| 1 |
1
B 세포 림프종 2(B-cell lymphoma 2; Bcl-2) 단백질을 과발현하고, 베클린 1(Beclin-1) 단백질을 과발현하도록 형질전환되며, DHFR 유전자가 결핍된 신규한 형질전환된 CHO 세포주
|
| 2 |
2
제 1항에 있어서, 상기 세포주는 수탁번호 KCTC 18247P로 기탁된 것을 특징으로 하는 세포주
|
| 3 |
3
1) 혈청 포함 배지에서 부착 배양하는 DHFR 유전자가 결핍된 숙주세포에 Bcl-2 유전자를 포함하는 벡터를 도입한 후 Bcl-2 단백질을 과발현하는 숙주세포를 선별하는 단계;2) 상기 단계 1)에서 선별된 Bcl-2 단백질을 과발현하는 숙주세포에 Beclin-1의 유전자를 포함하는 벡터를 도입한 후 Beclin-1 단백질을 과발현하는 숙주세포를 선별하는 단계; 및3) 상기 단계 2)에서 선별된 Bcl-2 단백질을 과발현하고 Beclin-1 단백질을 과발현하는 숙주세포를 무혈청 배지에서의 부유배양에 적응시키는 단계를 포함하는, Bcl2 단백질을 과발현하고 Beclin-1 단백질을 과발현하도록 형질전환되고 DHFR 유전자가 결핍된 세포주의 제조 방법
|
| 4 |
4
제 3항에 있어서, 상기 숙주세포는 CHO, VERO, BHK, HeLa, Cv1, MDCK, 293, 3T3, 미엘로마(myeloma), PC12 및 WI38 세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 제조 방법
|
| 5 |
5
제 3항에 있어서, 상기 숙주세포는 CHO dhfr 유전자 결핍된 세포인 것을 특징으로 하는 제조 방법
|
| 6 |
6
제 3항에 있어서, 상기 숙주세포는 CHO DG44 세포인 것을 특징으로 하는 제조 방법
|
| 7 |
7
1) 제 1항의 CHO 세포주에 목적 단백질을 코딩하는 유전자를 포함하는 벡터를 도입하여 목적 단백질을 발현하도록 형질전환된 CHO 세포주를 제조하는 단계;2) 상기 단계 1)에서 제조한 세포주를 배양하는 단계; 및3) 상기 단계 2)의 세포주에서 생산된 목적 단백질을 분리 및 정제하는 단계를 포함하는 목적 단백질의 생산 방법
|
| 8 |
8
제 7항에 있어서, 상기 목적 단백질은 가용성 TNF 수용체, 가용성 IL-4 수용체, 가용성 IL-1 유형 Ⅱ 수용체, 가용성 Flt3 리간드, 가용성 CD40 리간드, CD39, CD30, CD27, TEK/Ork, IL-15, 가용성 IL-15 수용체, Ox 40, GM-CSF, RANKL, RANK, TRAIL, 가용성 TRAIL 수용체, 조직 플라스미노겐 활성제(tissue plasminogen activator), 인자(Factor) Ⅷ, 인자(Factor) Ⅸ, 아포지방단백질(apolipoprotein) E, 아포지방단백질(apolipoprotein) A-Ⅰ, IL-2 수용체, IL-2 길항제(antagonist), 알파-1 안티트립신(alpha-1 antitrypsin), 칼시토닌(calcitonin), 성장 호르몬(growth hormone), 인슐린(insulin), 인슐리노트로핀(insulinotropin), 인슐린-유사 성장 인자(insulin-like growth factors), 파라티로이드 호르몬(parathyroid hormone), 인터페론(interferons), 수퍼옥사이드 디스뮤타제(superoxide dismutase), 글루칸(glucagon), 에리스로포이틴(erythropoeitin), 항체(antibody), 글루코세레브로시다제(glucocerebrosidase), Fc-융합 단백질(Fc-fusion protein), 글로빈(globins), 신경 성장 인자(nerve growth factors), 인터루킨(interleukins) 및 집락자극인자(colony stimulating factor)로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나인 것을 특징으로 하는 목적 단백질을 생산하는 방법
|
| 9 |
9
제 1항 내지 6항의 어느 한 항에 있어서, 상기 세포는 스트레스 환경에 대한 내성이 증가된 것을 특징으로 하는 세포
|
| 10 |
10
제 9항에 있어서, 상기 스트레스은 염 또는 고삼투 스트레스인 것을 특징으로 하는 세포
|
