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핵산효소-분자비콘을 이용한 핵산의 검출방법

  • 기술번호 : KST2015115011
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 핵산효소와 분자비콘의 복합체 및 핵산 신호증폭방법을 이용한 핵산 검출방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 과산화효소 활성이 있는 핵산효소와 헤어핀 구조를 형성하는 분자비콘의 복합체와 블로커 핵산 및 핵산중합효소 반응을 통한 표적핵산을 검출하는 방법에 관한 것이다.본 발명에 따른 핵산검출방법은 핵산중합효소의 가닥치환 활성을 이용하여 표적핵산이 발색반응을 통한 신호 생성 과정에 반복적으로 재사용될 수 있도록 하여 높은 민감도로 표적핵산을 검출할 수 있으며, 이는 핵산뿐 아니라 단백질 및 소분자의 검출에도 적용될 수도 있다.
Int. CL C12Q 1/68 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C12N 15/11 (2006.01)
CPC C12Q 1/682(2013.01) C12Q 1/682(2013.01) C12Q 1/682(2013.01)
출원번호/일자 1020100116835 (2010.11.23)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자 10-1249493-0000 (2013.03.26)
공개번호/일자 10-2012-0055224 (2012.05.31) 문서열기
공고번호/일자 (20130401) 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2010.11.23)
심사청구항수 14

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 박현규 대한민국 대전광역시 유성구
2 롱장 후 중국 대전광역시 유성구
3 전경은 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2010.11.23 수리 (Accepted) 1-1-2010-0764464-17
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2012.03.15 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2012.04.24 수리 (Accepted) 9-1-2012-0032612-87
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2012.08.30 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2012-0513362-54
5 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2012.10.30 수리 (Accepted) 1-1-2012-0889952-08
6 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2012.10.30 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2012-0889953-43
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
8 등록결정서
Decision to grant		 2013.03.25 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2013-0195372-74
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
11 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
12 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
13 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
14 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
번호, 청구항의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 청구항 표입니다.
번호 청구항
1 1
다음의 단계를 포함하는 핵산의 검출방법:(a) i) 핵산효소-분자비콘 복합체;ii) 한쪽 말단에 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적핵산의 일부와 상보적인 서열을 가지며, 어느 한 말단에 표적핵산 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산;iii) 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 표적핵산을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적핵산 치환 프라이머;iv) 헤민;v) 핵산중합효소; 및 vi) dNTP가 함유된 핵산검출용액에 표적핵산을 함유하는 샘플을 혼합하고, 핵산중합효소 연쇄반응시켜 표적핵산을 블로커 핵산으로부터 분리시키는 단계; 및(b) 상기 분리된 표적핵산에 의해 활성화된 핵산효소-분자비콘 복합체를 포함하는 용액에 과산화효소 기질을 첨가하여 표적핵산을 검출하는 단계
2 2
제1항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산의 검출방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 과산화효소 기질은 ABTS[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)], TMB(3,3',5,5'-tetramethyl benzidine) 및 OPD(o-phenylenediamine)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산의 검출방법
4 4
한쪽 말단에 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적핵산의 일부와 상보적인 서열을 가지며, 어느 한 말단에 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 표적핵산을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적핵산 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산
5 5
제4항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 블로커 핵산
6 6
i) 핵산효소-분자비콘 복합체; ii) 한쪽 말단에 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적핵산의 일부와 상보적인 서열을 가지며, 어느 한 말단에 표적핵산 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산; iii) 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 표적핵산을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적핵산 치환 프라이머; iv) 헤민; v) 핵산중합효소; 및 vi) dNTP를 함유하는 핵산검출용액
7 7
제6항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 핵산검출용액
8 8
다음의 단계를 포함하는 소분자 또는 단백질의 검출방법:(a) i) 핵산효소-분자비콘 복합체;ii) 한쪽 말단에 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적 소분자 또는 단백질과 결합능을 가지는 압타머 서열을 가지며, 어느 한 말단에 표적 소분자 또는 단백질 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산;iii) 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 소분자 또는 단백질을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적 소분자 또는 단백질 치환 프라이머;iv) 헤민;v) 핵산중합효소; 및 vi) dNTP가 함유된 소분자 또는 단백질검출용액에 표적 소분자 또는 단백질을 함유하는 샘플을 혼합하고, 핵산중합효소 연쇄반응시켜 표적 소분자 또는 단백질을 블로커 핵산으로부터 분리시키는 단계; 및(b) 상기 분리된 표적 소분자 또는 단백질에 의해 활성화된 핵산효소-분자비콘 복합체를 포함하는 용액에 과산화효소 기질을 첨가하여 표적 소분자 또는 단백질을 검출하는 단계
9 9
제8항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 소분자 또는 단백질의 검출방법
10 10
제8항에 있어서, 상기 과산화효소 기질은 ABTS[2,2'-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)], TMB(3,3',5,5'-tetramethyl benzidine) 및 OPD(o-phenylenediamine)로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 소분자 또는 단백질의 검출방법
11 11
한쪽 말단에 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적 소분자 또는 단백질과 결합능을 가지는 압타머 서열을 가지며, 어느 한 말단에 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 소분자 또는 단백질을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적 소분자 또는 단백질 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산
12 12
제11항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 블로커 핵산
13 13
i) 핵산효소-분자비콘 복합체; ii) 한쪽 말단에 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 루프부분과 상보적인 서열을 가지고, 다른 말단에 표적 소분자 또는 단백질과 결합능을 가지는 압타머 서열을 가지며, 어느 한 말단에 표적 소분자 또는 단백질 치환 프라이머와 상보적인 서열을 함유하는 블로커 핵산; iii) 핵산중합효소 연쇄반응시 블로커 핵산에 붙어있는 소분자 또는 단백질을 분리시키고, 대신에 블로커 핵산에 상보적인 서열을 가지는 핵산으로 치환시키는 표적 소분자 또는 단백질 치환 프라이머; iv) 헤민; v) 핵산중합효소; 및 vi) dNTP가 함유된 소분자 또는 단백질검출용액
14 14
제13항에 있어서, 상기 핵산효소-분자비콘 복합체의 염기서열은 서열번호 1, 서열번호 4, 서열번호 7, 서열번호 10 및 서열번호 13으로 구성된 군에서 선택되는 것을 특징으로 하는 소분자 또는 단백질검출용액
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1 WO2012070863 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY
2 WO2012070863 WO 세계지적재산권기구(WIPO) FAMILY

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1 WO2012070863 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
2 WO2012070863 WO 세계지적재산권기구(WIPO) DOCDBFAMILY
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순번 연구부처 주관기관 연구사업 연구과제
1 교육과학기술부 한국과학기술원 기초연구사업-중견연구자지원사업-도약연구지원(도전연구)사업 초고감도 생체물질 진단을 위한 등온/정량 핵산증폭 원천 핵심기술의 개발
2 교육과학기술부 한국과학기술원 신기술융합형성장동력사업 광전기적 조효소 재생을 이용한 인공광합성 원천기술 개발