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Ｌ­이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물 및 이의 제조방법

  • 기술번호 : KST2015114780
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 L-쓰레오닌 생성능을 가지는 미생물에서, L-이소루신 생합성에 관여하는 효소 중 L-이소루신에 의해 피드백 저해를 받는 효소를 코딩하는 유전자를 변이시켜 L-이소루신에 의한 피드백저해를 제거하고, 상기 피드백 저해가 제거된 효소를 코딩하는 유전자 및 L-이소루신 생합성에 관련된 효소들을 코딩하는 유전자들을 추가로 도입시키는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물에 관한 것이다.본 발명에 따르면, L-이소루신 생성능이 낮은 균주를 이용하여 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물을 제조할 수 있으며, 본 발명에 따른 변이미생물을 이용하면 산업적으로 유용한 L-이소루신을 고효율로 생산할 수 있다.
Int. CL C12N 1/21 (2006.01) C12P 13/06 (2006.01) C12R 1/19 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01)
CPC C12N 15/70(2013.01) C12N 15/70(2013.01)
출원번호/일자 1020100118288 (2010.11.25)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-1270149-0000 (2013.05.27)
공개번호/일자 10-2011-0058731 (2011.06.01) 문서열기
공고번호/일자 (20130604) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보 대한민국  |   1020090114252   |   2009.11.25
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.11.25)
심사청구항수 33

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상엽 대한민국 대전광역시 유성구
2 오재은 대한민국 서울특별시 강서구
3 박진환 대한민국 대전광역시 유성구
4 이광호 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.11.25 수리 (Accepted) 1-1-2010-0773049-83
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.02.16 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.03.15 수리 (Accepted) 9-1-2012-0017096-19
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2012.09.28 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0586081-18
5 [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서
[Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief)		 2012.11.27 수리 (Accepted) 1-1-2012-0980227-83
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2012.12.28 수리 (Accepted) 1-1-2012-1093087-49
7 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2012.12.28 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-1093088-95
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
9 등록결정서
Decision to grant		 2013.05.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0345583-20
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
L-쓰레오닌 생성능을 가지는 박테리아에서, 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 또는 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)를 변이시켜 L-이소루신에 의한 피드백 저해를 제거하고, 피드백 저해가 제거된 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 및 피드백 저해가 제거된 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III을 코딩하는 유전자(ilvIH)로 구성된 군에서 선택되는 유전자를 하나 이상 도입시키는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
2 2
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3 3
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4 4
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5 5
제1항에 있어서, 상기 박테리아는 코리네박테리움(Corynebacterium) 속, 브레비박테리움(Brevibacterium) 속 및 대장균으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
6 6
제5항에 있어서, 상기 박테리아는 대장균인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA)의 변이는 ilvA 유전자의 1339번째 염기 C, 1341번째 염기 G, 1351번째 염기 C, 1352번째 염기 T를 각각 다른 염기로 치환한 것임을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
8 8
제1항에 있어서, 상기 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)의 변이는 ilvIH 오페론에서, ilvH 유전자의 41번째 염기 G 및 50번째 염기 C를 각각 다른 염기로 치환한 것임을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
9 9
제1항에 있어서, 상기 피드백 저해가 제거된 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 및 피드백 저해가 제거된 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III을 코딩하는 유전자(ilvIH)로 구성된 군에서 선택되는 유전자를 하나 이상 도입하는 것은 강한 프로모터(strong promoter)를 함유하는 발현벡터 형태로 도입하는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
10 10
삭제
11 11
제1항에 있어서, 상기 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)는 ilvH(acetohydroxy acid synthase isozyme III small subunit) 유전자 및 ilvI(acetohydroxy acid synthase isozyme III large subunit) 유전자로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
12 12
제1항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporter) 유전자를 추가로 증폭 또는 도입시키는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
13 13
제1항에 있어서, 아세토하이드록시산 이소머로리덕타아제를 코딩하는 유전자, 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자 및 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제로 구성된 군에서 선택되는 유전자를 추가로 도입하는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
14 14
제13항에 있어서, 아세토하이드록시산 이소머로리덕타아제를 코딩하는 유전자는 ilvC 유전자이고, 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자는 ilvD 유전자이며, 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제를 코딩하는 유전자는 ilvE 유전자인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
15 15
제13항에 있어서, 상기 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자 및 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제를 코딩하는 유전자는 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자와 오페론 형태로 도입되며, 상기 오페론의 프로모터를 강한 프로모터(strong promoter)로 치환하는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
16 16
제15항에 있어서, 상기 오페론은 ilvEDA오페론이고, 상기 강한 프로모터(strong promoter)는 trc promoter, tac promoter, T7 promoter, lac promoter 및 trp promoter로 구성된 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
17 17
제12항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporter) 유전자는 ygaZH인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
18 18
제17항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporer)를 코딩하는 유전자의 프로모터를 강한 프로모터(strong promoter)로 치환하는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
19 19
제1항에 있어서, 광역조절인자(global regulator)인 lrp 유전자의 프로모터를 강한 프로모터(strong promoter)로 치환하는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
20 20
제18항에 있어서, 상기 강한 프로모터(strong promoter)는 trc promoter, tac promoter, T7 promoter, lac promoter 및 trp promoter로 구성된 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아의 제조방법
21 21
L-쓰레오닌 생성능을 가지는 박테리아에서, 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 또는 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)가 변이되어 L-이소루신에 의한 피드백 저해가 제거되고, 피드백 저해가 제거된 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 및 피드백 저해가 제거된 아세토하이드록시산 합성효소 이소자임 III을 코딩하는 유전자(ilvIH)로 구성된 군에서 선택되는 유전자가 하나 이상 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
22 22
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23 23
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24 24
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25 25
제21항에 있어서, 상기 박테리아는 코리네박테리움(Corynebacterium) 속, 브레비박테리움(Brevibacterium) 속 및 대장균으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
26 26
제25에 있어서, 상기 박테리아는 대장균인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
27 27
제21항에 있어서, 상기 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA)의 변이는 ilvA 유전자의 1339번째 염기 C, 1341번째 염기 G, 1351번째 염기 C, 1352번째 염기 T가 각각 다른 염기로 치환된 것임을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
28 28
제21항에 있어서, 상기 아세토하이드록시산 합성효소 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)의 변이는 ilvIH 오페론에서, ilvH 유전자의 41번째 염기 G 및 50번째 염기 C가 각각 다른 염기로 치환된 것임을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
29 29
제21항에 있어서, 상기 피드백 저해가 제거된 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자(ilvA) 및 피드백 저해가 제거된 아세토하이드록시산 합성효소 III을 코딩하는 유전자(ilvIH)로 구성된 군에서 선택되는 유전자가 하나 이상 도입되어 있는 것은 강한 프로모터(strong promoter)를 함유하는 발현벡터 형태로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
30 30
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31 31
제21항에 있어서, 상기 아세토하이드록시산 합성효소 III를 코딩하는 유전자(ilvIH)는 ilvH(acetohydroxy acid synthase isozyme III small subunit) 유전자 및 ilvI(acetohydroxy acid synthase isozyme III large subunit) 유전자로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
32 32
제21항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporter) 유전자가 추가로 증폭 또는 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
33 33
제21항에 있어서, 아세토하이드록시산 이소머로리덕타아제를 코딩하는 유전자, 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자 및 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제로 구성된 군에서 선택되는 유전자가 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
34 34
제33항에 있어서, 아세토하이드록시산 이소머로리덕타아제를 코딩하는 유전자는 ilvC 유전자이고, 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자는 ilvD 유전자이며, 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제를 코딩하는 유전자는 ilvE 유전자인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
35 35
제33항에 있어서, 상기 디하이드록시산 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자 및 분지쇄 아미노산 아미노트랜스퍼라아제를 코딩하는 유전자는 쓰레오닌 디하이드라타아제를 코딩하는 유전자와 오페론 형태로 도입되어 있으며, 상기 오페론의 프로모터가 강한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
36 36
제35항에 있어서, 상기 오페론은 ilvEDA오페론이고, 상기 강한 프로모터(strong promoter)는 trc promoter, tac promoter, T7 promoter, lac promoter 및 trp promoter로 구성된 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
37 37
제32항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporter) 유전자는 ygaZH인 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
38 38
제37항에 있어서, L-이소루신의 엑스포터(exporer)를 코딩하는 유전자의 프로모터가 강한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
39 39
제21항에 있어서, 광역조절인자(global regulator)인 lrp 유전자의 프로모터가 강한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있는 것을 특징으로 하는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이 박테리아
40 40
대장균 W3110균주(ATCC 39936)의 지노믹 DNA에서 lysA, metA, tdh 및 iclR이 결실되어 있어 있고, thrA, lysC의 피드백 저해가 제거되어있고, ppc 유전자 및 thrABC 오페론의 프로모터가 각각 tac 및 trc 프로모터로 교체되어 있는 L-쓰레오닌 고생성능을 가지는 대장균 TH20 균주에서, 대장균 W3110균주(ATCC 39936)의 ilvA 유전자의 1339번째 염기 C, 1341번째 염기 G, 1351번째 염기 C, 1352번째 염기 T가 각각 T, T, G 및 C로 치환된 변이유전자가 상동재조합으로 삽입되어 있고;대장균 W3110균주(ATCC 39936)의 ilvH 유전자의 41번째 염기 G 및 50번째 염기 C가 각각 A 및 T로 치환된 변이유전자가 벡터로 형질전환되어 있으며;상기 ilvA 변이 유전자를 함유하는 벡터로 형질전환되어 있고;thrABC 오페론 및 ygaZH 유전자를 함유하는 벡터로 형질전환되어 있고;ilvC 유전자의 프로모터가 강한 프로모터(strong promoter)로 삽입되어 있고;ilvE, ilvD, ilvA(피드백 저해가 제거된 쓰레오닌 디하이드라타아제 코딩) 유전자가 포함된 ilvEDA 오페론의 프로모터가 강한 프로모터(strong promoter)로 치환되어 있는 L-이소루신 고생성능을 가지는 변이미생물
41 41
제21항, 제25항 내지 제29항, 제31항 내지 제39항중 어느 한 항의 변이 박테리아를 배양하는 단계; 및 상기 변이 박테리아의 배양액으로 부터 L-이소루신을 회수하는 단계를 포함하는 L-이소루신의 제조방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.