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세포 내에서의 목적 단백질 유도 진화 방법
- 기술번호 : KST2015112919
- 담당센터 : 대전기술혁신센터
- 전화번호 : 042-610-2279
| 요약 | 본 발명은 세포 내 목적 단백질의 유도 진화가 가능한 방법에 관한 것으로, 구체적으로 파지 복제기점 및 목적 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 운반체 플라스미드 및 상기 목적 단백질에 의해 작동이 조절되는 프로모터 및 리포터 유전자를 포함하는 선택 플라스미드가 도입된 대장균에 돌연변이 유발물질을 처리하여 목적 단백질의 유전자 서열에 돌연변이를 유도한 후, 하이브리드 헬퍼 파지를 감염시켜 돌연변이 운반체 파지를 수득하고 이를 선택 플라스미드로 형질전환된 대장균에 다시 형질 전환시킨 후 유도 진화된 목적 단백질을 생산하는 형질전환체를 선별하고, 다시 돌연변이 유발물질 처리 후, 배양 및 선별 과정을 반복하는 것을 특징으로 하는 재조합 대장균 세포 내 목적 단백질의 유도 진화 시스템에 관한 것이다. 본 발명의 시스템은 상기 형질전환된 대장균에 반복적으로 돌연변이 유발물질 처리, 배양 및 선별에 의해 신속하고 간단하게 목적 단백질의 유도 진화를 수행할 수 있다. 목적 단백질 유도 진화, 자동화, 헬퍼 파지, 돌연변이, 선별 |
|---|---|
| Int. CL | C12N 7/02 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01) |
| CPC | C12N 7/00(2013.01) C12N 7/00(2013.01) C12N 7/00(2013.01) C12N 7/00(2013.01) C12N 7/00(2013.01) |
| 출원번호/일자 | 1020080006138 (2008.01.21) |
| 출원인 | 한국과학기술원 |
| 등록번호/일자 | 10-0984644-0000 (2010.09.27) |
| 공개번호/일자 | 10-2009-0080266 (2009.07.24) 문서열기 |
| 공고번호/일자 | (20101001) 문서열기 |
| 국제출원번호/일자 | |
| 국제공개번호/일자 | |
| 우선권정보 | |
| 법적상태 | 소멸 |
| 심사진행상태 | 수리 |
| 심판사항 | 심판사항 |
| 구분 | 신규 |
| 원출원번호/일자 | |
| 관련 출원번호 | |
| 심사청구여부/일자 | Y (2008.01.21) |
| 심사청구항수 | 16 |
출원인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
발명자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이도헌 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 2 | 나도균 | 대한민국 | 경남 마산시 |
대리인
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 이원희 | 대한민국 | 서울특별시 강남구 테헤란로 ***, 성지하이츠빌딩*차 ***호 (역삼동) |
최종권리자
| 번호 | 이름 | 국적 | 주소 |
|---|---|---|---|
| 1 | 한국과학기술원 | 대한민국 | 대전광역시 유성구 |
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 [Patent Application] Patent Application |
2008.01.21 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0048282-40 |
| 2 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2008.01.28 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2008-0069557-37 |
| 3 | 선행기술조사의뢰서 Request for Prior Art Search |
2009.08.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 4 | 선행기술조사보고서 Report of Prior Art Search |
2009.09.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-2009-0049774-68 |
| 5 | 의견제출통지서 Notification of reason for refusal |
2009.11.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2009-0482000-32 |
| 6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 [Designated Period Extension] Application of Period Extension(Reduction, Progress relief) |
2010.01.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0044747-34 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 [Opinion according to the Notification of Reasons for Refusal] Written Opinion(Written Reply, Written Substantiation) |
2010.01.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0064290-39 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 [Amendment to Description, etc.] Amendment |
2010.01.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2010-0064288-47 |
| 9 | 거절결정서 Decision to Refuse a Patent |
2010.06.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2010-0266780-28 |
| 10 | 명세서 등 보정서(심사전치) Amendment to Description, etc(Reexamination) |
2010.07.23 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 7-1-2010-0031169-45 |
| 11 | 등록결정서 Decision to grant |
2010.09.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2010-0420572-18 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
| 13 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
| 14 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
| 15 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
| 16 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 17 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 18 | 출원인정보변경(경정)신고서 Notification of change of applicant's information |
2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 번호 | 청구항 |
|---|---|
| 1 |
1 복제기점이 제거된 M13K07 파지의 게놈 DNA 및 상기 M13K07 파지와 다른 복제기점을 가진 gt11 파지의 게놈 DNA가 서로 융합된 융합 게놈을 갖는 하이브리드 헬퍼 파지 |
| 2 |
2 삭제 |
| 3 |
3 삭제 |
| 4 |
4 ⅰ) 파지 복제기점 및 LuxR을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 운반체 플라스미드와 ⅱ) 상기 LuxR에 의해 작동이 조절되는 프로모터인 pLux 및 이에 작동 가능하게 연결된 항생제 저항성 유전자를 포함하는 선택 플라스미드를 포함하는 LuxR 단백질 유도진화용 조성물 |
| 5 |
5 1) 파지 복제기점 및 LuxR을 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 운반체 플라스미드를 제조하는 단계; 2) 상기 LuxR에 의해 작동이 조절되는 프로모터인 pLux 및 이에 작동 가능하게 연결된 항생제 저항성 유전자를 포함하는 선택 플라스미드를 제조하는 단계; 3) 상기 운반체 플라스미드와 상기 선택 플라스미드가 숙주세포에 형질도입된 제 1 형질전환체를 제조하는 단계; 4) 상기 제 1 형질전환체에 돌연변이 유발물질을 처리하여 돌연변이된 제 2 형질전환체를 제조하는 단계; 5) 상기 제 2 형질전환체에 제 1항의 하이브리드 헬퍼 파지를 감염시키는 단계; 6) 단계 5)의 감염된 제 2 형질전환체를 배양하여 돌연변이 운반체 파지를 생성하는 단계; 7) 단계 6)의 생산된 돌연변이 운반체 파지를 회수하는 단계; 8) 상기 선택 플라스미드가 숙주세포에 형질도입된 제 3 형질전환체를 제조하는 단계; 9) 상기 제 3 형질전환체에 상기 돌연변이 운반체 파지를 감염시키는 단계; 10) 단계 9)의 감염된 제 3 형질전환체를 항생제가 포함된 배지에서 상기 항생제의 농도를 높여가면서 배양하는 단계; 11) 단계 10)의 배양액에 항생제의 농도를 급격히 높여서 추가하여 배양하는 단계; 및, 12) 단계 11)의 배양액에서 단일 콜로니를 선별하는 단계를 포함하는 제 1항의 하이브리드 헬퍼 파지를 이용한 LuxR 단백질의 유도진화 방법 |
| 6 |
6 삭제 |
| 7 |
7 삭제 |
| 8 |
8 제 5항에 있어서, 단계 1)의 파지 복제기점은 M13 기점인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 9 |
9 삭제 |
| 10 |
10 제 5항에 있어서, 단계 2)의 플라스미드는 추가적으로 lamB를 암호화하는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 11 |
11 제 5항에 있어서, 단계 2)의 항생제 저항성 유전자는 베타-락타메이즈(beta-lactamase)를 암호화하는 폴리뉴클레오티드인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 12 |
12 제 5항에 있어서, 리포터 단백질을 암호화하는 폴리뉴클레오티드가 추가적으로 항생제 저항성 유전자에 작동가능하도록 연결된 것을 특징으로 하는 방법 |
| 13 |
13 제 12항에 있어서, 상기 리포터 단백질은 녹색 형광성 단백질(GFP), 증강된 녹색 형광성 단백질(EGFP), 적색 형광성 단백질(RFP), 증강된 적색 형광성 단백질(ERFP), 청색 형광성 단백질(BFP), 증강된 청색 형광성 단백질(EBFP), 황색 형광성 단백질(YFP), 증강된 황색 형광성 단백질(EYFP), 남색 형광성 단백질(CFP), 및 증강된 남색 형광성 단백질(ECFP)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 14 |
14 제 5항에 있어서, 항생제는 베타-락탐(beta-lactam) 계열의 아즈트레오남(aztreonam; AZT)인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 15 |
15 제 5항에 있어서, 단계 2)의 선택 플라스미드는 단계 1)의 운반체 플라스미드의 자가복제에 필요한 복제기점과 상이한 복제기점을 포함하는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 16 |
16 제 5항에 있어서, 숙주세포는 대장균인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 17 |
17 제 5항에 있어서, 숙주세포는 단계 5)의 하이브리드 헬퍼 파지가 스스로 복제하기 위해 필요한 단백질을 합성하지 않는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 18 |
18 제 5항에 있어서, 숙주세포는 F'을 가지지만 SupF를 가지지 않는 대장균인 것을 특징으로 하는 방법 |
| 19 |
19 제 18항에 있어서, 숙주세포는 XL1-Blue MRF' 대장균(Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac [F' proAB lacIqZΔM15 Tn10 (Tetr)]), JM109 대장균(rpsL thr leu thi lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm glnV44 Δ(lac-proAB) e14- [F' traD36 proAB+ lacIq lacZΔM15] hsdR17(rK-mK+)), SURE 대장균(endA1 glnV44 thi-1 gyrA96 relA1 lac recB recJ sbcC umuC::Tn5 uvrC e14- Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)171 F'[ proAB+ lacIq lacZΔM15 Tn10] )으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 20 |
20 제 5항에 있어서, 단계 4)의 돌연변이 유발물질은 EMS, ENNG, MMS, MNNG, ENU, MNU, 아미노시티딘(aminocytidine), 디아조우라실(diazouracil), 아자시티딘(azacytidine), 아미노퓨린(aminopurine), 머캅토퓨린(mercaptopurine), 글리옥살(glyoxal), 포름알데히드(formaldehyde), CHP, BHP, 4-NQO, MX, AF-2, 캅탄(captan), 포스메트(phosmet), NaN3으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 21 |
21 제 5항에 있어서, 단계 11)의 항생제의 농도를 높여가면서 배양하는 과정은 5 내지 10회 반복되는 것을 특징으로 하는 방법 |
| 지정국 정보가 없습니다 |
|---|
| 패밀리정보가 없습니다 |
|---|
| 국가 R&D 정보가 없습니다. |
|---|
- 본 등록정보는 참고용으로 법적증빙자료로 사용할 수 없습니다.
- 데이터 이관에 따른 소요기간(1일)으로 인하여 등록원부와 일부 차이가 발생할 수 있으며, 일부 정보(부기, 상세 주소 등)를 제공하지 않고 있습니다.
- 법적증빙자료로 활용하시거나 더 자세한 정보를 보시려면 등록원부를 발급받아 사용하시기 바랍니다.
| 특허 등록번호 | 10-0984644-0000 |
|---|
권리란
| 표시번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
출원 연월일 : 20080121 출원 번호 : 1020080006138 공고 연월일 : 20101001 공고 번호 : 특허결정(심결)연월일 : 20100924 청구범위의 항수 : 16 유별 : C12N 7/00 발명의 명칭 : 세포 내에서의 목적 단백질 유도 진화 방법 존속기간(예정)만료일 : 20170928 |
특허권자란
| 순위번호 | 사항 |
|---|---|
| 1 |
(권리자) 한국과학기술원 대전광역시 유성구... |
등록료란
| 제 1 - 3 년분 | 금 액 | 334,500 원 | 2010년 09월 28일 | 납입 |
| 제 4 년분 | 금 액 | 392,000 원 | 2013년 08월 30일 | 납입 |
| 제 5 년분 | 금 액 | 274,400 원 | 2014년 08월 27일 | 납입 |
| 제 6 년분 | 금 액 | 274,400 원 | 2015년 08월 26일 | 납입 |
| 제 7 년분 | 금 액 | 495,600 원 | 2016년 08월 30일 | 납입 |
- 본 '원본보기 서비스'는 참고용이므로, 일부 오류 및 누락이 발생할 수 있습니다.
- 정확한 서류를 확인하시려면 해당 웹사이트에서 조회하시기 바랍니다. (특허로 바로가기: http://www.patent.go.kr)
- 해당 서비스는 점검으로 인해 매주 일요일 00:00 ~ 02:00까지 이용이 중단됩니다.
| 번호 | 서류명 | 접수/발송일자 | 처리상태 | 접수/발송번호 |
|---|---|---|---|---|
| 1 | [특허출원]특허출원서 | 2008.01.21 | 수리 (Accepted) | 1-1-2008-0048282-40 |
| 2 | [명세서등 보정]보정서 | 2008.01.28 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2008-0069557-37 |
| 3 | 선행기술조사의뢰서 | 2009.08.10 | 수리 (Accepted) | 9-1-9999-9999999-89 |
| 4 | 선행기술조사보고서 | 2009.09.11 | 수리 (Accepted) | 9-1-2009-0049774-68 |
| 5 | 의견제출통지서 | 2009.11.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2009-0482000-32 |
| 6 | [지정기간연장]기간연장(단축, 경과구제)신청서 | 2010.01.22 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0044747-34 |
| 7 | [거절이유 등 통지에 따른 의견]의견(답변, 소명)서 | 2010.01.29 | 수리 (Accepted) | 1-1-2010-0064290-39 |
| 8 | [명세서등 보정]보정서 | 2010.01.29 | 보정승인간주 (Regarded as an acceptance of amendment) | 1-1-2010-0064288-47 |
| 9 | 거절결정서 | 2010.06.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2010-0266780-28 |
| 10 | 명세서 등 보정서(심사전치) | 2010.07.23 | 보정승인 (Acceptance of amendment) | 7-1-2010-0031169-45 |
| 11 | 등록결정서 | 2010.09.24 | 발송처리완료 (Completion of Transmission) | 9-5-2010-0420572-18 |
| 12 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2013.02.01 | 수리 (Accepted) | 4-1-2013-5019983-17 |
| 13 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157968-69 |
| 14 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5157993-01 |
| 15 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2014.12.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2014-5158129-58 |
| 16 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2019.04.24 | 수리 (Accepted) | 4-1-2019-5081392-49 |
| 17 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.05.15 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5108396-12 |
| 18 | 출원인정보변경(경정)신고서 | 2020.06.12 | 수리 (Accepted) | 4-1-2020-5131486-63 |
| 기술정보가 없습니다 |
|---|
| 과제고유번호 | 1345120334 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2005-2000343 |
| 연구과제명 | 멀티오믹스 통합 네트워크 특성 추출을 통한 대사 관련 질병 분석 및 예측 |
| 성과구분 | 등록 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국연구재단 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술원 |
| 성과제출연도 | 2010 |
| 연구기간 | 200704~201203 |
| 기여율 | 1 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1350007264 |
|---|---|
| 세부과제번호 | 2005-01450 |
| 연구과제명 | 임베디드바이오시스템을위한역공학기술 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 교육과학기술부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국과학재단 |
| 연구주관기관명 | 한국과학기술원 |
| 성과제출연도 | 2006 |
| 연구기간 | 200504~200703 |
| 기여율 | 0.5 |
| 연구개발단계명 | 기초연구 |
| 6T분류명 | BT(생명공학기술) |
| 과제고유번호 | 1415092143 |
|---|---|
| 세부과제번호 | INFRA11 |
| 연구과제명 | 특허경비지원 |
| 성과구분 | 출원 |
| 부처명 | 지식경제부 |
| 연구관리전문기관명 | 한국산업기술평가원 |
| 연구주관기관명 | 한국산업기술진흥협회 |
| 성과제출연도 | 2008 |
| 연구기간 | 200604~201103 |
| 기여율 | 0.5 |
| 연구개발단계명 | 응용연구 |
| 6T분류명 | 기타 |
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| 번호 | 심판번호(숫자) | 심판번호(문자) | 사건의표시 | 청구일 | 심결일자 |
|---|---|---|---|---|---|
| 1 | 2010101005630 | 2010원5630 | 2008년 특허출원 제0006138호 거절결정불복 | 2010.07.23 | 2010.09.24 |