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표적물질의 결합에 의한 압타머 구조 변화 특성을 이용한 등온 핵산 증폭방법 및 이를 이용한 초고감도 생체물질 검출방법

  • 기술번호 : KST2015114852
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 표적물질에 특이적으로 결합하는 압타머(aptamer)의 구조 변화 특성을 이용한 등온 핵산 증폭방법 및 이를 이용한 초고감도 생체물질 검출방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 생리활성 물질에 특이적으로 결합하는 압타머의 구조 변화 특성을 이용한 등온 핵산 증폭방법 (APINA: APtamer-based Isothermal Nucleic acid Amplification) 및 이를 이용하여 DNA, 단백질, 또는 생리활성 물질을 고감도로 검출할 수 있는 방법에 관한 것이다.본 발명에 따르면, 현재의 핵산검사를 현장진단 기술로 구현하는데 가장 큰 걸림돌인 기존 핵산 증폭방법(PCR)의 온도 변화를 요구하는 문제점을 해결함으로서, 체외진단 시장에서 경쟁력을 가지게 되어 막대한 경제, 산업적 가치의 창출을 기대할 수 있고, 상기 개발된 압타머 기반 등온 핵산증폭 기술(APINA)을 면역검사에도 적용하여 표적물질 (DNA, 단백질 및 생리활성물질)을 초고감도로 검출하기에 유용하다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01) C12N 15/115(2013.01)
출원번호/일자 1020120095583 (2012.08.30)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-1400995-0000 (2014.05.22)
공개번호/일자 10-2014-0029825 (2014.03.11) 문서열기
공고번호/일자 (20140529) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2012.08.30)
심사청구항수 29

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박현규 대한민국 대전광역시 유성구
2 박기수 대한민국 대전광역시 유성구
3 정철희 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2012.08.30 수리 (Accepted) 1-1-2012-0700207-81
2 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
3 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2013.04.01 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
4 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2013.05.09 수리 (Accepted) 9-1-2013-0035795-72
5 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2013.11.29 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0833802-04
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2013.12.26 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2013-1191782-74
7 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2013.12.26 수리 (Accepted) 1-1-2013-1191781-28
8 등록결정서
Decision to grant		 2014.05.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2014-0345201-40
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
(i) 주형 핵산; (ii) 압타머 특이적 표적물질; (iii) 상기 압타머의 염기서열을 포함하고, 상기 주형 핵산에 특이적으로 결합하는 내부 프라이머(inner primer); (iv) 핵산중합효소; (v) 상기 내부 프라이머보다 주형핵산의 5′말단에 가깝게 디자인된 외부 프라이머(outer primer); 및 (vi) 상기 압타머의 염기서열로 디자인된 부스터 프라이머(booster primer)를 포함하는 핵산 등온 중합 반응(APINA: APtamer-based Isothermal Nucleic acid Amplification)용 조성물
2 2
제1항에 있어서, 상기 표적물질은 DNA 또는 단백질인 것을 특징으로 하는 조성물
3 3
제1항에 있어서, 상기 표적물질은 ATP인 것을 특징으로 하는 조성물
4 4
제1항에 있어서, 상기 주형핵산은 이중가닥인 것을 특징으로 하는 조성물
5 5
제1항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 엑소뉴클레이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 것을 특징으로 하는 조성물
6 6
제5항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 Vent (exo-) DNA polymerase, Bst polymerase, Klenow fragment 및 Bsu DNA polymerase로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조성물
7 7
제1항에 있어서, 상기 등온 중합반응 온도는 55∼65℃인 것을 특징으로 하는 조성물
8 8
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항의 조성물을 등온에서 증폭시키는 것을 특징으로 하는 핵산의 등온 증폭방법
9 9
제8항에 있어서, 다음의 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 핵산의 등온 증폭방법: (a) 등온 상태에서, (i) 주형 핵산과 (ii) 표적 물질과 결합하는 압타머의 염기서열을 포함하고 상기 주형 핵산에 특이적으로 결합하는 내부 프라이머(inner primer)를 어닐링시키고, (iii) 압타머 특이적 표적물질과 압타머의 결합에 의해 내부 프라이머를 변형시키고, (iv) 핵산중합효소로 신장시키는 단계;(b) 내부 프라이머보다 주형핵산의 5′말단에 가깝게 디자인된 (v) 외부 프라이머(outer primer)를 주형핵산의 5′에 결합시켜 내부 프라이머에 의해 신장(extension)된 핵산을 치환하며, 신장시키는 단계;(c) 상기 (a) 및 (b) 단계를 반복하여 순차적으로 등온 증폭하는 단계; 및(d) 상기 (c) 단계에서 증폭된 핵산 중 표적물질-압타머 결합체에 의해 단일가닥으로 분리된 부분에 (vi) 부스터 프라이머(booster primer)를 어닐링시켜 중합반응시키는 단계
10 10
제9항에 있어서, 상기 표적물질은 DNA 또는 단백질인 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제9항에 있어서, 상기 표적물질은 ATP인 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제9항에 있어서, 상기 주형핵산은 이중가닥인 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제9항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 엑소뉴클레이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제13항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 Vent (exo-) DNA polymerase, Bst polymerase, Klenow fragment 및 Bsu DNA polymerase로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제9항에 있어서, 상기 등온 중합반응 온도는 55∼65℃인 것을 특징으로 하는 방법
16 16
압타머 특이적 표적물질을 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 (i) 주형 핵산; (ii) 상기 표적물질과 결합하는 압타머의 염기서열이 포함되고, 상기 주형핵산에 특이적으로 결합하는 내부 프라이머(inner primer); (iii) 핵산중합효소; (iv) 내부 프라이머보다 주형핵산의 5′말단에 가깝게 디자인된 외부 프라이머(outer primer); 및 (v) 압타머의 염기서열로 디자인된 부스터 프라이머(booster primer)를 포함하는 핵산 등온 중합 반응용 조성물을 등온에서 중합반응시켜 증폭산물을 확인하는 것을 특징으로 하는 압타머 특이적 표적물질의 검출방법
17 17
제16항에 있어서, 상기 압타머의 표적물질은 DNA 또는 단백질인 것을 특징으로 하는 방법
18 18
제16항에 있어서, 상기 압타머의 표적물질은 ATP인 것을 특징으로 하는 방법
19 19
제16항에 있어서, 검출대상 시료는 이중가닥 핵산인 것을 특징으로 하는 방법
20 20
제16항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 엑소뉴클레이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
21 21
제20항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 Vent (exo-) DNA polymerase, Bst polymerase, Klenow fragment 및 Bsu DNA polymerase로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
22 22
제16항에 있어서, 상기 중합반응 온도는 55∼65℃인 것을 특징으로 하는 방법
23 23
압타머 특이적 표적물질을 함유하는 것으로 추정되는 검출대상 시료와 (i) 주형 핵산; (ii) 상기 표적물질과 결합하는 압타머의 염기서열이 포함되고, 상기 주형핵산에 특이적으로 결합하는 내부 프라이머(inner primer); (iii) 핵산중합효소; (iv) 내부 프라이머보다 주형핵산의 5′말단에 가깝게 디자인된 외부 프라이머(outer primer); 및 (v) 압타머의 염기서열로 디자인된 부스터 프라이머(booster primer)를 포함하는 핵산 등온 중합 반응용 조성물을 등온에서 중합반응시켜 증폭산물을 정량하는 것을 특징으로 하는 압타머 특이적 표적물질의 정량방법
24 24
제23항에 있어서, 상기 압타머의 표적물질은 DNA 또는 단백질인 것을 특징으로 하는 방법
25 25
제23항에 있어서, 상기 압타머의 표적물질은 ATP인 것을 특징으로 하는 방법
26 26
제23항에 있어서, 검출대상 시료는 이중가닥 핵산인 것을 특징으로 하는 방법
27 27
제23항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 엑소뉴클레이즈 기능이 없고 DNA 치환 기능을 가지는 것을 특징으로 하는 방법
28 28
제27항에 있어서, 상기 핵산중합효소는 Vent (exo-) DNA polymerase, Bst polymerase, Klenow fragment 및 Bsu DNA polymerase로 구성된 군에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 방법
29 29
제23항에 있어서, 상기 중합반응 온도는 55∼65℃인 것을 특징으로 하는 방법
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국과학기술원 기초과학연구사업 초고감도 생체물질 진단을 위한 등온/정량 핵산증폭 원천 핵심기술의 개발