB (γkinase) 유전자가 추가로 억제되어 있는 것을 특징으로 하는, 신남알데히드 생산성이 향상된 재조합 대장균
17 17
제5항, 제6항, 제9항, 제13항 및 15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 강력한 상시 발현 프로모터는 BBa_J23100, BBa_J23106, M1-46, M1-37 및 bacteriophage λPR로 구성된 군에서 선택되는, 재조합 대장균
18 18
다음 단계를 포함하는 신남알데히드의 생산방법:(a) 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항의 재조합 대장균을 배양하여 신남알데히드를 생성시키는 단계; 및 (b) 상기 생성된 신남알데히드를 회수하는 단계
19 19
PTS (phosphoenolpyruvate:sugar phosphotransferase system) 및 GalP (D-galactose transporter) 생합성능을 가지는 대장균에서, (i) crr (glucose-specific enzyme IIA components of PTS), tyrR (DNA-binding transcriptional dual regulator) 및 pykA (pyruvate kinase)로 구성된 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 유전자가 결실; 및/또는(ii) aroG (3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase) 및/또는 pheA (fused chorismate mutase P and prephenate dehydratase)의 피드백 저항성이 향상되도록 변이;되어 있는, 페닐알라닌 생산성이 향상된 재조합 대장균
20 20
제19항에 있어서, 상기 aroG (3-deoxy-D-arabino-heptulosonate-7-phosphate synthase)는 aroG8/15로 교체 및/또는 pheA (fused chorismate mutase P and prephenate dehydratase)는 pheAfbr/dm로 교체되어 있고, 상기 교체된 aroG8/15 및/또는 pheAfbr/dm의 프로모터는 강력한 상시 발현 프로모터인 것을 특징으로 하는, 페닐알라닌 생산성이 향상된 재조합 대장균
21 21
제20항에 있어서, 상기 페닐알라닌 생산성이 향상된 재조합 대장균은 야생형 대장균에 내재적으로 존재하는 galP (D-galactose transporter) 및/또는 glk (glucokinase) 유전자의 프로모터가 강력한 상시 발현 프로모터로 교체되어 있는 것을 특징으로 하는 페닐알라닌 생산성이 향상된 재조합 대장균
22 22
다음 단계를 포함하는 페닐알라닌의 생산방법:(a) 제19항 내지 제21항 중 어느 한 항의 재조합 대장균을 배양하여 페닐알라닌를 생성시키는 단계; 및 (b) 상기 생성된 페닐알라닌을 회수하는 단계
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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1 과학기술정보통신부 한국과학기술원 글로벌프론티어사업연구개발사업 (지능형 바이오시스템 설계 및 합성 연구) 친환경 선충 퇴치제 고효율 생산 세포공장 개발