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형광분석기반 효소 활성 검출 방법

  • 기술번호 : KST2015114020
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 산화그래핀을 이용한 형광분석기반 효소 활성 검출 용액 및 방법에 관한 것으로서 상기 효소는 엔도뉴클레아제, 헬리카제 및 DNA 메틸트랜스퍼라제로 구성된 군으로부터 선택된 것이고, 간단하고, 빠르며, 저비용으로 효소 활성을 실시간으로 정량적 모니터할 수 있고, 다수 시료의 형광 변화를 지켜봄으로써 병렬적(parallel), 고효율고속(high-throughput) 스크리닝의 구현이 가능한 핵산 기질 효소 활성 검출 용액 및 방법에 관한 것이다. 본 발명의 활성 검출 용액 및 방법을 이용하여, 핵산 기질 효소를 이용하는 임의의 연구, 및 항바이러스를 포함하는 항미생물 치료, 항암치료에 있어 약물 후보물질로서의 효소 억제제의 스크리닝에 손쉽게 적용할 수 있을 것이다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/25 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)
CPC C12Q 1/25(2013.01) C12Q 1/25(2013.01) C12Q 1/25(2013.01) C12Q 1/25(2013.01)
출원번호/일자 1020100060339 (2010.06.25)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-1554173-0000 (2015.09.14)
공개번호/일자 10-2012-0000156 (2012.01.02) 문서열기
공고번호/일자 (20150918) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2013.10.29)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 민달희 대한민국 대전광역시 유성구
2 여운석 대한민국 서울특별시 광진구
3 김동은 대한민국 서울특별시 광진구
4 장홍제 대한민국 대전광역시 유성구
5 김영관 대한민국 대전광역시 유성구
6 이지언 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 손민 대한민국 서울특별시 송파구 법원로 ***, *층(문정동)(특허법인한얼)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2010.06.25 수리 (Accepted) 1-1-2010-0409050-36
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
3 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)
2013.10.29 수리 (Accepted) 1-1-2013-0983208-75
4 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2014.10.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
5 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2014.11.12 수리 (Accepted) 9-1-2014-0086551-68
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
9 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2015.03.02 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0146675-34
10 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2015.04.30 수리 (Accepted) 1-1-2015-0424632-89
11 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2015.04.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2015-0424633-24
12 등록결정서
Decision to grant
2015.08.17 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0552034-56
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
15 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
엔도뉴클레아제, 헬리카제 및 DNA 메틸트랜스퍼라제로 구성된 군으로부터 선택된 효소, 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산 및 산화그래핀을 포함하는 효소 활성 검출 용액
2 2
제1항에 있어서, 상기 산화그래핀은 단일층의 시트 형인 효소 활성 검출 용액
3 3
제1항에 있어서, 상기 이중가닥 핵산은 DNA-DNA 이중가닥, RNA-RNA 이중가닥 또는 DNA-RNA 이중가닥인 효소 활성 검출 용액
4 4
제1항에 있어서, 상기 효소는 엔도뉴클레아제 및 DNA 메틸트랜스퍼라제로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소이고, 상기 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산에서, 상기 형광염료를 포함하는 단일가닥이 형광염료를 포함하지 않은 상보적인 단일가닥보다 짧으며,상기 이중가닥 핵산의 이중가닥 부분은 엔도뉴클레아제의 인식 염기서열을 포함하거나, 또는 DNA 메틸트랜스퍼라제의 인식 염기서열 및 엔도뉴클레아제의 인식 염기서열을 포함하는 효소 활성 검출 용액
5 5
제4항에 있어서, 상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 길고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합된 것인 효소 활성 검출 용액
6 6
제4항에 있어서, 상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 짧고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계와 반대 방향에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합된 것인 효소 활성 검출 용액
7 7
엔도뉴클레아제, 헬리카제 및 DNA 메틸트랜스퍼라제로 구성된 군으로부터 선택된 효소, 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산 및 산화그래핀(graphene oxide)의 혼합물로부터 형광 방출량을 일정한 시간 간격으로 측정하는 단계를 포함하는, 산화그래핀(graphene oxide)을 이용하여 엔도뉴클레아제, 헬리카제 및 DNA 메틸트랜스퍼라제로 구성된 군으로부터 선택된 효소의 활성을 검출하는 방법
8 8
제7항에 있어서, 상기 산화그래핀은 단일가닥 핵산에 선택적으로 결합하여 결합된 핵산에 포함된 형광염료로부터 방출되는 형광을 켄칭(quenching)하는 것인 방법
9 9
제7항 또는 제8항에 있어서,상기 효소는 헬리카제이고,측정된 형광방출량의 감소 정도에 따라 헬리카제가 이중가닥 핵산을 단일가닥 핵산으로 푸는 활성을 결정하는 방법
10 10
제7항 또는 제8항에 있어서,상기 효소는 엔도뉴클레아제이고,상기 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산에서, 상기 형광염료를 포함하는 단일가닥이 형광염료를 포함하지 않은 상보적인 단일가닥보다 짧으며, 상기 이중가닥 핵산의 이중가닥 부분은 엔도뉴클레아제의 인식 염기서열을 포함하고, 측정된 형광방출량의 증가 정도 또는 감소 정도에 따라 엔도뉴클레아제가 이중가닥 핵산을 절단하는 활성을 결정하는 방법
11 11
제10항에 있어서,상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 길고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합되며,측정된 형광방출량의 감소 정도에 따라 엔도뉴클레아제가 이중가닥 핵산을 절단하는 활성을 결정하는 방법
12 12
제10항에 있어서, 상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 짧고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계와 반대 방향에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합되며,측정된 형광방출량의 증가 정도에 따라 엔도뉴클레아제가 이중가닥 핵산을 절단하는 활성을 결정하는 방법
13 13
제7항 또는 제8항에 있어서,DNA 메틸트랜스퍼라제, 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산 및 산화그래핀(graphene oxide)의 혼합물에 엔도뉴클레아제를 추가로 부가하는 실험군, 및 엔도뉴클레아제, 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산 및 산화그래핀(graphene oxide)의 혼합물을 이용하는 대조군을 만들고,상기 단일가닥 말단에 형광염료를 포함하는 이중가닥 핵산에서, 상기 형광염료를 포함하는 단일가닥이 형광염료를 포함하지 않은 상보적인 단일가닥보다 짧고, 상기 이중가닥 핵산의 이중가닥 부분은 DNA 메틸트랜스퍼라제의 인식 염기서열 및 엔도뉴클레아제의 인식 염기서열을 포함하며, 실험군에서 측정된 형광방출량과 대조군에서 측정된 형광방출량의 차이에 따라 DNA 메틸트랜스퍼라제가 DNA에 메틸기를 치환시키는 활성을 결정하는 방법
14 14
제13항에 있어서,상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 길고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합되며,대조군에서 측정된 형광방출량이 실험군에서 측정된 형광방출량에 비하여 감소된 정도에 따라 DNA 메틸트랜스퍼라제가 DNA에 메틸기를 치환시키는 활성을 결정하는 방법
15 15
제13항에 있어서, 상기 핵산에서 이중가닥 부분이 단일가닥 부분보다 짧고,상기 형광염료를 포함하는 단일가닥의 양 말단 중에서, 핵산의 이중가닥 부분과 단일가닥 부분의 경계와 반대 방향에 위치한, 상기 단일가닥의 말단에 형광염료가 결합되며,대조군에서 측정된 형광방출량이 실험군에서 측정된 형광방출량에 비하여 증가된 정도에 따라 DNA 메틸트랜스퍼라제가 DNA에 메틸기를 치환시키는 활성을 결정하는 방법
16 16
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 효소 활성 검출 용액을 포함하는 효소 억제제 스크리닝 키트
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제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 효소 활성 검출 용액 및 효소 억제제 후보물질의 혼합물을 두 세트 이상 포함하고, 각 세트의 혼합물에는 각각 상이한 효소 억제제 후보물질 또는 각각 상이한 농도의 동일 효소 억제제 후보물질이 포함되어 있고, 상기 혼합물로부터 형광 방출량을 일정한 시간 간격으로 측정하는 단계를 포함하는 효소 억제제 스크리닝 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.