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탄소원으로부터 아세틸-CoA 생성능을 가지는 알칼리제네스(Alcaligenes)속, 슈도모나스(Pseudomonas)속, 에스케리치아(Escherichia)속, 랄스토니아(Ralstonia)속, 바실러스(Bacillus)속, 코리네박테리움(Corynebacterium)속으로 구성된 군에서 선택되는 미생물에서, 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소를 코딩하는 유전자인 hadA 및 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소를 코딩하는 유전자가 도입되어 있으며, 2-하이드록시이소카프로에이트, 2-하이드록시헥사노에이트, 2-하이드록시옥타노에이트, 페닐락테이트, 2-하이드록시-4-페닐부티레이트, 3-하이드록시-3-페닐프로피오네이트, 4-하이드록시벤조산 및 만델레이트로 구성된 군에서 선택되는 방향족 단량체 또는 장사슬 2-HA를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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2
제1항에 있어서, 상기 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소는 Ralstonia eutropha, Pseudomonas, Bacillus 및 Pseudomonas sp
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3 |
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제1항에 있어서, 상기 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소는 Clostridium difficile 630 유래인 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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4
제1항에 있어서, 상기 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소는 아세틸-CoA를 CoA 공여체로 사용하는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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제1항에 있어서, β-케토티올레이즈를 코딩하는 유전자와 아세토아세틸-CoA 리덕테이즈를 코딩하는 유전자가 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 재조합 미생물
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7 |
7
다음 단계를 포함하는 방향족 단량체 또는 장사슬 2-HA를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법:(a) 제1항 내지 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 재조합 미생물을 배양하는 단계; 및(b) 2-하이드록시이소카프로에이트, 2-하이드록시헥사노에이트, 2-하이드록시옥타노에이트, 페닐락테이트, 2-하이드록시-4-페닐부티레이트, 3-하이드록시-3-페닐프로피오네이트, 4-하이드록시벤조산 및 만델레이트로 구성된 군에서 선택되는 방향족 단량체 또는 장사슬 2-HA를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트를 수득하는 단계
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8
제7항에 있어서, 상기 재조합 미생물을 방향족 단량체 또는 장사슬 2-HA를 단량체로 함유하는 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법
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10
탄소원으로부터 아세틸-CoA 생성능을 가지는 알칼리제네스(Alcaligenes)속, 슈도모나스(Pseudomonas)속, 에스케리치아(Escherichia)속, 랄스토니아(Ralstonia)속, 바실러스(Bacillus)속, 코리네박테리움(Corynebacterium)속으로 구성된 군에서 선택되는 미생물에서, 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소를 코딩하는 유전자인 hadA, 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소를 코딩하는 유전자, DAHP(3-데옥시-D-아라비노-헵툴로소네이트-7-인산) 합성효소를 코딩하는 유전자, 코리스메이트 뮤타아제/프레페네이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자 및 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자가 도입되어 있고, 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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11
제10항에 있어서, 상기 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소는 Clostridium difficile 630 유래인 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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12
제10항에 있어서, 상기 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소는 Ralstonia eutropha, Pseudomonas, Bacillus 및 Pseudomonas sp
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13
제10항에 있어서, 상기 DAHP(3-데옥시-D-아라비노-헵툴로소네이트-7-인산) 합성효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 8으로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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14
제10항에 있어서, 상기 코리스메이트 뮤타아제/프레페네이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 서열번호 9으로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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15
제10항에 있어서, 상기 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 서열번호 10으로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제10항에 있어서, 상기 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 fldH 유전자인 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제10항에 있어서, β-케토티올레이즈를 코딩하는 유전자와 아세토아세틸-CoA 리덕테이즈를 코딩하는 유전자가 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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18
제10항에 있어서, tyrR 유전자, 피루브산 산화효소를 코딩하는 유전자, 피루브산 포메이트 리아제를 코딩하는 유전자, 아세트알데히드 탈수소효소를 코딩하는 유전자, 푸마레이트 리덕테이즈를 코딩하는 유전자, 티로신 아미노전이효소를 코딩하는 유전자, 및 아스파라긴산 아미노전이효소를 코딩하는 유전자로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 유전자가 결실되어 있는 것을 특징으로 하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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다음 단계를 포함하는 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법;(a) 제10항 내지 제18항 중 어느 한 항의 재조합 미생물을 배양하는 단계; 및(b) 페닐락테이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트를 수득하는 단계
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탄소원으로부터 아세틸-CoA 생성능을 가지는 알칼리제네스(Alcaligenes)속, 슈도모나스(Pseudomonas)속, 에스케리치아(Escherichia)속, 랄스토니아(Ralstonia)속, 바실러스(Bacillus)속, 코리네박테리움(Corynebacterium)속으로 구성된 군에서 선택되는 미생물에서, 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소인 hadA를 코딩하는 유전자, 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소를 코딩하는 유전자, DAHP(3-데옥시-D-아라비노-헵툴로소네이트-7-인산) 합성효소를 코딩하는 유전자, 코리스메이트 뮤타아제/프레페네이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자 및 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자, 하이드록시만델레이트합성효소를 코딩하는 유전자, 하이드록시만델레이트 산화효소를 코딩하는 유전자 및 D-만델레이트 탈수소효소를 코딩하는 유전자가 도입되어 있고, 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 2-하이드록시이소카프로에이트-CoA 전이효소는 Clostridium difficile 630 유래인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 폴리하이드록시알카노에이트 합성효소는 Ralstonia eutropha, Pseudomonas, Bacillus 및 Pseudomonas sp
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제20항에 있어서, 상기 DAHP(3-데옥시-D-아라비노-헵툴로소네이트-7-인산) 합성효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 8로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 코리스메이트 뮤타아제/프레페네이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 서열번호 9로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 서열번호 10로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 하이드록시만델레이트합성효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 11로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 하이드록시만델레이트 산화효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 12로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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28
제20항에 있어서, 상기 D-만델레이트 탈수소효소를 코딩하는 유전자는 서열번호 13으로 표시되는 아미노산 서열을 코딩하는 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, 상기 D-락테이트 디하이드로게네이즈를 코딩하는 유전자는 fldH 유전자인 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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제20항에 있어서, β-케토티올레이즈를 코딩하는 유전자와 아세토아세틸-CoA 리덕테이즈를 코딩하는 유전자가 추가로 도입되어 있는 것을 특징으로 하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트 생성능을 가지는 재조합 미생물
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다음 단계를 포함하는 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법;(a) 제20항 내지 제30항 중 어느 한 항의 재조합 미생물을 배양하는 단계; 및(b) 만델레이트를 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트를 수득하는 단계
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다음 단계를 포함하는 2-하이드록시이소카프로에이트, 2-하이드록시헥사노에이트 및 2-하이드록시옥타노에이트로 구성되는 군에서 선택되는 화합물을 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트의 제조방법;(a) 제1항 내지 제4항 및 제6항 중 어느 한 항의 재조합 미생물을 2-하이드록시이소카프로에이트, 2-하이드록시헥사노에이트 및 2-하이드록시옥타노에이트로 구성되는 군에서 선택되는 화합물을 함유하는 배지에서 배양하는 단계; 및(b) 2-하이드록시이소카프로에이트, 2-하이드록시헥사노에이트 및 2-하이드록시옥타노에이트로 구성되는 군에서 선택되는 화합물을 단량체로 함유하는 폴리하이드록시알카노에이트를 수득하는 단계
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