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염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터 및 이를 이용한미생물 내 염색체 특정 부위의 제거방법

  • 기술번호 : KST2015112975
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터 및 이를 이용한 미생물 내 염색체 특정 부위의 제거방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 아라비노즈에 의해 유도되는 프로모터; 람다(λ)-레드(red) 재조합에 관여하는 단백질을 코딩하는 유전자; 람노즈에 의해 유도되는 프로모터; 및 I-SceI 제한효소를 코딩하는 유전자;를 포함하는, 염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터로, 기존 방법에 비해 보다 간편하고 빠르게, 선별마커를 남기지 않고, 미생물 내 특정 유전자를 연속적으로 제거할 수 있다. 유전자 제거, 람다-레드 재조합 (λ-red recombination), 람노즈, 아라비노즈, 유전체 재조합
Int. CL C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020080012377 (2008.02.11)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-0958096-0000 (2010.05.07)
공개번호/일자 10-2009-0086870 (2009.08.14) 문서열기
공고번호/일자 (20100514) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2008.02.11)
심사청구항수 16

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김선창 대한민국 대전 유성구
2 강귀현 대한민국 대전 유성구
3 유병조 대한민국 대전 유성구
4 이준형 대한민국 대전 유성구
5 성봉현 대한민국 대전 유성구
6 이충훈 대한민국 대전 유성구
7 이상희 대한민국 대전 유성구
8 이주영 대한민국 대전 유성구
9 박명근 대한민국 대전 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 박장원 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 ***, *층~*층 (논현동, 비너스빌딩)(박장원특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2008.02.11 수리 (Accepted) 1-1-2008-0101179-23
2 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2009.10.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2009-0449565-97
3 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2009.12.23 수리 (Accepted) 1-1-2009-0799093-66
4 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2009.12.23 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2009-0799098-94
5 등록결정서
Decision to grant		 2010.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0185671-27
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
아라비노즈에 의해 유도되는 프로모터 (Para); 람다(λ)-레드(red) 재조합에 관여하는 단백질을 코딩하는 유전자; 람노즈에 의해 유도되는 프로모터 (Prha); 및 I-SceI 제한효소를 코딩하는 유전자; 를 포함하는, 서열번호 1과 도 1의 개열지도를 가지는 염색체 특정 부위 제거용 재조합 벡터
2 2
제1항의 재조합 벡터로 형질전환된 대장균
3 3
(a) 미생물에 도입시 람다-레드 재조합에 관여하는 상동부위 A 및 상동부위 B; 선별마커; 선별마커 제거를 위한 상동 재조합에 관여하는 I-SceI 제한효소 절단부위; 및 선별마커 제거를 위한 상동 재조합에 관여하는 상동부위 C;를 포함하는 선형 DNA 단편을 제조하는 단계; (b) 제1항의 재조합 벡터로 형질전환된 미생물에 상기 선형 DNA 단편을 도입하여, 상기 DNA 단편 상의 상동 부위들과 이들과 상동인 미생물 염색체 부위간의 람다-레드 재조합을 이용하여, 상기 선형 DNA 단편을 미생물 염색체의 특정 위치에 대체 (replacement)시키는 단계; 및 (c) 상기 특정 염색체 부분이 대체된 미생물을 람노즈를 함유하는 배지에서 배양하여 I-SceI 제한효소를 발현시켜, 상기 DNA 단편 상의 상동부위 C 및 이와 상동인 미생물 염색체 부위 간의 상동 재조합 (homologous recombination)을 유발하여 선별마커를 제거하는 단계를 포함하고, 상기 상동부위 A는 미생물 염색체의 제거하고자 하는 부분의 한 쪽 말단의 50 내지 500bp와 상동인 부위이고, 상동부위 B는 상기 미생물 염색체의 제거하고자 하는 부분의 다른 쪽 말단의 50 내지 500bp와 상동인 부위이며, 상기 상동부위 C는 상기 상동부위 A 및 상동부위 B와 상동인 미생물 염색체 부위 중 어느 하나와 인접하는 300 내지 500bp 부위와 상동인 부위인 것을 특징으로 하는, 제1항의 재조합 벡터를 이용하여 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 (a) 미생물에 도입시 람다-레드 재조합에 관여하는 상동부위 A 및 상동부위 B; 선별마커; 선별마커 제거를 위한 상동 재조합에 관여하는 I-SceI 제한효소 절단부위; 및 선별마커 제거를 위한 상동 재조합에 관여하는 상동부위 C;를 포함하는 선형 DNA 단편을 제조하는 단계; 및 (b) 제1항의 재조합 벡터로 형질전환된 미생물에 상기 선형 DNA 단편을 도입하여, 상기 DNA 단편 상의 상동 부위들과 이들과 상동인 미생물 염색체 부위간의 람다-레드 재조합을 이용하여, 상기 선형 DNA 단편을 미생물 염색체의 특정 위치에 대체 (replacement)시키는 단계;를 반복함으로써, 서로 다른 복수의 선형 DNA 단편을 제조하여 제1항의 재조합 벡터로 형질전환된 미생물에 도입하는 것인, 미생물 내 복수의 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
5 5
제3항에 있어서, 상기 선별마커는 서열번호 13의 염기서열을 가지는 클로람페니콜 저항 유전자, 서열번호 14의 염기서열을 가지는 카나마이신 저항 유전자 및 sacB로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 것인 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
6 6
제4항에 있어서, 상기 선별마커는 서열번호 13의 염기서열을 가지는 클로람페니콜 저항 유전자, 서열번호 14의 염기서열을 가지는 카나마이신 저항 유전자 및 sacB로 구성된 군에서 선택된 하나 이상인 것인 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
7 7
제5항에 있어서, 상기 선별마커를 제거하는 단계 후에, 상기 미생물을 자당을 포함하는 배지에서 배양하는 단계를 더 포함하는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
8 8
제6항에 있어서, 상기 선별마커를 제거하는 단계 후에, 상기 미생물을 자당을 포함하는 배지에서 배양하는 단계를 더 포함하는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
9 9
제3항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 15, 서열번호 16 및 서열번호 17의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
10 10
제4항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 15, 서열번호 16 및 서열번호 17의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
11 11
제3항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 22, 서열번호 23 및 서열번호 24의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
12 12
제4항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 22, 서열번호 23 및 서열번호 24의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
13 13
제3항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 31, 서열번호 32 및 서열번호 33의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
14 14
제4항에 있어서, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 31, 서열번호 32 및 서열번호 33의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
15 15
제3항에 있어서, 상기 제거하고자 하는 미생물 내 특정 염색체 부위가 미생물 생존에 필수적인 유전자를 포함하고, 상기 선형 DNA 단편은 상기 상동부위 A와 상동부위 C 사이에 상기 미생물 생존에 필수적인 유전자를 더 포함하는, 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
16 16
제15항에 있어서, 상기 필수적인 유전자는 서열번호 43의 argS이고, 상기 상동부위 A, 상동부위 B 및 상동부위 C는 각각 서열번호 40, 서열번호 41 및 서열번호 42의 염기서열을 가지는 미생물 내 특정 염색체 부위를 제거하는 방법
지정국 정보가 없습니다
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 EP02088195 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
2 EP02088195 EP 유럽특허청(EPO) FAMILY
3 JP04795415 JP 일본 FAMILY
4 JP21183279 JP 일본 FAMILY
5 US20090305421 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 AT484583 AT 오스트리아 DOCDBFAMILY
2 DE602008002995 DE 독일 DOCDBFAMILY
3 EP2088195 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
4 EP2088195 EP 유럽특허청(EPO) DOCDBFAMILY
5 JP2009183279 JP 일본 DOCDBFAMILY
6 JP4795415 JP 일본 DOCDBFAMILY
7 US2009305421 US 미국 DOCDBFAMILY
국가 R&D 정보가 없습니다.