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목적 단백질의 정제용 폴리펩타이드 및 이의 용도(Polypeptide for purification of target protein and use thereof)
- 기술번호 : KST2016012629
- 담당센터 : 대전기술혁신센터
- 전화번호 : 042-610-2279
| 요약 | 본 발명은 슈도모나스속 균주에서 목적 단백질의 세포외 분비와 정제를 위한 시스템에 관한 것으로, 보다 상세하게, 슈도모나스 플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드를 포함하는, 슈도모나스속 균주에서 목적 단백질의 세포외 분비와 정제를 위한 조성물 및 슈도모나스속 균주에, 슈도모나스 플루오레슨스의 LARD 3 펩타이드의 암호화 폴리뉴클레오타이드와 목적 단백질의 유전자를 포함하는 발현 카세트를 도입하고, 상기 균주를 배양하여 목적 단백질을 세포외로 분비시키고, 상기 분비된 단백질을 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용하여 분리 또는 정제하는 단계를 포함하는, 슈도모나스속 균주에서 목적 단백질을 생산하는 방법에 관한 것이다. |
|---|---|
| Int. CL | C07K 1/14 (2006.01) C07K 1/20 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C07K 14/21 (2006.01) |
| CPC | C07K 14/21(2013.01) C07K 14/21(2013.01) C07K 14/21(2013.01) C07K 14/21(2013.01) C07K 14/21(2013.01) C07K 14/21(2013.01) |
| 출원번호/일자 | 1020140188742 (2014.12.24) |
| 출원인 | 한국과학기술원 |
| 등록번호/일자 | 10-1677090-0000 (2016.11.11) |
| 공개번호/일자 | 10-2016-0078068 (2016.07.04) 문서열기 |
| 공고번호/일자 | (20161117) 문서열기 |
| 국제출원번호/일자 | |
| 국제공개번호/일자 | |
| 우선권정보 | |
| 법적상태 | 등록 |
| 심사진행상태 | 수리 |
| 심판사항 | |
| 구분 | 신규 |
| 원출원번호/일자 | |
| 관련 출원번호 | |
| 심사청구여부/일자 | Y (2014.12.24) |
| 심사청구항수 | 17 |
출원인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
발명자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 안정훈 | 대한민국 | 부산광역시 부산진구 |
대리인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 유미특허법인 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 서림빌딩 **층 (역삼동) |
최종권리자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2014-1259226-17 |
| 2 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2015.07.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 3 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2015.09.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-2015-0058486-21 |
| 4 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2015.11.20 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0806059-22 |
| 5 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2016.01.20 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0065894-92 |
| 6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2016.02.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0173713-03 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2016.03.21 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0268989-81 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2016.03.21 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2016-0269021-90 |
| 9 | 거절결정서 Decision to Refuse a Patent |
2016.07.27 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0543933-11 |
| 10 | [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Extension of Legal Period] Request for Extension of Period (Reduction, Expiry Reconsideration) |
2016.08.17 | 수리 (Accepted) | 7-1-2016-0048904-13 |
| 11 | [명세서등 보정]보정서(재심사) Amendment to Description, etc(Reexamination) |
2016.08.31 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2016-0850991-14 |
| 12 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2016.08.31 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0850990-79 |
| 13 | 등록결정서 Decision to Grant Registration |
2016.09.23 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0681328-01 |
| 14 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 15 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 16 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 |
1 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어지는 제1 펩타이드 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어지는 제2 펩타이드를 필수적으로 포함하는 폴리펩타이드를 포함하는, 그람 음성균에서 목적 단백질의 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 조성물로서,상기 소수성 상호작용 크로마토그래피는 알킬 세파로스를 이용한 소수성 상호작용 크로마토그래피법이며, 상기 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필 또는 부틸기인 것인, 조성물 |
| 2 |
2 삭제 |
| 3 |
3 삭제 |
| 4 |
4 삭제 |
| 5 |
5 삭제 |
| 6 |
6 제1항에 있어서, 상기 제1 펩타이드와 제2 펩타이드를 포함하는 폴리펩타이드는 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드, 또는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드인 조성물 |
| 7 |
7 제1항에 있어서, 상기 폴리펩타이드는 목적 단백질의 C-말단에 융합된 단백질 형태인 조성물 |
| 8 |
8 삭제 |
| 9 |
9 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어지는 제1 펩타이드 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어지는 제2 펩타이드를 필수적으로 포함하는 목적 단백질의 세포 외 분비 및 정제용 폴리펩타이드를 코딩하는 폴리뉴클레오타이드;슈도모나스 플루오레슨스의 tliDEF 유전자; 제한효소 절단부위;선별 마커;리보솜 결합 부위(ribosomal binding site, RBS); 및Factor Xa 절단 부위(cleavage site);를 포함하는,그람음성균에서 목적 단백질의 발현, 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 발현 카세트로서,상기 소수성 상호작용 크로마토그래피는 알킬 세파로스를 이용한 소수성 상호작용 크로마토그래피법이며, 상기 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필 또는 부틸기인 것인, 발현 카세트 |
| 10 |
10 제9항에 있어서, 상기 서열번호 7의 아미노산 서열로 이루어지는 제1 펩타이드 및 서열번호 6의 아미노산 서열로 이루어지는 제2 펩타이드를 필수적으로 포함하는 목적 단백질의 세포 외 분비 및 정제용 폴리펩타이드는 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드, 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어지는 펩타이드 또는 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 것인, 그람음성균에서 목적 단백질의 발현, 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 발현 카세트 |
| 11 |
11 제9항에 있어서, 상기 발현 카세트는 목적 단백질을 암호화하는 폴리뉴크레오타이드를 추가로 포함하는 것인, 그람음성균에서 목적 단백질의 발현, 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 발현 카세트 |
| 12 |
12 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 그람음성균에서 목적 단백질의 발현, 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 발현 카세트로 형질전환된 그람음성균 세포 |
| 13 |
13 제12항에 있어서, 상기 그람 음성균은 슈도모나스(Pseudomonas) 속 균주, 크산토모나스(Xanthomonas) 속 균주 및 버크홀데리아(Burkholderia) 속 균주로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 세포 |
| 14 |
14 제13항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스, 슈도모나스 프라기, 슈도모나스 푸티다, 슈도모나스 시린게 또는 슈도모나스 에루기노사인, 세포 |
| 15 |
15 제13항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스의 리파아제 유전자(tliA) 및 프로테아제 유전자(prtA)로 이루어지는 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 일부 영역이 결실되며, 상기 유전자의 일부 결실은 유전자의 적어도 하나의 말단에 적어도 100bp 이상 크기의 단편을 남기도록 유전자 영역을 결실시킨 것이며, 기능적 리파아제 및 기능적 프로테아제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 기능적 단백질을 생성하지 않는 슈도모나스 플루오레슨스 변이 균주인, 세포 |
| 16 |
16 제15항에 있어서, 상기 변이 균주가 기능적 프로테아제 단백질을 생성하지 않는 것은, 프로테아제 유전자의 전부 또는 일부 결실, 또는 프로테아제 저해제 유전자(inh)의 전부 또는 일부 결실에 의해 이루어진 것인, 세포 |
| 17 |
17 삭제 |
| 18 |
18 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항의 그람음성균에서 목적 단백질의 발현, 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 발현 카세트로 형질전환된 그람음성균 세포를 제조하고, 상기 세포를 배양하여 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 폴리펩타이드가 결합된 목적 단백질을 발현하고,상기 목적 단백질에 결합된 세포 외 분비 및 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용한 정제용 폴리펩타이드를 이용한 소수성 상호작용 크로마토그래피를 이용하여, 목적 단백질을 분리 또는 정제하는 단계를 포함하고,상기 소수성 상호작용 크로마토그래피는 알킬 세파로스를 이용한 소수성 상호작용 크로마토그래피법이며, 상기 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필 또는 부틸기인 것인, 그람 음성균에서 목적 단백질을 생산하는 방법 |
| 19 |
19 삭제 |
| 20 |
20 삭제 |
| 21 |
21 제18항에 있어서, 상기 목적 단백질을 분리 또는 정제하는 단계 이후에, 상기 목적 단백질에 결합된 정제용 폴리펩타이드를 절단하는 단계를 추가로 포함하는 것인 방법 |
| 22 |
22 제18항에 있어서, 상기 그람 음성균은 슈도모나스(Pseudomonas) 속 균주, 크산토모나스(Xanthomonas) 속 균주 및 버크홀데리아(Burkholderia) 속 균주로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 방법 |
| 23 |
23 제22항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스, 슈도모나스 프라기, 슈도모나스 푸티다, 슈도모나스 시린게 또는 슈도모나스 에루기노사인, 방법 |
| 24 |
24 제22항에 있어서, 상기 슈도모나스속 균주는 슈도모나스 플루오레슨스의 리파아제 유전자(tliA) 및 프로테아제 유전자(prtA)로 이루어지는 군으로부터 선택된 하나 이상의 유전자의 일부 영역이 결실되며, 상기 유전자의 일부 결실은 유전자의 적어도 하나의 말단에 적어도 100bp 이상 크기의 단편을 남기도록 유전자 영역을 결실시킨 것이며, 기능적 리파아제 및 기능적 프로테아제로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 기능적 단백질을 생성하지 않는 슈도모나스 플루오레슨스 변이 균주인, 방법 |
| 25 |
25 제24항에 있어서, 상기 변이 균주가 기능적 프로테아제 단백질을 생성하지 않는 것은, 프로테아제 유전자의 전부 또는 일부 결실, 또는 프로테아제 저해제 유전자(inh)의 전부 또는 일부 결실에 의해 이루어진 것인, 방법 |
| 26 |
26 삭제 |
| 지정국 정보가 없습니다 |
|---|
| 패밀리정보가 없습니다 |
|---|
| 국가 R&D 정보가 없습니다. |
|---|
- 본 등록정보는 참고용으로 법적증빙자료로 사용할 수 없습니다.
- 데이터 이관에 따른 소요기간(1일)으로 인하여 등록원부와 일부 차이가 발생할 수 있으며, 일부 정보(부기, 상세 주소 등)를 제공하지 않고 있습니다.
- 법적증빙자료로 활용하시거나 더 자세한 정보를 보시려면 등록원부를 발급받아 사용하시기 바랍니다.
| 특허 등록번호 | 10-1677090-0000 |
|---|
권리란
| 표시번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
출원 연월일 : 20141224 출원 번호 : 1020140188742 공고 연월일 : 20161117 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20160923 청구범위의 항수 : 17 유별 : C07K 14/21 발명의 명칭 : 목적 단백질의 정제용 폴리펩타이드 및 이의 용도 존속기간(예정)만료일 : |
특허권자란
| 순위번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
(권리자) 한국과학기술원 대전광역시 유성구... |
등록료란
| 제 1 - 3 년분 | 금 액 | 354,000 원 | 2016년 11월 11일 | 납입 |
| 제 4 년분 | 금 액 | 207,000 원 | 2019년 11월 01일 | 납입 |
| 제 5 년분 | 금 액 | 207,000 원 | 2020년 10월 26일 | 납입 |
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| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 1-1-2014-1259226-17 |
| 2 | 선행기술조사의뢰서 | 2015.07.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 3 | 선행기술조사보고서 | 2015.09.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-2015-0058486-21 |
| 4 | 의견제출통지서 | 2015.11.20 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2015-0806059-22 |
| 5 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2016.01.20 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0065894-92 |
| 6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2016.02.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0173713-03 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2016.03.21 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0268989-81 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 | 2016.03.21 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2016-0269021-90 |
| 9 | 거절결정서 | 2016.07.27 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0543933-11 |
| 10 | [법정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2016.08.17 | 수리 (Accepted) | 7-1-2016-0048904-13 |
| 11 | [명세서등 보정]보정서(재심사) | 2016.08.31 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 1-1-2016-0850991-14 |
| 12 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2016.08.31 | 수리 (Accepted) | 1-1-2016-0850990-79 |
| 13 | 등록결정서 | 2016.09.23 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2016-0681328-01 |
| 14 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 15 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 16 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 기술정보가 없습니다 |
|---|
| 과제고유번호 | 1711017450 |
|---|---|
| 세부과제번호 | KSA20140001 |
| 연구과제명 | 한국과학기술원 한국과학영재학교 운영비 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 미래창조과학부 |
| 연구관리전문기관명 | 미래창조과학부 |
| 연구주관기관명 | 카이스트부설한국과학영재학교 |
| 성과제출연도 | 2014 |
| 연구기간 | 201401~999912 |
| 기여율 | 1 |
| 연구개발단계명 | 기타 |
| 6T분류명 | 기타 |
특허성과
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