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DNA 결합 단백질을 이용한 나노입자 클러스터 제작방법(Method for Preparing Nanoparticle Cluster Using DNA Binding Protein)

  • 기술번호 : KST2016014150
  • 담당센터 : 대전기술혁신센터
  • 전화번호 : 042-610-2279
요약, Int. CL, CPC, 출원번호/일자, 출원인, 등록번호/일자, 공개번호/일자, 공고번호/일자, 국제출원번호/일자, 국제공개번호/일자, 우선권정보, 법적상태, 심사진행상태, 심판사항, 구분, 원출원번호/일자, 관련 출원번호, 기술이전 희망, 심사청구여부/일자, 심사청구항수의 정보를 제공하는 이전대상기술 뷰 페이지 상세정보 > 서지정보 표입니다.
요약 본 발명은 크기 조절이 가능한 자성 나노입자 클러스터(NPCs)의 제작방법에 관한 것으로, 더욱 자세하게는 (a) 제1 결합물질이 수식되어 있는 징크핑거 단백질에 상기 징크핑거 단백질에 특이적으로 결합하는 서열을 포함하는 DNA 주형을 결합시켜 징크핑거-DNA 복합체를 형성시키는 단계; 및 (b) 상기 징크핑거-DNA 복합체와 제2 결합물질로 수식된 나노입자를 결합시켜 나노입자에 징크핑거-복합체가 결합되어 있는 나노입자 클러스터를 형성시키는 단계를 포함하는 나노입자에 징크핑거-복합체가 결합되어 있는 나노입자 클러스터의 제작방법 및 상기 방법으로 제작된 나노입자 클러스터에 관한 것이다. 본 발명에 의하면 나노입자 클러스터의 제작에 화학적 방법 대신 징크핑거 단백질을 이용하여 DNA 주형의 길이에 따라 크기를 조절할 수 있으므로, 다양한 나노입자에 적용 가능하고 질병·진단 치료와 이미징을 비롯한 다양한 분야에 응용할 수 있다.
Int. CL B82B 3/00 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) A61K 49/06 (2006.01) G01N 33/574 (2006.01)
CPC A61K 47/50(2013.01) A61K 47/50(2013.01) A61K 47/50(2013.01) A61K 47/50(2013.01)
출원번호/일자 1020150009423 (2015.01.20)
출원인 한국과학기술원
등록번호/일자
공개번호/일자 10-2016-0089780 (2016.07.28) 문서열기
공고번호/일자 문서열기
국제출원번호/일자
국제공개번호/일자
우선권정보
법적상태 소멸
심사진행상태 수리
심판사항
구분 신규
원출원번호/일자
관련 출원번호
심사청구여부/일자 Y (2015.01.20)
심사청구항수 12

출원인

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구

발명자

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번호 이름 국적 주소
1 김학성 대한민국 대전광역시 유성구
2 류이슬 대한민국 대전광역시 유성구
3 김종문 중국 대전광역시 유성구

대리인

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번호 이름 국적 주소
1 장제환 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)
2 이처영 대한민국 서울특별시 강남구 언주로 ***, **층 (역삼동, 윤익빌딩)(*T국제특허법률사무소)

최종권리자

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번호 이름 국적 주소
1 한국과학기술원 대한민국 대전광역시 유성구
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번호 서류명 접수/발송일자 처리상태 접수/발송번호
1 [특허출원]특허출원서
[Patent Application] Patent Application
2015.01.20 수리 (Accepted) 1-1-2015-0059533-05
2 선행기술조사의뢰서
Request for Prior Art Search
2015.07.10 수리 (Accepted) 9-1-9999-9999999-89
3 선행기술조사보고서
Report of Prior Art Search
2015.09.10 수리 (Accepted) 9-1-2015-0057481-25
4 의견제출통지서
Notification of reason for refusal
2016.08.31 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2016-0630548-54
5 [명세서등 보정]보정서
[Amendment to Description, etc.] Amendment
2016.10.31 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) 1-1-2016-1060022-79
6 [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서
[Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation)
2016.10.31 수리 (Accepted) 1-1-2016-1060021-23
7 등록결정서
Decision to grant
2017.02.10 발송처리완료 (Completion of Transmission) 9-5-2017-0102328-66
8 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2019.04.24 수리 (Accepted) 4-1-2019-5081392-49
9 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.05.15 수리 (Accepted) 4-1-2020-5108396-12
10 출원인정보변경(경정)신고서
Notification of change of applicant's information
2020.06.12 수리 (Accepted) 4-1-2020-5131486-63
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번호 청구항
1 1
다음 단계를 포함하는 나노입자에 징크핑거-복합체가 결합되어 있는 나노입자 클러스터의 제작방법; (a) 제1 결합물질이 수식되어 있는 징크핑거 단백질에 상기 징크핑거 단백질에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 징크핑거 결합 서열을 포함하는 DNA 주형을 결합시켜 징크핑거-DNA 복합체를 형성시키는 단계; 및(b) 상기 징크핑거-DNA 복합체와 제2 결합물질로 수식된 나노입자를 결합시켜 나노입자에 징크핑거-복합체가 결합되어 있는 나노입자 클러스터를 형성시키는 단계;여기서, 제1 결합물질은 바이오틴이고, 제2 결합물질은 스트렙트아비딘(streptavidin), 아비딘 (avidin), 뉴트라비딘(neutravidin) 및 캡트아비딘(captavidin)으로 구성되는 군에서 선택되는 것이거나, 제1 결합물질은 스트렙트아비딘(streptavidin), 아비딘 (avidin), 뉴트라비딘(neutravidin) 및 캡트아비딘(captavidin)으로 구성되는 군에서 선택되는 것이고, 제2 결합물질은 바이오틴인 것을 특징으로 할 수 있고, 상기 징크핑거 단백질은 QNK-QNK-RHR 또는 Cys2His2이며, 상기 나노입자는 자성입자가 도핑된 나노입자, 금 나노입자, 은 나노입자 및 양자점으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상 또는 이들의 조합인 것을 특징으로 할 수 있음
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제1항에 있어서, 상기 징크핑거-DNA 복합체는 상기 DNA 주형의 징크핑거 결합서열 보다 적거나 동일한 개수의 징크핑거 단백질을 함유하는 것을 특징으로 하는 방법
4 4
제1항에 있어서, 상기 DNA 주형은 하나 이상의 징크핑거 결합 서열을 함유하는 DNA 블록이 제한효소 인식부위를 가지는 링커로 2개 이상 연결되어 있는 것을 특징으로 하는 방법
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제1항에 있어서, 상기 징크핑거 단백질은 QNK-QNK-RHR이고, 상기 징크핑거 단백질에 특이적으로 결합하는 서열은 "GAGGCAGAA"인 것을 특징으로 하는 방법
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징크핑거 단백질과 특이적으로 결합하는 하나 이상의 징크핑거 결합 서열을 포함하는 DNA 주형과 징크핑거 단백질이 결합된 징크핑거-DNA 복합체에 나노입자가 결합되어 있는 나노입자 클러스터로,여기서, 징크핑거-DNA 복합체와 나노입자의 결합은 아비딘-바이오틴 결합에 의한 것인 것을 특징으로 할 수 있고, 상기 징크핑거 단백질은 QNK-QNK-RHR 또는 Cys2His2이며, 상기 나노입자는 Fe2O3, Fe3O4, Zn2+ 및 Mn2+으로 구성된 군에서 선택되는 자성입자가 도핑된 나노입자, 금 나노입자, 은 나노입자 및 양자점으로 구성되는 군에서 선택되는 하나 이상 또는 이들의 조합인 것을 특징으로 하는 나노입자 클러스터
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제12항에 있어서, 상기 징크핑거-DNA 복합체는 상기 DNA 주형의 징크핑거 결합서열 보다 적거나 동일한 개수의 징크핑거 단백질을 함유하는 것을 특징으로 하는 나노입자 클러스터
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제12항에 있어서, 상기 DNA는 하나 이상의 징크핑거 결합 서열을 함유하는 DNA 블록이 제한효소 인식부위를 가지는 링커로 2개 이상 연결되어 있는 것을 특징으로 하는 나노입자 클러스터
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제12항에 있어서, 상기 징크핑거 단백질은 QNK-QNK-RHR이고, 상기 징크핑거 단백질에 특이적으로 결합하는 서열은 "GAGGCAGAA"인 것을 특징으로 하는 나노입자 클러스터
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NK-QNK-RHR 또는 Cys2His2의 징크핑거 단백질과 특이적으로 결합하는 하나 이상의 징크핑거 결합 서열을 포함하는 DNA 주형과 징크핑거 단백질이 아비딘-바이오틴 결합에 의해 결합되어 있는 징크핑거-DNA 복합체에 자성나노입자가 결합되어 있는 나노입자 클러스터를 함유하는 조영제 조성물
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제12항의 나노입자 클러스터에 세포표면에 위치하는 수용체와 결합할 수 있는 리간드가 수식되어 있는 것을 특징으로 하는 세포표적용 나노입자 클러스터
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제22항에 있어서, 세포표면에 위치하는 수용체와 결합할 수 있는 리간드는 엽산인 것을 특징으로 하는 세포표적용 나노입자 클러스터
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제23항의 세포표적용 나노입자 클러스터를 함유하는 세포표적용 조성물
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1 미래창조과학부 한국과학기술원 이공분야기초연구사업 암 치료를 위한 혁신적인 리피바디-약물 복합체 개발