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번역 동반 시스템을 이용한 항균 펩타이드의 대량 발현방법

  • 기술번호 : KST2015117428
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 미생물로부터 항균 펩타이드(antimicrobial peptide)를 효과적으로 생산할 수 있는 유전자 구조물 및 이를 이용하여 항균 펩타이드를 효과적으로 대량생산 및 분리하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유전자 구조물에는 하나의 프로모터 하에 상반된 전하 값(charge)을 지닌 산성(acidic) 펩타이드와 염기성(basic)의 항균 펩타이드를 코딩하는 두 개의 독립된 시스트론(cistron)이 번역동반(translational coupling) 상태로 존재한다. 번역동반된 산성 펩타이드와 염기성 항균 펩타이드는 발현과 동시에 서로 전기적으로 결합(charge-charge interaction)하여 항균 펩타이드의 세포 독성을 중화시켜, 항균 펩타이드에 의한 숙주 미생물의 사멸을 방지할 수 있다. 뿐만 아니라, 화학물질 또는 효소에 의한 분해 없이 결합된 산성 펩타이드와 항균 펩타이드를 분리할 수 있어 재조합 미생물로부터 항균 펩타이드를 손쉽게 대량으로 생산할 수 있다. 항균 펩타이드, 대량발현, 번역동반(translational coupling), 산성 단백질
Int. CL C07K 14/47 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01)
CPC
출원번호/일자 1020070141932 (2007.12.31)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-0958095-0000 (2010.05.07)
공개번호/일자 10-2009-0073863 (2009.07.03) 문서열기
공고번호/일자 (20100514) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2007.12.31)
심사청구항수 9

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김선창 대한민국 대전 유성구
2 장수아 대한민국 대전 유성구
3 김정민 대한민국 대전 유성구
4 성봉현 대한민국 대전 유성구
5 임기정 대한민국 대전 유성구
6 신주리 대한민국 대전 유성구
7 이주영 대한민국 대전 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 박장원 대한민국 서울특별시 강남구 강남대로 ***, *층~*층 (논현동, 비너스빌딩)(박장원특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2007.12.31 수리 (Accepted) 1-1-2007-0952044-61
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2008.08.08 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2008.09.11 수리 (Accepted) 9-1-2008-0057144-12
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2009.10.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2009-0449712-13
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2009.12.29 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2009-0813418-31
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2009.12.29 수리 (Accepted) 1-1-2009-0813415-05
7 등록결정서
Decision to grant
2010.04.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2010-0185722-68
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
(i) 염기성 항균 펩타이드의 유전자 및 상기 염기성 항균 펩타이드의 양전하를 실질적으로 중화시킬 수 있는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 갖는 mIF3인 산성 펩타이드의 유전자를 하나의 프로모터 하에서 별개의 펩타이드로 번역 동반(translational coupling)되어 발현되도록 하는 2개의 시스트론으로 이루어진 2-시스트론(two-cistron) DNA 구조물을 제조하는 단계, (ii) 상기 2-시스트론 DNA 구조물을 발현 벡터에 삽입하고 이를 미생물에 도입시켜, 상기 염기성 항균 펩타이드와 상기 산성 펩타이드의 봉입체(inclusion body)를 발현시키는 단계 및 (iii) 상기 미생물 세포로부터 봉입체를 수득한 후 전하의 차이를 이용하여 염기성 항균 펩타이드를 분리하여 수득하는 단계 로 이루어지는 항균 펩타이드의 제조 방법
2 2
제1항에 있어서, 상기 DNA 구조물에서 2개의 시스트론은 첫 번째 시스트론의 종결코돈인 UAA 또는 UGA와 두 번째 시스트론의 개시코돈인 AUG가 겹쳐져 있는 UAAUG 또는 UGAUG서열로 연결되는 것인 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 단계 (i)에는 두 번째 시스트론의 번역을 증진시키기 위하여 첫 번째 시스트론의 종결코돈 앞에 샤인-달가노 서열(AGGAGGT)을 포함하는 염기 서열을 도입하는 단계가 포함되는 것인 방법
4 4
제3항에 있어서, 상기 염기 서열은 아미노산 서열 EEVE를 암호화하는 GAGGAGGTGGAA인 것인 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 염기성 항균 펩타이드는 히스토닌 II, 파라신 및 펙시가난 중의 어느 하나인 것인 방법
6 6
제1항에 있어서, 상기 산성 펩타이드는 1개 이상의 이황화 결합을 가지는 것인 방법
7 7
삭제
8 8
삭제
9 9
삭제
10 10
서열번호 3의 아미노산 서열을 갖는 mIF3 펩타이드
11 11
염기성 항균 펩타이드의 유전자 및 상기 염기성 항균 펩타이드의 양전하를 실질적으로 중화시킬 수 있는 서열 번호 3의 아미노산 서열을 갖는 mIF3인 산성 펩타이드의 유전자를 하나의 프로모터 하에서 별개의 펩타이드로 번역 동반되어 발현되도록 하는 2개의 시스트론으로 이루어진 2-시스트론 DNA 구조물
12 12
제11항에 있어서, 상기 항균 펩타이드는 히스토닌 II, 파라신 및 펙시가난 중 어느 하나이고, 상기 2개의 시스트론은 첫 번째 시스트론의 종결코돈인 UAA 또는 UGA와 두 번째 시스트론의 개시코돈인 AUG가 겹쳐져 있는 UAAUG 또는 UGAUG 서열로 연결되는 것인 2-시스트론 DNA 구조물
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2 JP21159952 JP 일본 FAMILY
3 US08003348 US 미국 FAMILY
4 US20100184949 US 미국 FAMILY

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1 JP2009159952 JP 일본 DOCDBFAMILY
2 JP4804525 JP 일본 DOCDBFAMILY
3 US2010184949 US 미국 DOCDBFAMILY
4 US8003348 US 미국 DOCDBFAMILY
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