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목적단백질 및 코펙터를 재생시키는 효소를 동시에 세포표면에 표면발현시키는 방법

  • 기술번호 : KST2015112434
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 코펙터(cofactor)를 이용하는 목적단백질 및 상기 코펙터를 재생시키는 효소를 동시에 세포 표면에 표면발현시키는 방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 코펙터(cofactor)를 이용하는 목적단백질 및 상기 코펙터를 재생시키는 효소를 동시에 세포 표면에 표면발현시키는 방법, 상기 방법으로 표면발현된 세포를 이용하는 것을 특징으로 하는 목적단백질이 촉매하는 반응을 수행하는 생화학물질의 생물전환방법 및 둘 이상의 목적단백질을 동시에 표면발현하는 세포의 제조방법에 관한 것이다.본 발명에 따른, 생화학물질의 생물전환방법은 고가의 코펙터를 대량으로 첨가하지 않아도, 계속적인 생물전환반응이 일어나 경제적이며, 본 발명에 따른 둘 이상의 목적단백질을 동시에 표면발현하는 세포는 세포표면에 복수의 외래 단백질을 정상적인 기능을 가진 상태로 발현시킬 수 있으므로, 유용단백질의 스크리닝에 사용될 수 있다.표면발현, 동시 표면발현, cofactor 재생, 세포외막 단백질, 생물전환
Int. CL C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/64 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020060038023 (2006.04.27)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-0743973-0000 (2007.07.24)
공개번호/일자
공고번호/일자 (20070730) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2006.04.27)
심사청구항수 19

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상엽 대한민국 대전광역시 유성구
2 이승환 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 특허출원서
Patent Application		 2006.04.27 수리 (Accepted) 1-1-2006-0295977-10
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2006.11.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2006.12.05 수리 (Accepted) 9-1-2006-0082995-56
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2007.02.14 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0086981-38
5 명세서등보정서
Amendment to Description, etc.		 2007.04.09 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2007-0269468-73
6 의견서
Written Opinion		 2007.04.09 수리 (Accepted) 1-1-2007-0269469-18
7 등록결정서
Decision to grant		 2007.07.16 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2007-0384413-39
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
다음 단계를 포함하는 코펙터를 재생시키는 효소와 상기 코펙터(cofactor)를 이용하는 목적단백질을 동시에 세포 표면에 발현시키는 방법:(a) 코펙터를 재생하는 효소와 표면발현모체가 융합된 상태로 발현되도록 상기 코펙터를 재생하는 효소를 코딩하는 유전자와 표면발현모체를 코딩하는 유전자가 결합된 DNA를 포함하는 코펙터 재생용 재조합 벡터를 제조하는 단계; (b) 상기 코펙터를 이용하는 목적단백질과 표면발현모체가 융합된 상태로 발현되도록 상기 목적단백질을 코딩하는 유전자와 표면발현모체를 코딩하는 유전자가 결합된 DNA를 포함하는 목적단백질 발현용 재조합 벡터를 제조하는 단계;(c) 상기 목적단백질 발현용 재조합 벡터 및 상기 코펙터 재생용 재조합 벡터를 숙주세포에 형질전환시키는 단계; 및(d) 상기 형질전환된 세포를 배양하여 상기 코펙터를 재생시키는 효소 및 목적단백질을 표면발현시키는 단계
2 2
제1항에 있어서, 표면발현모체는 외막단백질, 포자단백질, 리포단백질(lipoprotein), 자기전달체(autotranspoters) 및 표면 부속물(surface appendage)의 S층(S-layer) 으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
3 3
제2항에 있어서, 외막단백질은 대장균의 외막단백질 OmpA, 대장균 지방단백질 Lpp 서열 시그널에 연결된 대장균의 외막단백질 OmpA, 대장균의 외막단백질 OmpS, 대장균의 외막단백질 LamB, 대장균의 외막단백질 PhoE, 대장균의 외막단백질 OmpC, 대장균의 외막단백질 FadL, 살모넬라 균주의 외막단백질 OmpC 및 슈도모나스 균주의 외막단백질 OprF로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 세포는 미생물인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제4항에 있어서, 미생물은 박테리아인 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제5항에 있어서, 박테리아는 대장균 또는 슈도모나스 푸티다인 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제1항에 있어서, 목적단백질 발현용 재조합 벡터 및 코펙터 재생용 재조합 벡터는 서로 다른 복제원점을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제1항에 있어서, 코펙터는 수소전이 조효소, 기전이 조효소 및 이성질화효소 및 리아제의 조효소로 이루어진 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제8항에 있어서, 수소전이 조효소는 니코틴아미드-아데닌-디뉴클레오티드(NAD), 니코틴아미드-아데닌-디뉴클레오티드인산(NADP), 플라빈-모노뉴클레오티드(FMN), 플라빈-아데닌-디뉴클레오티드(FAD), 세포 내 헤민 및 리포산으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제8항에 있어서, 기전이 조효소는 아데노신삼인산(ATP), 포스포아데닐산황산(PAPS), 우리딘이인산(UDP), 시티딘이인산(CDP), 구아노신삼인산(GTP), 이노신삼인산(ITP), 조효소 A(CoA), 테트라히드로폴산(CoF, FH4), 비오틴-티아민피로인산(TPP) 및 피리독살인산(PAL)으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제8항에 있어서, 이성질화효소 및 리아제의 조효소는 우리딘이인산(UDP), 피리독살인산(PAL), 티아민피로인산(TPP) 및 비타민 B12으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제1항에 있어서, 목적단백질은 호르몬, 호르몬 유사체, 효소, 효소저해제, 신호전달단백질 혹은 그 일부분, 항체 혹은 그 일부분, 단쇄항체, 결합단백질, 결합도메인, 펩타이드, 항원, 부착단백질, 구조단백질, 조절단백질, 독소단백질, 사이토카인, 전사조절 인자, 혈액 응고 인자 및 식물 생체방어 유도 단백질로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제12항에 있어서, 효소는 수소전이효소, 기전이효소, 이성질화효소 및 리아제로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제13항에 있어서, 코펙터는 니코틴아미드-아데닌-디뉴클레오티드(NAD)이고, 목적단백질은 젖산탈수소효소(lactate dehydorgenase)인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제14항에 있어서, 코펙터를 재생하는 효소는 개미산탈수소효소(formate dehydrogenase)인 것을 특징으로 하는 방법
16 16
제1항의 방법으로 코펙터를 재생시키는 효소와 상기 코펙터(cofactor)를 이용하는 목적단백질이 동시에 표면발현되고, 코펙터를 재생하는 효소를 코딩하는 유전자와 표면발현모체를 코딩하는 유전자가 결합된 DNA를 포함하는 코펙터 재생용 재조합 벡터 및 코펙터를 이용하는 목적단백질을 코딩하는 유전자와 표면발현모체를 코딩하는 유전자가 결합된 DNA를 포함하는 목적단백질 발현용 재조합 벡터로 형질전환된 세포
17 17
제16항에 있어서, 목적단백질은 젖산탈수소효소(lactate dehydorgenase)이고, 코펙터를 재생시키는 효소는 피루브산탈수소효소(pyruvic acid dehydrogenase)인 것을 특징으로 하는 세포
18 18
생화학물질의 생물전환방법에 있어서, 제16항의 세포를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
19 19
페닐피루브산(phenyloyruvic acid)을 (R)-페닐 젖산(phenyl lactic acid)으로 전환하는 방법에 있어서, 제17항의 세포를 이용하는 것을 특징으로 하는 방법
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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US07897366 US 미국 FAMILY
2 US20070254368 US 미국 FAMILY

DOCDB 패밀리 정보

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순번 패밀리번호 국가코드 국가명 종류
1 US2007254368 US 미국 DOCDBFAMILY
2 US7897366 US 미국 DOCDBFAMILY
국가 R&D 정보가 없습니다.