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프롤린 수산화반응에 의한 ＨＩＦ―1 펩타이드와 ＶＢＣ단백질과의 상호작용을 형광편광도를 이용하여 정량적으로분석하는 방법
- 기술번호 : KST2014051240
- 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
- 전화번호 : 02-2155-3662
| 요약 | 본 발명은 형광편광도를 이용하여 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 상호작용을 분석하는 방법에 관한 것으로서, 구체적으로 1) 형광물질이 부착된 하이드록시프롤린(hydroxyproline)기를 포함하는 HIF-1 펩타이드에 형광물질을 부착하여 형광 프로브를 제조하는 단계; 2) 상기 형광 프로브를 VBC 단백질과 반응시키는 단계; 3) 상기 반응물의 형광편광도를 측정한 후 형광 프로브 자체의 형광편광도와 비교하여 형광편광도의 변화를 관찰함으로써 HIF-1-VBC 단백질 결합체의 형성을 정량적으로 분석하는 방법; 상기 방법을 이용하여 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 결합을 방해하는 물질을 검색하는 방법; 및 상기 방법을 이용하여 프롤릴 하이드록실라제(prolyl hydroxylase)의 활성을 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 분석방법은 결합유무에 따른 형광편광도의 변화로 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 상호작용을 간단히 분석할 수 있어 웰 플레이트를 이용한 초고속 검색에 효과적으로 적용될 수 있다. |
|---|---|
| Int. CL | G01N 33/68 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01) |
| CPC | G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) G01N 33/6845(2013.01) |
| 출원번호/일자 | 1020050066881 (2005.07.22) |
| 출원인 | 한국과학기술연구원 |
| 등록번호/일자 | 10-0859506-0000 (2008.09.16) |
| 공개번호/일자 | 10-2007-0012063 (2007.01.25) 문서열기 |
| 공고번호/일자 | (20080922) 문서열기 |
| 국제출원번호/일자 | |
| 국제공개번호/일자 | |
| 우선권정보 | |
| 법적상태 | 소멸 |
| 심사진행상태 | 수리 |
| 심판사항 | |
| 구분 | |
| 원출원번호/일자 | |
| 관련 출원번호 | |
| 심사청구여부/일자 | Y (2005.07.22) |
| 심사청구항수 | 7 |
출원인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술연구원 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
발명자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 양은경 | 대한민국 | 서울 서초구 |
| 2 | 조현주 | 대한민국 | 경남 사천시 |
| 3 | 박현성 | 대한민국 | 경기 성남시 분당구 |
대리인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이원희 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동) |
최종권리자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술연구원 | 대한민국 | 서울특별시 성북구 |
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 특허출원서 Patent Application |
2005.07.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2005-0400718-10 |
| 2 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2006.04.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 3 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2006.05.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-2006-0028683-61 |
| 4 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2006.06.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0371599-73 |
| 5 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2006.08.25 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0611762-36 |
| 6 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2006.09.25 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0693179-27 |
| 7 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2006.10.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0776612-76 |
| 8 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2006.11.28 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0877082-68 |
| 9 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2006.12.27 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0967861-52 |
| 10 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2007.01.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0084543-61 |
| 11 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2007.02.27 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0168414-27 |
| 12 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2007.04.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0253818-31 |
| 13 | 지정기간연장신청서 Request for Extension of Designated Period |
2007.04.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0324471-35 |
| 14 | 의견서 Written Opinion |
2007.05.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0398789-16 |
| 15 | 명세서등보정서 Amendment to Description, etc. |
2007.05.30 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2007-0398788-60 |
| 16 | 최후의견제출통지서 Notification of reason for final refusal |
2007.09.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0529301-36 |
| 17 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2007.11.06 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2007-0795797-27 |
| 18 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2007.11.06 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0795798-73 |
| 19 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2008.03.12 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2008-0137087-55 |
| 20 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2008.05.13 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2008-0337020-07 |
| 21 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2008.05.13 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0337022-98 |
| 22 | 등록결정서 Decision to grant |
2008.09.12 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2008-0477768-14 |
| 23 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2009.12.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2009-5247056-16 |
| 24 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.02.19 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5022002-69 |
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 |
1 1) 서열번호: 3 또는 4로 기재되는 아미노산 서열을 가지며 플루오레신 이소티오시아네이트(이하, FITC)가 HIF(Hypoxia-inducible factor)-1 펩타이드에 부착된 형광 프로브를 제조하는 단계; 2) 상기 형광 프로브를 인간 폰 히펠-린다우 단백질(Human von Hippel-Lindau protein(NM000551))과 엘론긴 B(Elongin B)(NM007108) 및 엘론긴 C(Elongin C)(NM005648) 복합체(이하 VBC라 함) 단백질과 반응시키는 단계; 및3) 상기 반응물의 형광편광도를 측정한 후 형광 프로브 자체의 형광편광도와 비교하여 형광편광도의 변화를 관찰하는 단계를 포함하는, 프롤린 수산화반응에 따른 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 상호작용을 형광편광도를 이용하여 정량적으로 분석하는 방법 |
| 2 |
2 제 1항에 있어서, 단계 1)에서 형광 프로브는 HIF-1 단백질의 아미노산 서열(GenBank 등재번호 : U22431) 중에서 VBC 단백질에 결합하는 것으로 알려진 부위인 아미노산 서열중 556 내지 575번째 아미노산 부위(서열번호: 1) 또는 390 내지 417번째 아미노산 부위(서열번호: 2)로 구성되는 HIF-1 펩타이드를 합성하고, 합성된 펩타이드의 N-말단에 아미노카프로산 링커(aminocaproic acid linker)를 붙이고, 그 끝에 FITC를 표지시킨 후 특정 프롤린 잔기를 수화시켜 제조되는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 3 |
3 제 2항에 있어서, 특정 프롤린 잔기는 야생형 HIF-1의 아미노산 서열 564번과 402번의 프롤린인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 4 |
4 삭제 |
| 5 |
5 제 1항에 있어서, 단계 2)에서는 FITC가 부착된 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질을 완충용액 상에서 25℃에서 1:1 에서 1:14의 비율로 혼합하여 즉시 측정 가능한 것을 특징으로 하는 방법 |
| 6 |
6 제 1항에 있어서, 단계 3)에서 측정된 단계 2) 반응물의 형광편광도가 형광 프로브의 형광편광도보다 증가된 경우에는 형광 프로브와 VBC 단백질이 결합체를 형성한 것으로 판단하는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 7 |
7 1) 서열번호: 3 또는 4로 기재되는 아미노산 서열을 가지며 FITC가 HIF(Hypoxia-inducible factor)-1 펩타이드에 부착된 형광 프로브와 VBC 단백질의 반응용액에 저해제 후보물질을 첨가하여 반응시키는 단계;2) 상기 반응용액의 형광편광도를 측정하여 저해제 후보물질의 첨가여부에 따른 형광편광도의 변화를 관찰하는 단계; 및3) 저해제 후보물질의 첨가에 의해 하이드록시프롤린기를 포함하는 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 반응물의 형광편광도가 감소된 경우에 상기 후보물질을 저해제로 판정하는 단계를 포함하는 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질간의 상호작용을 저해하는 물질을 검색하는 방법 |
| 8 |
8 삭제 |
| 9 |
9 1) 하이드록시프롤린기를 포함하지 않는 서열번호: 1 또는 2로 기재되는 HIF-1 펩타이드에 FITC가 부착된 형광프루브에 프롤릴 하이드록실라제(prolyl hydroxylase)를 처리하는 단계;2) 상기 효소 반응물을 VBC 단백질과 반응시킨 후 형광편광도를 측정하는 단계; 및3) 단계 2)에서 측정된 형광편광도를 하이드록시프롤린기를 포함하는 서열번호: 3 또는 4로 기재되며 FITC가 부착된 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질 결합체의 형광편광도와 비교하는 단계를 포함하는 프롤릴 하이드록실라제의 활성을 분석하는 방법 |
| 10 |
10 삭제 |
| 지정국 정보가 없습니다 |
|---|
| 순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | JP19033430 | JP | 일본 | FAMILY |
| 2 | US07691966 | US | 미국 | FAMILY |
| 3 | US20070020718 | US | 미국 | FAMILY |
DOCDB 패밀리 정보
| 순번 | 패밀리번호 | 국가코드 | 국가명 | 종류 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | JP2007033430 | JP | 일본 | DOCDBFAMILY |
| 2 | US2007020718 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
| 3 | US7691966 | US | 미국 | DOCDBFAMILY |
| 국가 R&D 정보가 없습니다. |
|---|
- 본 등록정보는 참고용으로 법적증빙자료로 사용할 수 없습니다.
- 데이터 이관에 따른 소요기간(1일)으로 인하여 등록원부와 일부 차이가 발생할 수 있으며, 일부 정보(부기, 상세 주소 등)를 제공하지 않고 있습니다.
- 법적증빙자료로 활용하시거나 더 자세한 정보를 보시려면 등록원부를 발급받아 사용하시기 바랍니다.
| 특허 등록번호 | 10-0859506-0000 |
|---|
권리란
| 표시번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
출원 연월일 : 20050722 출원 번호 : 1020050066881 공고 연월일 : 20080922 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20080912 청구범위의 항수 : 7 유별 : G01N 33/68 발명의 명칭 : 프롤린 수산화반응에 의한 ＨＩＦ―1 펩타이드와 ＶＢＣ단백질과의 상호작용을 형광편광도를 이용하여 정량적으로분석하는 방법 존속기간(예정)만료일 : 20130917 |
특허권자란
| 순위번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
(권리자) 한국과학기술연구원 서울특별시 성북구... |
등록료란
| 제 1 - 3 년분 | 금 액 | 190,500 원 | 2008년 09월 17일 | 납입 |
| 제 4 년분 | 금 액 | 194,000 원 | 2011년 09월 01일 | 납입 |
| 제 5 년분 | 금 액 | 194,000 원 | 2012년 09월 10일 | 납입 |
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| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 특허출원서 | 2005.07.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2005-0400718-10 |
| 2 | 선행기술조사의뢰서 | 2006.04.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 3 | 선행기술조사보고서 | 2006.05.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-2006-0028683-61 |
| 4 | 의견제출통지서 | 2006.06.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2006-0371599-73 |
| 5 | 지정기간연장신청서 | 2006.08.25 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0611762-36 |
| 6 | 지정기간연장신청서 | 2006.09.25 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0693179-27 |
| 7 | 지정기간연장신청서 | 2006.10.26 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0776612-76 |
| 8 | 지정기간연장신청서 | 2006.11.28 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0877082-68 |
| 9 | 지정기간연장신청서 | 2006.12.27 | 수리 (Accepted) | 1-1-2006-0967861-52 |
| 10 | 지정기간연장신청서 | 2007.01.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0084543-61 |
| 11 | 지정기간연장신청서 | 2007.02.27 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0168414-27 |
| 12 | 지정기간연장신청서 | 2007.04.02 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0253818-31 |
| 13 | 지정기간연장신청서 | 2007.04.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0324471-35 |
| 14 | 의견서 | 2007.05.30 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0398789-16 |
| 15 | 명세서등보정서 | 2007.05.30 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2007-0398788-60 |
| 16 | 최후의견제출통지서 | 2007.09.28 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2007-0529301-36 |
| 17 | [명세서등 보정]보정서 | 2007.11.06 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2007-0795797-27 |
| 18 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2007.11.06 | 수리 (Accepted) | 1-1-2007-0795798-73 |
| 19 | 의견제출통지서 | 2008.03.12 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2008-0137087-55 |
| 20 | [명세서등 보정]보정서 | 2008.05.13 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2008-0337020-07 |
| 21 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2008.05.13 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0337022-98 |
| 22 | 등록결정서 | 2008.09.12 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2008-0477768-14 |
| 23 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2009.12.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2009-5247056-16 |
| 24 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.02.19 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5022002-69 |
| 기술번호 | KST2014051240 |
|---|---|
| 자료제공기관 | NTB |
| 기술공급기관 | 한국과학기술연구원 |
| 기술명 | 프롤린 수산화반응에 의한 ＨＩＦ―1 펩타이드와 ＶＢＣ단백질과의 상호작용을 형광편광도를 이용하여 정량적으로분석하는 방법 |
| 기술개요 |
본 발명은 형광편광도를 이용하여 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 상호작용을 분석하는 방법에 관한 것으로서, 구체적으로 1) 형광물질이 부착된 하이드록시프롤린(hydroxyproline)기를 포함하는 HIF-1 펩타이드에 형광물질을 부착하여 형광 프로브를 제조하는 단계; 2) 상기 형광 프로브를 VBC 단백질과 반응시키는 단계; 3) 상기 반응물의 형광편광도를 측정한 후 형광 프로브 자체의 형광편광도와 비교하여 형광편광도의 변화를 관찰함으로써 HIF-1-VBC 단백질 결합체의 형성을 정량적으로 분석하는 방법; 상기 방법을 이용하여 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 결합을 방해하는 물질을 검색하는 방법; 및 상기 방법을 이용하여 프롤릴 하이드록실라제(prolyl hydroxylase)의 활성을 분석하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 분석방법은 결합유무에 따른 형광편광도의 변화로 HIF-1 펩타이드와 VBC 단백질의 상호작용을 간단히 분석할 수 있어 웰 플레이트를 이용한 초고속 검색에 효과적으로 적용될 수 있다. |
| 개발상태 | 특허만신청(등록) |
| 기술의 우수성 | |
| 응용분야 | |
| 시장규모 및 동향 | |
| 희망거래유형 | 라이선스 |
| 사업화적용실적 | 없음 |
| 도입시고려사항 | 없음 |
| 과제고유번호 | 1345073180 |
|---|---|
| 세부과제번호 | R01-2007-000-11672-0 |
| 연구과제명 | 저산소에의한히스톤메틸화증가와지질합성억제와의상관성연구 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 서울시립대학교 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200705~201102 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1345085640 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 13-2008-00-014-00 |
| 연구과제명 | 고감도캔틸레버디바이스기반바이오마커검출시스템개발 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술연구원 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200804~200903 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1350005810 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2004-01967 |
| 연구과제명 | 공유결합적변형에의한HIF-1a의활성조절및관련신호전달연구 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 서울시립대학교 |
| 성과제출연도 | 2006 |
| 연구기간 | 200306~200703 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1350008407 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2E18670 |
| 연구과제명 | 마이크로바이오프로세서요소기술개발 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 과학기술부 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술연구원 |
| 성과제출연도 | 2005 |
| 연구기간 | 200501~200512 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1415091912 |
|---|---|
| 세부과제번호 | F0001049-2008-33 |
| 연구과제명 | 고감도캔틸레버디바이스기반바이오마커진단기술개발 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 지식경제부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국산업기술평가원 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술연구원 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200804~201003 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1415092143 |
|---|---|
| 세부과제번호 | INFRA11 |
| 연구과제명 | 특허경비지원 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 지식경제부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국산업기술평가원 |
| 연구주관기관명 | 한국산업기술진흥협회 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200604~201103 |
| 기여율 | 0.16666667 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | 기타 |
특허성과
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