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클로스트리듐 속 미생물 유전자를 불활성화시키는 방법

  • 기술번호 : KST2015118873
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
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요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 클로스트리듐(Clostridium) 속(屬) 미생물에서의 목적 유전자를 불활성화시키는 방법 및 이에 따른 목적유전자가 불활성된 클로스트리듐 속 변이 미생물의 제조방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 람다 레드(Lambda Red) 재조합 효소를 발현하는 벡터 및 특정 선형 DNA를 이용하여 클로스트리듐 속 미생물의 염색체에 존재하는 유전자를 불활성화하는 방법에 관한 것이다. 본 발명에 따른 유전자를 불활성화시키는 방법은 기존의 유전자 불활성화 방법에 비하여 단순하다는 점과 유전자가 불활성화된 균주 선택이 쉽다는 점에서 유용하다. 클로스트리듐, 유전자 불활성화, DNA 재조합효소
Int. CL C12N 15/66 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01)
CPC C12N 15/74(2013.01) C12N 15/74(2013.01) C12N 15/74(2013.01) C12N 15/74(2013.01)
출원번호/일자 1020090089825 (2009.09.22)
출원인 지에스칼텍스 주식회사
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2011-0032375 (2011.03.30) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 등록
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2014.09.22)
심사청구항수 17

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 지에스칼텍스 주식회사 대한민국 서울특별시 강남구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 이상엽 대한민국 대전광역시 유성구
2 이종민 대한민국 강원 원주시
3 장유신 대한민국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 특허법인(유한) 대아 대한민국 서울특별시 강남구 역삼로 ***, 한양빌딩*층(역삼동)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 지에스칼텍스 주식회사 대한민국 서울특별시 강남구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application		 2009.09.22 수리 (Accepted) 1-1-2009-0582961-59
2 보정요구서
Request for Amendment		 2009.10.05 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2009-0073403-93
3 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2009.10.08 수리 (Accepted) 1-1-2009-0615458-68
4 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2013.02.01 수리 (Accepted) 4-1-2013-5019983-17
5 [심사청구]심사청구(우선심사신청)서
[Request for Examination] Request for Examination (Request for Preferential Examination)		 2014.09.22 수리 (Accepted) 1-1-2014-0895444-81
6 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157993-01
7 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5157968-69
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information		 2014.12.24 수리 (Accepted) 4-1-2014-5158129-58
9 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search		 2015.02.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
10 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search		 2015.04.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0024586-58
11 의견제출통지서
Notification of reason for refusal		 2015.12.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2015-0865596-45
12 [출원인변경]권리관계변경신고서
[Change of Applicant] Report on Change of Proprietary Status		 2016.01.11 수리 (Accepted) 1-1-2016-0026089-06
13 보정요구서
Request for Amendment		 2016.01.20 발송처리완료 (Completion of Transmission) 1-5-2016-0009382-18
14 [출원서등 보정]보정서
[Amendment to Patent Application, etc.] Amendment		 2016.01.21 수리 (Accepted) 1-1-2016-0070739-41
15 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment		 2016.02.11 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-0137969-39
16 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)		 2016.02.11 수리 (Accepted) 1-1-2016-0137964-12
17 등록결정서
Decision to grant		 2016.06.21 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0447505-53
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번호 청구항
1 1
DNA 재조합 효소를 코딩하는 유전자를 함유하는 벡터를 도입하여, DNA 재조합 효소를 발현하는, 형질전환된 클로스트리듐 속 미생물을 제작하는 단계; 및 상기 형질전환된 클로스트리듐 속 미생물에 목적 유전자의 상동적 부위 및 선택적 마커를 포함하는 선형 DNA 벡터를 도입하는 단계를 포함하고,상기 DNA 재조합 효소는 람다 레드 재조합 효소이고, 상기 벡터는 클로스트리듐 속 미생물 내의 제한효소 또는 DNase의 활성을 감소 또는 제거시키는 것을 특징으로 하는, 클로스트리듐 속 미생물에서 목적유전자를 불활성화시키는 방법
2 2
DNA 재조합 효소를 코딩하는 유전자를 함유하는 벡터를 도입하여, DNA 재조합 효소를 발현하는, 형질전환된 클로스트리듐 속 미생물을 제작하는 단계;상기 형질전환된 클로스트리듐 속 미생물에 목적 유전자의 상동적 부위 및 선택적 마커를 포함하는 선형 DNA 벡터를 도입하는 단계; 및상기 선택적 마커를 제거하는 단계를 포함하고,상기 DNA 재조합 효소는 람다 레드 재조합 효소이고,벡터는 클로스트리듐 속 미생물 내의 제한효소 또는 DNase의 활성을 감소 또는 제거시키는,목적유전자가 불활성화된 클로스트리듐 속 변이 미생물의 제조 방법
3 3
제1항에 있어서, 상기 클로스트리듐 속 미생물은 클로스트리듐 아세토부틸리쿰(Clostridium acetobutylicum), 클로스트리듐 바이예링키아이(Clostridium beijerinckii), 클로스트리듐 사카로부틸리쿰(Clostridium saccharobutylicum), 클로스트리듐 사카로퍼부틸아세토니쿰(Clostridium saccharoperbutylacetonicum), 클로스트리듐 퍼프린겐스(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 테타니(Clostridium tetani), 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile), 클로스트리듐 부티리쿰(Clostridium butyricum), 클로스트리듐 부틸리쿰(Clostridium butylicum), 클로스트리듐 클루이베리(Clostridium kluyveri), 클로스트리듐 타이로부틸리쿰(Clostridium tyrobutylicum), 클로스트리듐 타이로부티리쿰(Clostridium tyrobutyricum)으로 구성된 군에서 선택되는 1종인 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제2항에 있어서, 상기 클로스트리듐 속 미생물은 클로스트리듐 아세토부틸리쿰(Clostridium acetobutylicum), 클로스트리듐 바이예링키아이(Clostridium beijerinckii), 클로스트리듐 사카로부틸리쿰(Clostridium saccharobutylicum), 클로스트리듐 사카로퍼부틸아세토니쿰(Clostridium saccharoperbutylacetonicum), 클로스트리듐 퍼프린겐스(Clostridium perfringens), 클로스트리듐 테타니(Clostridium tetani), 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile), 클로스트리듐 부티리쿰(Clostridium butyricum), 클로스트리듐 부틸리쿰(Clostridium butylicum), 클로스트리듐 클루이베리(Clostridium kluyveri), 클로스트리듐 타이로부틸리쿰(Clostridium tyrobutylicum), 클로스트리듐 타이로부티리쿰(Clostridium tyrobutyricum)으로 구성된 군에서 선택되는 1종인 것을 특징으로 하는 방법
5 5
제1항에 있어서, 상기 DNA 재조합 효소를 코딩하는 유전자는 exo, gam 또는 bet인 것을 특징으로 하는 방법
6 6
제2항에 있어서, 상기 DNA 재조합 효소를 코딩하는 유전자는 exo, gam 또는 bet인 것을 특징으로 하는 방법
7 7
제1항에 있어서, 상기 벡터는 클로스트리듐 속 미생물 내의 제한효소 또는 DNase의 안티센스 RNA를 전사하는 것을 특징으로 하는 방법
8 8
제2항에 있어서, 상기 벡터는 클로스트리듐 속 미생물 내의 제한효소 또는 DNase의 안티센스 RNA를 전사하는 것을 특징으로 하는 방법
9 9
제1항에 있어서, 상기 벡터는 복제 안정성이 온도에 의해 조절되는 것을 특징으로 하는 방법
10 10
제1항에 있어서, 상기 선택적 마커는 항생제 내성 유전자인 것을 특징으로 하는 방법
11 11
제10항에 있어서, 상기 항생제 내성 유전자가 클로람페니콜, MLS 항생제, 카나마이신, 스펙티노마이신, 설폰아마이드계 항생제, 스트랩토마이신 내성 유전자로 구성된 군에서 선택된 1종 이상의 유전자인 것을 특징으로 하는 방법
12 12
제1항에 있어서, 상기 선택적 마커는 선형 DNA에 포함된 유전자DNA와 상이한 것을 특징으로 하는 방법
13 13
제1항에 있어서, 선택적 마커는 상기 벡터에 포함된 유전자 DNA와 상이한 것을 특징으로 하는 방법
14 14
제2항에 있어서, 상기 선택적 마커 제거 단계는 부위 특이적 재조합 효소를 발현시키는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법
15 15
제14항에 있어서, 상기 부위 특이적 재조합 효소가 플리페이즈(flippase, FLP)이고 재조합이 일어나는 부위가 FRT인 것으로 하는 방법
16 16
제14항에 있어서, 상기 부위 특이적 재조합 효소가 Cre 재조합 효소인 것을 특징으로 하는 방법
17 17
제2항의 방법으로 제조되는, DNA 재조합 효소를 발현하고, 목적 유전자의 상동적 부위 및 선택적 마커를 포함하는 선형 DNA 벡터가 도입되어 목적 유전자가 불활성되어 있는 클로스트리듐 속 변이 미생물
지정국 정보가 없습니다
패밀리정보가 없습니다
국가 R&D 정보가 없습니다.