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금속 친화성 크로마토그래피를 이용한 Ｏ-ＧｌｃＮＡｃ 펩타이드의 분리 및 동정 방법

  • 기술번호 : KST2015135881
  • 담당센터 : 서울동부기술혁신센터
  • 전화번호 : 02-2155-3662
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 단백질의 O-GlcNAcylation에 대한 정보를 내포하는 O-GlcNAc 펩타이드의 분리 및 동정 방법에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 펩타이드의 세린 또는 트레오닌 잔기에 결합되어 있는 인산기 또는 O-GlcNAc의 화학적 변형 없이 쉽고 빠르게 O-GlcNAc 펩타이드를 인산화 펩타이드와 분리해 낼 수 있을 뿐만 아니라 분리된 O-GlcNAc 펩타이드의 서열 및 O-GlcNAc의 수식화 위치를 규명할 수 있다. 따라서 본 발명은 O-GlcNAc 펩타이드의 분석을 통한 새로운 질병 메커니즘 연구, 치료제 및 진단용 마커의 개발 등에 유용하게 활용될 수 있다.
Int. CL G01N 33/68 (2006.01.01) G01N 30/72 (2006.01.01) G01N 30/02 (2006.01.01)
CPC G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01) G01N 33/6848(2013.01)
출원번호/일자 1020110110018 (2011.10.26)
출원인 서울대학교산학협력단
등록번호/일자 10-1337064-0000 (2013.11.28)
공개번호/일자 10-2013-0047782 (2013.05.09) 문서열기
공고번호/일자 (20131209) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2011.10.26)
심사청구항수 5

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 대한민국 서울특별시 관악구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이유진 대한민국 서울시 관악구
2 묵인희 대한민국 서울특별시 강남구
3 김채영 대한민국 서울특별시 종로구
4 강민정 대한민국 서울특별시 종로구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인다나 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 *길 **, 신관 *층~*층, **층(역삼동, 광성빌딩)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 서울대학교산학협력단 서울특별시 관악구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2011.10.26 수리 (Accepted) 1-1-2011-0840202-68
2 보정요구서
Request for Amendment		 2011.11.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2011-0101471-37
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2011.11.04 수리 (Accepted) 1-1-2011-0870748-11
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.05.17 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.06.25 수리 (Accepted) 9-1-2012-0052680-39
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.01.14 수리 (Accepted) 4-1-2013-5007213-54
7 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.05.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0359958-10
8 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.07.16 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-0639888-66
9 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.07.16 수리 (Accepted) 1-1-2013-0639884-84
10 등록결정서
Decision to grant		 2013.11.26 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0818602-72
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.03.17 수리 (Accepted) 4-1-2015-5033829-92
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2015.05.13 수리 (Accepted) 4-1-2015-5062924-01
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.05.13 수리 (Accepted) 4-1-2019-5093546-10
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.05.23 수리 (Accepted) 4-1-2019-5101798-31
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.08.02 수리 (Accepted) 4-1-2019-5154561-59
16 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.11.25 수리 (Accepted) 4-1-2020-5265458-48
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번호 청구항
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1) 분석대상 샘플에 대하여 금속 친화성 크로마토그래피를 수행하여 컬럼에 흡착된 인산화 펩타이드와 컬럼에 흡착되지 않은 O-GlcNAc 펩타이드를 분리하는 단계;2) 컬럼에 흡착된 인산화 펩타이드에는 BEMAD 방법을 이용하여 제1 질량 태그 표지된 디티오트레이톨 친화성 태그를 부가하고, 컬럼에 흡착되지 않은 O-GlcNAc 펩타이드에는 BEMAD 방법을 이용하여 제2 질량 태그 표지된 디티오트레이톨 친화성 태그를 부가하는 단계;3) 단계 2)에서 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드에 대하여 티올 친화성 크로마토그래피를 수행하여 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드를 각각 정제하는 단계; 및4) 정제된 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드를 각각 고성능 액체 크로마토그래피-질량분석기 (Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS)로 분석하여 비교하는 단계를 포함하는 동일 분석대상 샘플 내 인산화 펩타이드와 O-GlcNAc 펩타이드의 상대량 정량 분석 방법
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제5항에 있어서,상기 단계 1)의 금속 친화성 크로마토그래피에 사용되는 금속은 TiO2, ZrO2, GaO4 또는 FeO2 인 방법
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1) 제1 분석대상 샘플 및 제2 분석대상 샘플에 대하여 각각 금속 친화성 크로마토그래피를 수행하여 인산화 펩타이드를 컬럼에 흡착시켜서 제거하는 단계;2) 단계 1)에서 인산화 펩타이드를 제거한 제1 분석대상 샘플 내의 O-GlcNAc 펩타이드에는 BEMAD 방법을 이용하여 제1 질량 태그 표지된 디티오트레이톨 친화성 태그를 부가하고, 인산화 펩타이드를 제거한 제2 분석대상 샘플 내의 O-GlcNAc 펩타이드에는 BEMAD 방법을 이용하여 제2 질량 태그 표지된 디티오트레이톨 친화성 태그를 부가하는 단계;3) 단계 2)에서 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드에 대하여 티올 친화성 크로마토그래피를 수행하여 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드를 각각 정제하는 단계; 및4) 정제된 제1 또는 제2 질량 태그 표지된 펩타이드를 각각 고성능 액체 크로마토그래피-질량분석기 (Liquid Chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS)로 분석하여 비교하는 단계를 포함하는 상이한 분석대상 샘플 내 O-GlcNAc 펩타이드의 상대량 정량 분석 방법
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제7항에 있어서,상기 단계 1)의 금속 친화성 크로마토그래피에 사용되는 금속은 TiO2, ZrO2, GaO4 또는 FeO2 인 방법
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제7항에 있어서,상기 제1 분석대상 샘플은 정상 상태의 샘플이고 제2 분석대상 샘플은 질병 상태의 샘플인 방법
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