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a) 엑소솜 생산 세포에, 엑소솜 특이 마커와 목적 단백질이 결합된 형태의 융합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 도입하여 형질전환된 세포를 얻는 단계; 및b) 상기 형질전환된 세포를 배양하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 목적 단백질이 엑소솜막에 부착된 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 1항을 포함하되, 목적 단백질이 엑소솜막에서 분리되어 엑소솜 내부에 존재하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 엑소솜 생산 세포는 B-림프구, T- 림프구, 수지상세포, 거대핵세포(megakaryocyte), 대식세포, 줄기세포 및 종양 세포로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 세포인 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 1항에 있어서, 상기 엑소솜 특이 마커는 CD9, CD63, CD81 또는 CD82인 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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a) 엑소솜 생산 세포에, 엑소솜 특이 마커와 제1 광특이적 결합 단백질이 결합된 형태의 융합 단백질(제1 융합 단백질)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드 및 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 결합할 수 있는 제2 광특이적 결합 단백질과 목적 단백질이 결합된 형태의 융합 단백질(제2 융합 단백질)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 도입하는 단계;b) 상기 엑소솜 생산 세포에 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 상기 제2 광특이적 결합 단백질의 결합을 유발할 수 있는 광을 조사하는 단계; 및c) 상기 엑소솜 생산 세포에서 엑소솜이 생산된 다음, 상기 광의 조사를 중지하는 단계를 포함하는, 목적 단백질을 포함하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 제1 광특이적 결합 단백질은 CIB(cryptochrome-interacting basichelix-loop-helix protein), CIBN(N-terminal domain of CIB), PhyB(phytochrome B), PIF(phytochrome interacting factor), FKF1(Flavinbinding, Kelch repeat, Fbox 1), GIGANTEA, CRY(chryptochrome) 및 PHR(phytolyase homolgous region)로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상의 단백질인 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 제1 광특이적 결합 단백질이 CIB 또는 CIBN인 경우, 상기 제2 광특이적 결합 단백질은 CRY 또는 PHR이며, 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 제2 광특이적 결합 단백질의 결합은 460 내지 490 nm의 파장을 갖는 빛을 조사하여 수행되는 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 제1 광특이적 결합 단백질이 PhyB인 경우, 상기 제2 광특이적 결합 단백질은 PIF이며, 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 제2 광특이적 결합 단백질의 결합은 600 내지 650 nm의 파장을 갖는 빛을 조사하여 수행되는 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 5항에 있어서, 상기 제1 광특이적 결합 단백질이 FKF1인 경우, 상기 제2 광특이적 결합 단백질은 GIGANTEA이며, 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 제2 광특이적 결합 단백질의 결합은 460 내지 490 nm의 파장을 갖는 빛을 조사하여 수행되는 것을 특징으로 하는 엑소솜을 대량으로 제조하는 방법
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제 1항, 제 2항 또는 제 5항의 방법에 의해 제조된 엑소솜을 이용하는 것을 특징으로 하는 세포질로 단백질 약물을 전달하는 방법
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제 1항, 제 2항 또는 제 5항의 방법에 의해 제조된 엑소솜을 유효성분으로 포함하는 단백질 약물의 세포질 전달용 약학적 조성물
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12
(a) 엑소솜 특이 마커와 제1 광특이적 결합 단백질이 결합된 형태의 융합 단백질(제1 융합 단백질)을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제1 발현벡터; 및(b) 목적 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 도입될 수 있는 다클론 부위와 상기 제1 광특이적 결합 단백질과 결합할 수 있는 제2 광특이적 결합 단백질을 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 제2 발현벡터를 포함하는, 엑소솜 제조용 벡터
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제 12항에 있어서, 상기 제2 발현벡터는 상기 제2 광특이적 결합 단백질과 목적 단백질이 융합된 형태의 융합 단백질(제2 융합 단백질)을 엑소솜 생산 세포에서 발현시키는 것인 엑소솜 제조용 벡터
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제 1항, 제 2항 또는 제 5항 중 어느 한 항의 방법을 사용하여 제조된, 목적 단백질이 내부에 포함된 엑소솜
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